❶ 桑枝生物碱怎样提取
v 对于DNJ提取方法的研究很多 关于DNJ的开发利用已经取得了很大的发展 煎煮法是提取生物碱的传统方法 但由于煎煮法对DNJ成品性质的影响较大 许多实验室内都是以液相色谱或类似方法提取和测定DNJ 效果比较理想 尽管如此 由于成本昂贵 操作稍显复杂 不利于DNJ的大量提取和广泛利用 本实验采用了蒸馏水和有机溶剂提取桑DNJ的工艺相对简单 经济实用 具有实际可操作性 DNJ本身无紫外或可见光吸收 但与显色剂碘 碘化钾试剂混合后 其吸收光谱发生了变化 可能是生成了一种新物质的缘故 在一定DNJ浓度范围内 该物质吸光度与DNJ浓度符合Lambert一Beer定侓 据此可用分光光度法测定桑叶中DNJ含量 2、简单经济的提取条件分析桑中的DNJ是水溶性生物碱 采用蒸馏水和有机溶剂（乙醇）提取工艺能有效提取FNJ 且工艺简单 经济 本实验的重点是研究从夏伐桑枝中提取DNJ的方法 是对蚕业生产中夏伐的桑枝进行收集 选择在60·C、80%的乙醇、浴比为1: 10的条件下回流提取2小时的工艺条件进行DNJ提取 然后将上述各提取液经0 0 1 x7的阳离子交换树脂分离 后收集产物 利用紫外分光光度计分别进行DNJ的分离和提取液中DNJ含量的测定 最后对不同的夏伐桑枝样品中DNJ的提取效率进行比较 筛选出夏伐提取DNJ的最佳提取条件和储存时间 为实际应用打下基础 实验设计中酒精 冷冻干燥的条件利用对进一步开发有充分的保障 在实验条件的选择上 做了非常仔细的筛选 6 0。C条件下提取对桑枝中DNJ的提取过程显得温和 同时有效的节约加热能源 8 0%的乙醇循环回流提取既是对现有的提取条件的有效利用（DNJ系列多功能乙醇回收浓缩器）也是考虑在7 0.75%的酒精条件下对提取物具有灭菌消毒作用的结果 浴比为1: 10的条件下可以最大限度的节约提取溶剂的量 作为最佳的提取工艺过程 在结果和耗材上均有明显的优势 也是本专利的实际应用价值 实验旨在与蚕业生产的实用性和适用性相结合 以形成的～种经济 适用的DNJ提取利用方法 获得可以用于降血糖功能的纯天然保健品 为糖尿病的预防和治疗提供参考
同时 桑产品提取物中 除含有DNJ外 还含有其他杂质 DNJ在通常情况下带正电荷 将桑提取液通过阳离子交换柱时 DNJ可与阳离子交换树脂所带正电荷进行交换 而使DNJ吸附在树脂上 当用氨水洗脱时 DNJ又被置换下来 利用此法可以除去部分杂质 从而对DNJ进行纯化 这对获得高纯度的DNJ提供了重要的方法和前提
❷ 生物碱常用的提取方法 〔越详细越好〕
摘要：利用生物碱盐能够交换到强酸型阳离子交换树脂柱上,一般要采用强酸型阳离子交换树脂从氢氧化钠溶液中提取,再用盐酸洗下来.同时强酸型阳离子交换树脂也得到再生.
生物碱的提取：
由于各种生物碱的结构不同,性质各异,提取分离方法也不尽相同,主要是根据生物碱的溶解度而定.生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂,除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外,一般均不溶或难溶于水,而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇.基于这种特性,可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出,常用的提取溶剂有下列3种：
（1） 非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润,使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态,然后用氯仿或乙醚等提取,一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等,氢氧化铵不能将其完全分解,可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁,甚至氢氧化钠碱化,这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱.
（2） 极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%～1%盐酸、硫酸、乙酸、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取,该方法较简便,但提出的杂质较多,需进一步净化.
