空气微生物采样应如何布点

1. 微生物的采样方法（详细点！）

常用的空气微生物采样方法有四种：沉降法、固体撞击法、液体撞击法、滤过法。

最常用的是平板沉降法，其采集步骤是：在采样前先用紫外线对所要采样的房间照30分钟，使室内处于相对清洁、静止状态，然后将及时领取的新鲜营养琼脂平板，置室内四角及中央各一个，将平板盖打开扣于无菌巾上，暴露20分钟，加盖及时送检，以防污染。

1.2 采样方法
在0.33hm2左右的采样区域内，按15m×15m的面积划分为12个样方。1998年6月在每个样方中分别确定生长水平中等的Ⅰ度(1年生)、Ⅱ度（3年生）、Ⅲ度（5年生）竹各3株，分别在毛竹基部挖开，顺竹蔸取连在根上粒径小于1cm土壤作为根区土壤，并分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度各3株竹的根区土样混合成一个样品，作为该样方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度竹的根区土样。同时在每个样方的竹林中多点采集和根区土深度一致的林间土样1个，采集时尽量避开竹鞭，各点均离竹鞭5厘米以上。
1.3 分析方法
土样带回室内后分成两份，1份鲜样分析土壤微生物三大类；另1份风干、去杂、过筛后测定土壤各类酶活性。土壤微生物计数采用平板法[12]，细菌采用牛肉蛋白胨培养基；真菌采用马丁氏琼脂培养基；放线菌采用高泽1号琼脂培养基。土壤过氧化氢酶采用容量法；蔗糖酶采用二硝基水杨酸比色法；脲酶采用苯酚——次氯酸比色法；蛋白酶采用茚三酮比色法；磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法。〔13〕

2. 空气采样的方法

可直接采集少量气样。这种方法测得的结果是瞬时浓度或短时间内的平均浓度，能较快地获得结果。常用的采样容器有注射器、塑料袋、采样管、真空瓶(管)等。
(一)注射器采样
常用l00mL注射器，采样时，先用现场空气抽洗3～5次，然后抽取100 mL，用橡皮帽密封进气口，将注射器进气口朝下，垂直放置，使注射器内压
力约大于大气压。样品存放时间不宜长，一般应当天分析完。
(二)塑料袋采样
选择与气样中污染组分不发生化学反应、不吸附、不渗漏的塑料袋。常用的有聚四氟乙烯袋、聚乙烯袋及聚酯袋等。为减小对被测组分的吸附，可在袋的内壁衬银、铝等金属膜。采样时，先用二联球打进现场气体冲洗3～5次，再充满气样，夹封进气口，带回尽快分析。
(三)采气管采样
采气管是两端具有旋塞的管式玻璃容器，其容积为l00～500 mL。采样时，打开两端旋塞，将二联球或抽气泵接在管的一端，迅速抽进比采气管容
积大6～10倍的欲采气体，使采气管中原有气体被完全置换出，关上两端旋塞，采气体积即为采气管的容积。
(四)真空瓶采样
真空瓶是一种用耐压玻璃或不锈钢制成的采气瓶，容积为500～1000 mL。采样前先用抽真空装置将采气瓶内抽至剩余压力1 330 Pa左右；如瓶内预先装人吸收液，可抽至溶液冒泡为止，关闭旋塞。采样时，打开旋塞，被采空气即充人瓶内，关闭旋塞，则采样体积为真空采气瓶的容积。由于真空瓶瓶塞磨口处易漏气，抽真空后瓶口拉封，到现场采样时，从瓶口断痕线处弄断，空气即充进瓶内，然后套上橡皮小帽，带回实验室分析。如果采气瓶内真空度达不到l 330 Pa，实际采样体积应根据剩余压力进行计算。

3. 空气微生物采样研究的方法～

空气浮游微生物采样器是根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计。被采样的带有微生物的空气在抽气泵作用下，高速喷射并撞击到装有培养基的培养皿上，经培养后形成菌落予以计数。

对固体撞击式采样法与平板沉降法进行初步实验。结果表明，使用固体撞击式采样法测定空气微生物的含量总数与平板沉降法采获的总数结果差异有显着性,平板沉降法只能收集到较大颗粒的微生物，不能作精确的定量计数，它可作为一般卫生学的检验手段。固体撞击式采样法对悬浮于空气中小颗粒微生物捕获率高于沉降法，并能较准确地表达出空气中细菌的实际含量，是一种较理想的的采样方法。

4. 怎样的取样阀用怎样的微生物取样方法

微生物取样方法
举例一：
一、 空气采样及检验方法
1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制
2采样（空气沉降法）
2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。
4检测频率：每周
空气质量标准：
生车间、熟车间、成品车间：低于100个
半成品库、成品库：低于10个
二、设备的采样与检验方法
根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法
1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）
取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）
将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张

5. 空气微生物的采样

100多年来，研究者设计了多种多样的采样器 ，归纳起来可分为五类，即惯性撞击类、过滤阻留类、静电沉着类、温差迫降类和生物采样类 。 1 自然沉降法。它是利用空气微生物粒子的重力作用，在一定的时间内，让所处区域的空气中微生物颗粒逐步沉降到带有培养介质的平皿内的一种采样方法。自然沉降法粗糙，不能测定空气流量和悬浮在空气中的小粒子上的细菌，但对于那些因菌粒子沉着而致的污染，例如伤口的污染仍有一定的价值。
2 射流撞击式采样器(裂隙式采样器)。这是当今微生物采样器中应用最广泛、品种最多的一类采样器。它是利用各种抽气装置，以每分钟恒定气流量，使空气通过狭小喷嘴，以便空气和悬浮于其 中的微生物粒子形成高速气流，在离开喷嘴时气流射向采集面，气体沿采集面拐弯而去，而颗粒则按惯性继续直线前进 ，撞击并粘附于采集面上，从而被捕获。这类采样器能作空气微生物的定量测定。按其所用的撞击面不同，又分为固体撞击式采样器和液体撞击式采样器两种。
3 离心撞击式采样器 离心撞击式采样器是利用气体在旋转径路中运动时所产生的离心力，使粒子获得一定动量，并因其惯性而偏离气体流线，撞击沉着在附近的采集面上。 生物类采样器即用敏感的动物和植物来进行空气微生物的检测。