㈠ 化脓性球菌微生物学检查中标本类型有哪些
标本类别应该有血液、体液、脓液和其它分泌物等类别。
㈡ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
病原微生物种类繁多,变异迅速,快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前,应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因晶片、多聚酶链反应等,该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物,又称病原体,有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强,往往造成世界性大流行,因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐,检测周期长,而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展,病原学诊断已不再局限于病原体水平,深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交技术、PCR技术、基因晶片技术等检测方法,自动化程度高,快速省时、无污染、结果精确,可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主,将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。1.1 直接涂片镜检病原微生物体形体积微小,大多无色半透明状,将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速,对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用,例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接涂片镜检不需要特殊的仪器和装置,在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。1.2 分离培养与生化反应 分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。细菌的生长繁殖需要一定时间,检测周期较长,不能同时处理批量样本。为解决这一问题,各种自动化培养和鉴定系统不断产生,传统鉴定方法也在逐步改进,大大加快了检验速度。例如Microscan WalLCAway全自动微生物分析仪,可同时做细菌鉴定和药敏试验,检验500多个菌种。苛养菌如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对营养要求比较高,常规培养阳性率低。雍刚 等将不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生长因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌剂加入到巧克力培养基中制成了新型淋病奈瑟菌培养基,大大提高了淋病奈瑟菌的分离培养率。苏盛通等在营养琼脂中加人了中药红枣、赤小豆培养甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌等细菌,生长指数明显高于血平板。1.3 组织细胞培养 活组织细胞培养适于专营活组织细胞内生存的病原体,包括病毒、立克次体、衣原体等。不同病原体敏感的组织细胞是不一样的,将活细胞从病原体敏感的动物组织中取出在体外进行原代培养或用病原体敏感细胞系进行传代培养,再将病原体接种于相应的组织细胞中后,病原体可在其中繁殖增长,引起特异性的细胞病变效应。也可以将病原体直接接种于敏感动物体内,引起相应组织器官出现特异的病理学改变。往往可以根据这些特异的病变对病原体进行鉴定。2 血清学与免疫学检测血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术,简化了鉴定步骤,常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。酶联免疫技术的应用大大提高了血清学检测的敏感性和特异性,不仅可检测样本中病原体抗原,也可检测机体的抗体成分。幽门螺奸菌在我国人群感染率高达50% ~80% ,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HP抗体来诊断HP感染,其结果满意。乙型肝炎病毒(HBV)在我国人群中感染率极高,ELISA应用于乙型肝炎病人早期血清学诊断的效果最为明显。临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上,通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物,在外部磁场磁力的作用下,将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠,如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等,广泛应用到各级科研和实验室 。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测,检测时间缩短至4 h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌,免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157最低检测限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测,肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS.PCR检测
目前主要普通培养(简称标)般报告要用仪器、核酸检测(PCR)、目前快速检测(主要包括:免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等根据自需求选择
目前主要有普通培养法(简称国标方法)一般出报告的要用,仪器法、核酸检测法(PCR)、还有目前的快速检测法(主要包括:免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等。这个根据自己的需求来选择吧。
简述hiv的微生物学检测方法有哪些
梅毒是由苍白螺旋体感染引起的一种性传播性疾病 。梅毒螺旋体感染人体后出现两种抗体:一种是特异性抗体(TPHA),为lgM。当有补体存在和厌氧条件下,对活螺旋体的动力有抑制作用,并可将螺旋体杀死或溶解,对机体的再感染有保护作用。另一类是非特异性抗体(快速血浆反应素 RPR)。为lgA与lgM的混合物,可与正常生物组织中的类脂抗原发生非特异性结合,对人体无保护作用
传统检测有三种方法
1、直接显微镜观察,正常情况,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度以及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。
2、选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件,选择培养基,其作用是允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养一般是通过观察微生物的同化作用型别或某一特征进行间接判断,得到的微生物往往并不只有一种,但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。
3、鉴别培养基,根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比,鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小,一般可直接测定某微生物的种类。
现代定义