（3） 混合溶剂：用不同极性的溶剂按不同比例混合,可以较好地进行提取,如麦角用氯仿：甲醇：氢氧化铵（90:9:1）,百部、粉防已用乙醚：氯仿：乙醇：10%氢氧化铵溶液（25:8:25:1）等.
水溶性生物碱还可采用与生物碱沉淀试剂如雷氏盐（硫氰化铬铵）、磷钨酸等生成不溶的复盐而从水溶液中析出.生物碱与雷氏盐生成的沉淀可溶于丙酮,再通过阳离子交换树脂,用氢氧化铵洗脱即得游离的生物碱,生物碱与磷钨酸生成的沉淀可与固体碳酸钾研磨使干燥,再用无水乙醇热提.
实际上,每种分析法的建立都要对上述三类溶剂作比较,以优选出最佳提取溶剂.
生物碱的提取方法,常用的有冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取,由于中药分析所涉及到的大部分内容是有机化合物微量分析,故需要的样品量很少,因此,实际上是少量样品与大量提取溶剂,加上样品又经粉碎过筛,常常冷浸提取液中被测组分浓度与提取液中粉碎的样品内所含被测组分相当,即能提取完全.为了使提取更完全,也常常对上述方法进行组合如冷浸-渗漉,冷浸-超声波,冷浸-索氏提取,冷浸-热回流提取,因冷浸、冷浸-超声波提取操作简便,故使用较多,必要时,要对上述方法作比较,以优选出最佳提取方法.
分离：
1.净化
上述方法得到的总生物碱中常含有大量杂质,在分离之前一般需净化.净化的方法常依据提取方法及含有的杂质而定.
·水或酸水提取液的净化
1. 离子交换树脂法
提取液
│
│通过强酸型（氢型）阳离子交换树脂
┌——————┴———————————┐
↓ ↓
流出液 树脂柱
（非碱性物质） ┌——————┴———————————┐
│方法一 │方法二
│氨液碱化树脂 │碱液洗脱
│晾干后,亲脂性有机溶剂提取 │
↓ ↓
亲脂性总生物碱 亲水性总生物碱
2. 有机溶剂萃取法
提取液
│
│碱化,亲脂性有机溶剂萃取
┌——————┴———————————┐
↓ ↓
有机溶剂层 碱水层
│
│浓缩
↓
总生物碱
·醇类溶剂提取液的净化
醇提取液
│
↓浓缩
浸膏
│
│酸水溶解
┌——————┴———————————┐
↓ ↓
不溶物 酸水液
（非碱性脂溶性杂质） │
│碱化,亲脂性有机溶剂萃取
┌———┴———┐
↓ ↓
有机溶剂层 水层
│
│浓缩
↓
总生物碱
2.将生物碱粗分为弱碱性生物碱、中强碱性和强碱性生物碱、水溶性生物碱三部分,再根据结构中是否有酸性基团（主要指酚羟基）,分为酚性和非酚性两类.
3.生物碱单体的分离
·利用生物碱碱性的差异进行分离
即在不同PH条件下进行分离——pH梯度法,有两种操作：
1. 方法1
总生物碱 / 酸水溶解
│
│用碱调节PH由低到高
│每调一次用氯仿萃取一次
┌————┬———┴———┬—————┐
↓ ↓ ↓ ↓
氯仿液 氯仿液 氯仿液 氯仿液
PH值： 低 —————————————————→ 高
得到的生物碱碱度： 弱 —————————————————→ 强
2. 方法2
总生物碱 / 氯仿溶解
│
│用不同pH缓冲酸溶液依次萃取
┌————┬———┴———┬—————┐
↓ ↓ ↓ ↓
缓冲液 缓冲液 缓冲液 缓冲液
PH值： 高 —————————————————→ 低
得到的生物碱碱度： 强 —————————————————→ 弱
得到的缓冲液加碱碱化,用有机溶剂萃取,回收溶剂,即得到不同碱度的生物碱.采用pH梯度法分离前,通常先用多缓冲纸色谱法对总碱中各生物碱的碱度强弱作初步了解,据此调节pH值.
