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车间微生物涂布怎么做

发布时间:2023-03-13 04:47:34

1. 混菌法和涂布法

两个差不多,不过我推荐你使用涂布法。混菌法比较难,反正当时我们做微生物实验时做过比较,结果用涂布法长出的菌落比混菌法好,污染少。不过,混菌法有利于混匀菌液。
混菌法:首先准备干净灭菌的平板,然后吸取一定量的菌液于培养皿中,再倒入温度已经降到60度以下(差不多也行)的培养基,盖上盖子,平置于桌上来回轻轻移动使之充分混匀。整个过程一定是无菌操作。
涂布法:首先配置系列浓度的菌液(你是化学专业的所以这个你应该会吧?不过,提醒下,配制时移液管要用灭过菌的,移液时不用洗耳球用嘴巴吸、吹,一般稀释到10^(-6)就行,这个视你本来菌液的浓度而定),然后吸取你要的那个浓度的菌液(一定量)于准备好的培养基中,在用专门的玻璃涂棒(这个的名字我忘了)涂匀就行了。整个过程无菌操作。
至于培养的时间,温度等得看你培养的是什么菌,这个网上有的。

2. 微生物平板涂布注意事项

微生物平板涂布注意事项:

1、样品要准确称取待测样品l0g,放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使微生物细胞分散,静置20-30s,即成10-1稀释液。

2、用稀释平板计数时,待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时,稀释度应高,反之则低。

3、涂抹平板计数法与混合法基本相同,所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上。

(2)车间微生物涂布怎么做扩展阅读:

涂布平板法的特征:

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在。

再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。

此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些成品检定(如杀虫菌剂等)、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。

参考资料来源:网络—涂布平板法

3. 涂布平板法的注意事项

微生物的分离平板涂布法和平板划线法分离微生物的区别

由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。

先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 稀释涂布法:

优点:可以计数,可以观察菌落特征。

缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。

一般用于平板培养基的回收率计数!!

微生物平板涂布法有以下注意事项:

1、整个过程需要保证在无菌条件下进行。试管、枪头等仪器设备都需要提前经过灭菌环节才可以使用。

2、接种环使用前应当在酒精灯上灼烧至红热,以保证灼烧充分。

3、蘸取少量菌液,先在培养皿上划第一条,注意不要转动接种环。

4、在稀释过程中要充分混匀,,吸取100ul到平板上,然后用烧好的涂布棒均匀涂抹开,各个方向都可以涂布,涂布完灼烧。

5、注意力度大小适宜,不应划破培养基的表面。

6、每个稀释度用一个灭菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。(3)车间微生物涂布怎么做扩展阅读涂抹平板计数法的操作方法是:先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上(每个编号设三个重复)。再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀,每个稀释度用一个灭菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。在由低浓度向高浓度涂抹时,也可以不更换刮铲。将涂抹好的平板平放于桌上20—30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,保温培养,至长出菌落后即可计数。

4. 稀释涂布平板法是什么

该法是将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基,先倒入无菌培养皿中,制成无菌平板。待充分冷却凝固后,将一定量(约0.1 ml)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平板表面,倒置温箱培养后挑取单个菌落。

计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。

微生物平板涂布法有以下注意事项:

1、整个过程需要保证在无菌条件下进行。试管、枪头等仪器设备都需要提前经过灭菌环节才可以使用。

2、接种环使用前应当在酒精灯上灼烧至红热,以保证灼烧充分。

3、蘸取少量菌液,先在培养皿上划第一条,注意不要转动接种环。

4、在稀释过程中要充分混匀,吸取100ul到平板上,然后用烧好的涂布棒均匀涂抹开,各个方向都可以涂布,涂布完灼烧。

5. 稀释涂布法是怎么样的

稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。

稀释平板涂布大部分是用于统计细菌数目的,不知道哪个稀释浓度最后长出来有适合统计的菌落数,所以必须每个稀释度都涂板子。

倒平板的方法

如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。

平板培养基的冷凝方法有两种,一种是将平板一个个摊开在桌面上冷凝,另一方法是将几个平板叠在一起冷凝。前者冷凝速度较快,在室温较高时采用;而后者冷凝速度较慢,可在室温较低时采用,其优点是形成冷凝水少,尤其适用于平板划线等的需要。

以上内容参考:网络-稀释倒平板法

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