·利用生物碱或生物碱盐溶解度的差异进行分离
生物碱以及生物碱盐在不同溶液的溶解度可能存在明显的差异,可用于分离.
如：氧化苦参碱是苦参碱的氮氧化物,极性稍大,不溶于乙醚.而苦参碱溶于乙醚,于两者的氯仿液中加入乙醚,氧化苦参碱即可析出.
如：麻黄碱草酸盐在水中的溶解度比伪麻黄碱草酸盐的溶解度小,可以自水溶液中先行析出.
· 利用生物碱特殊功能基不同进行分离
┌ 有无酚羟基——利用酚羟基可溶于NaOH溶液,用NaOH溶液处理与无酚羟基者分离.
│
例如 ┤ 有无内酯或内酰胺结构——利用内酯、内酰胺在苛性碱溶液中加热可开环生成溶于水
│ 的羧酸盐,与无内酯、内酰胺结构的生物碱分离.
│
└ 制备功能基衍生物——利用仲胺可与亚硝酸生成亚硝基衍生物,或与氯乙酰或氯甲酸
乙酯生成相应的酯等,与叔胺分离.
· 利用色谱法进行分离
利用色谱法可以得到生物碱单体纯品.
┌ 吸附色谱法 ┌ 氧化铝
│ │
多用 ┤ 反相色谱法 吸附剂 ┤ 硅胶
│ │
└ 分配色谱法 └ 纤维素
┌吸附色谱法可用苯、氯仿、乙醚等有机溶剂.
洗脱剂┤
└分配色谱法可用缓冲液饱和的有机液.
❸ 谁知道怎样提取含有硷的植物的碱份
1 生物碱提取技术
1.1 生物碱提取的传统方法
选择适宜的提取方法对制备生物碱保持有效成分的活性具有重要意义。目前使用的传统方法按照固液接触状态可分为静态方式（如煎煮、浸渍）和动态方式(如回流、渗漉)[4]。
1.1.1 煎煮
煎煮法（decoction）是中药最早、最常用的制剂方法之一，适用于有效成分能溶于水，且对加热不敏感的药材，能够提取出相对较多的有效成分。
黄际薇等[5]采用酸水煎煮，以苦参碱和氧化苦参碱的提取率为指标，用正交试验法优选了山豆根的提取工艺。M.G. Ortega 等[6]考察了使用煎煮法从石松属药材植物Huperzia Saururus 中提取生物碱，取80g 干燥粉碎后的药材，用600 mL 沸水煎煮2 次，每次时间为1 h，合并提取液后碱化，然后用氯仿萃取，再经有机相蒸发后得到总生物碱0.25 g。
1.1.2 浸渍
浸渍法（maceration）可在常温或加热的条件下浸泡药材获取有效成分，操作简单易行，但所需时间长，溶剂用量大，有效成分浸出率低。常温浸渍是较为常用的生物碱提取方法，如秦学功等[7]考察了苦豆子种子中生物碱的冷浸工艺条件，室温下用稀盐酸提取苦豆籽中的苦参总生物碱，研究不同条件下的总碱浸出率，最高可达3.7％以上。陈月圆等[8]以小檗碱为指标，对黄柏中的总生物碱提取方法进行了优化，分别用水、乙醇和酸作为溶剂，使用乙醇为溶剂的提取率为84.4％，远高于其他两种溶剂。
1.1.3 回流
回流法（circumfluence）是以乙醇等易挥发的有机溶剂为溶媒，对浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后再次冷凝，重新回到浸出器中继续参与浸取过程，多采用索氏提取器完成。此法操作简便，提取率较高。龙德清等[9]用酸性醇回流法提取魔芋中总生物碱，得到最佳的工艺条件为在pH 值2～3的酸性醇中回流3 h，总生物碱含量为0.39％。回流法操作时间较长，且整个过程处于加热状态，不适用于热敏性生物碱的提取。
1.1.4 渗漉
渗漉法（percolation）的提取过程类似多次浸取过程，浸出液可以达到较高浓度，浸出效果较好。此法常温操作不需加热，溶剂用量少，过滤要求较低，使分离操作过程简化，尤其适用于热敏性、易挥发且有效成分含量较低或贵重药材提取。采用0.5%的硫酸溶液对中药材黄连用渗漉法提取，收集7 倍量渗漉液即可保证生物碱的提取率，与回流法比较，渗漉法提取物含杂质少、提取率高、使用溶剂量少[10]。渗漉法的操作技术要求较高，否则会影响提取效率，当提取物为黏性、不易流动的成分时，不宜使用该法。
❹ 生物碱离子交换法分离的条件是
1.利用生物碱的碱性差异进行分离
方法：酸水-碱化-萃取法
注意：
①强碱在弱酸性条件下能形成生物碱盐，易溶于水；弱碱则需在较强酸性条件下形成生物碱盐而溶于水。
②成盐后，弱碱盐在弱碱条件下即可转变成游离生物碱，易溶于亲脂性有机溶剂；强碱盐则需在较强碱性条件下转变成游离生物碱，溶于亲脂性有机溶剂。
总碱中各生物碱的碱性不同，可用pH梯度萃取法进行分离。
具体方法有两种：
①总生物碱溶于亲脂性有机溶剂， pH由高至低依次萃取，生物碱可按碱性由强至弱先后成盐依次被萃取出而分离
②总生物碱溶于酸水，逐步加碱使pH值由低至高分离。
对于碱性有差别的两种生物碱，可采用调pH后简单萃取法分离。如从洋金花的乙醇浸出液中分离莨菪碱和东莨菪碱，利用二者碱性差别，将乙醇浸出液浓缩后碱化到pH 9～10，三氯甲烷萃取，三氯甲烷萃取液再用稀酸水萃取，将此酸水液用固体碳酸氢钠碱化后以三氯甲烷萃取，东莨菪碱因碱性小游离出来而被萃取出。水层再用氨水碱化至pH l0，用三氯甲烷可萃取出碱性稍强的莨菪碱。
2.利用溶解度差异进行分离
游离生物碱：如苦参中苦参碱和氧化苦参碱的分离
（氧化苦参碱的极性大于苦参碱，难溶于乙醚）
汉防己中汉防己甲素和汉防己乙素的分离
（汉防己甲素的极性小于汉防己乙素，可溶于冷苯）
生物碱盐：如麻黄中分离麻黄碱、伪麻黄碱
（在草酸中溶解度不同，麻黄碱溶解度小于伪麻黄碱）
3.利用特殊官能团进行分离
含羧基的生物碱能与碳酸氢钠生成羧酸盐而溶于水，可与其他碱分离；
酚性生物碱的酚羟基具有弱酸性，可与氢氧化钠溶液生成盐溶于水，而与其他非酚性生物碱分离。如在阿片生物碱中，吗啡具酚羟基而可待因无酚羟基，可用5%氢氧化钠分离。
内酯或内酰胺结构的生物碱可在碱性水液中加热开环生成溶于水的羧酸盐而与其他生物碱分离，在酸性下又环合成原生物碱而沉淀，如喜树碱。
4.利用色谱法进行分离
（1）吸附柱色谱
常用氧化铝或硅胶作为吸附剂，有时也用纤维素、聚酰胺等。以苯、氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂或以其为主的混合溶剂系统作洗脱剂。
（2）分配柱色谱
对某些结构特别相近的生物碱，可采用分配色谱法。
如三尖杉中的抗癌生物碱三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的分离，两者结构仅差一个亚甲基。具体方法是以硅胶为支持剂，以pH 5.0缓冲液为固定相，pH 5.0缓冲液饱和的三氯甲烷溶液洗脱，首先洗脱的是高三尖杉酯碱，中间部分是二者的混合物，最后部分是三尖杉酯碱。
5.高效液相色谱法（HPLC）
优点：分离效能好、灵敏度高、分析速度快。
色谱柱类型：硅胶吸附色谱柱，C18反相色谱柱。
此外，制备型薄层色谱、干柱色谱、中压或低压柱色谱等也常用于分离生物碱。
水溶性生物碱（季铵碱）的分离
（一）沉淀法
实验室常用雷氏铵盐试剂纯化季铵碱。
（二）溶剂法
利用水溶性生物碱能够溶于极性较大而又能与水分层的有机溶剂（如正丁醇、异戊醇或氯仿-甲醇的混合溶剂等）的性质，用这类溶剂与含这类生物碱的碱水液反复萃取，使水溶性生物碱与强亲水性的杂质得以分离。
生物碱的色谱检识
常用方法：薄层色谱法、纸色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法
（一）薄层色谱法
1.吸附薄层色谱法
（1）吸附剂
吸附剂常用硅胶和氧化铝。
硅胶适用注意：硅胶为酸性吸附剂，易造成拖尾或复斑，影响分离效果。可在涂铺硅胶薄层时加稀碱（0.1～0.5mol/L氢氧化钠）或缓冲溶液，制成碱性薄板；或使色谱过程在碱性条件下进行，即在展开剂中加入少量碱性试剂，如二乙胺、氨水等。
氧化铝本身显弱碱性，不经处理便可用于分离和检识生物碱，一般较常用，特别适合分离亲脂性较强的生物碱。
（2）展开剂
展开剂系统多以亲脂性溶剂为主，一般以三氯甲烷为基本溶剂。
若Rf值太小，加入适量甲醇、丙酮等极性较大的溶剂；
若Rf值太大，加入适量苯、环己烷等极性较小的溶剂。
在展开剂中加入少量碱性试剂，如二乙胺、氨水等，可改善分离效果。
2.分配薄层色谱
特别适用于分离有些结构十分相近的生物碱。
（1）支持剂与固定相：
通常选用硅胶或纤维素粉作支持剂，以甲酰胺或水为固定相。
甲酰胺适合分离弱极性或中等极性的生物碱；水适合分离水溶性生物碱。
（2）展开剂：
分离脂溶性生物碱，应以亲脂性有机溶剂作展开剂，如三氯甲烷-苯（1：1）等；
分离水溶性生物碱，则应以亲水性的溶剂作展开剂，如BAW系统（正丁醇-乙酸-水=4：1：5，上层）。
在配制流动相时，需用固定相饱和。
3.显色方法
①有色生物碱可直接观察斑点；
②具有荧光的生物碱在紫外光下显示荧光斑点；
③大多生物碱的薄层色谱可用改良碘化铋钾试剂显色，显橘红色斑点。（如碘化铋钾不显色，可选用其他特殊显色剂）
❺ 分离水溶性和脂溶性生物碱的常用方法
酸性溶液加雷氏铵盐生成沉淀
沉淀溶于丙酮，过滤
滤液通过氧化铝柱净化，丙酮洗脱
滤液加计算量氯化钡，过滤，滤液中即含有生物碱盐酸盐
雷氏铵盐沉淀法分离纯化水溶性生物碱的方法与步骤，可简单概括为沉淀生成、沉淀纯化和沉淀分解3个主要步骤。
❻ 生物碱如何提取分离
这是一个比较典型的碱提酸沉法提取生物碱的过程：hcl调ph值2-3，可以使生物碱溶解于醇水溶剂中，用有机溶剂提取杂质，取醇水部位加碱，使生物碱游离出来，并根据其脂溶性，萃取到氯仿层中，挥干溶剂，便可以得到粗生物碱。