微生物:个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。
微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。(但有些微生物是肉眼可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”,但是它的生存必须依赖于活细胞。
根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等,按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。
主要特征
1、体小面大
2、吸多转快
3、生长繁殖快
微生物的这一特性使其在工业上有广泛的应用,如发酵、单细胞蛋白等。微生物是人类不可或缺的好朋友。
这个是我在网上找到的的微生物的检测试纸片,也不知道方法咋样,你要也可以去网站上看看的
像大肠杆菌测试纸片 肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食物传播性疾病的病因。它除了引起腹泻、出血性肠炎外,还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来,肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延,相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻爆发和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、进口食品、腹泻病患者、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。大肠杆菌O157测试片(FilmplateTM E.coli O157BO204)3方元方圆生物的采用进口高选择性显色培养基作为主要原料,运用专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15~24h就可确认,大大地简化了检测程式,非常适合各级检验部门和食品企业使用。本品适用于海产品、水产品、各类熟肉制品和冷荤、蛋及蛋制品等的快速检测。参照标准:食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验(GB/T4789.36)。
; 用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面取25cm2的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的取样管内送检。擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具 *** 置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间
先配制固体培养基,再划线培养1天,之后挑每一种菌落的细菌制片,显微镜下观察细菌的种类
㈢ 临床微生物检验之病原性真菌检验
临床微生物检验之病原性真菌检验
真菌是一大类不含叶绿素,无根、茎、叶,由单细胞或多细胞组成的真核细胞型微生物。大部分真菌对人类有益,能引起人类疾病的病原性真菌主要包括浅部真菌和深部真菌。下面是我为大家带来的临床微生物检验之病原性真菌检验的知识,欢迎阅读。
一、常见单细胞真菌的形态观察
1、新型隐球菌墨汁负染色片:可见菌体呈球形,大小不一,有很厚的荚膜,包围在菌体周围,透明发亮,并可见发芽的菌体。
2、白色念珠菌菌体形态:用患者的棉拭子标本常法涂片,革兰氏染色,镜检。显微镜下可见菌体呈卵圆形,较葡萄球菌大2-5倍,细胞出芽伸长而成假菌丝,在假菌丝生长点上有芽生孢子及沿假菌丝顶端生长的大而圆的厚膜孢子。
二、皮肤丝状菌的检查
材料:
病人的甲屑、皮屑或毛发、10%KOH溶液、载玻片、盖玻片、小镊子、普通光学显微镜等。
方法:
1、采标本:用钝刀在手、足、体癣损害部位边缘轻轻刮取皮屑,甲癣可用小刀刮取病损指(趾)甲深层碎屑。
2、制片:用小镊子取少许皮(甲)屑标本置于载玻片中央,滴1-2滴10%KOH溶液,覆加一盖玻片,在火焰上答轿缓慢加热,以加速角质溶解,使标本透明,然后轻轻加压使成薄片,驱走气泡并吸去周围溢液。
3、镜检:先用低倍镜观察有无真菌菌丝或孢子,再用高倍镜观察菌丝、孢子的`特征。镜检时光线应稍弱,使视野稍暗。阳性标本常可查见分支菌丝或孢子。
三、真菌的培养
材料:
菌种、沙保氏培养基、平皿、载玻片、盖玻片。
方法:
1、一般培养:分清首肆别将新型隐球菌、白色念珠菌、絮状表皮癣菌接种于沙保氏培养基,于22℃-28℃下培养(深部真菌可培养芹迅于37℃环境),一周后观察菌落特征。真菌菌落在形态上可分为三大类:
酵母型菌落:与细菌菌落相似,圆形、白色、边缘整齐、表面光滑湿润。
类酵母型菌落:同酵母型菌落,圆形、较大、白色,但菌落根部有假菌丝长入培养基内。
丝状菌落:是多细胞真菌的菌落形式。有许多疏松的菌丝体构成,菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状,菌落中央有皱折,外围有放射状沟。其正面和背景又可显示各种不同颜色。
2、小培养(玻片法):在无菌平皿中先倾注10-15ml沙保葡萄糖琼脂,待凝固后,无菌操作将琼脂切成约0.5cm的方块,再将琼脂块移放在灭菌的载玻片上,然后在小块培养基四边接种已分纯的真菌菌种,盖上无菌盖玻片,移入有一定湿度的无菌平皿内,置22℃-28℃孵育。动态观察生长过程,根据菌丝和孢子的特点鉴定真菌类别。
;㈣ 微生物检验标本的正确采集及注意事项
微生物检验标本的正确采集及注意事项
正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。下面是我为大家带来的微生物检验标本的正确采集及注意事项的知识,欢迎阅读。
一、 血液标本的采集
1、 采集方法
(1)75%酒精清洁局部皮肤。
(2)待皮肤干后,再用2%—2。5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm(直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5—10ml,婴幼儿1—5ml。
(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项
(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38。5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。
(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。
(5)每例至少采血两次,间隔0。5—1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3—4次)和增加采血量(可增加10ml)。
(7)采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。
(8)如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的采集
1、采集方法
在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。
2、注意事项
(1)骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞,因而骨髓培养对伤寒病人的.诊断较血培养优越。
(2)用于怀疑细菌性骨髓炎病人。
三、静脉导管标本的采集
1、采集方法
(1)常规导管部位皮肤消毒。
(2)无菌方法从病人体内拔出静脉导管,剪下导管尖端5cm,放入无菌瓶中。
(3)立即(15min内)送检,避免标本干燥。
2、注意事项
(1)剪下的导管立即接种血平皿,可提高阳性率。
(2)肉汤反复冲洗导管腔内,冲洗液做定量培养。
(3)有人将剪下的导管置肉汤增菌液或培养瓶中,此法不能区分导管感染菌与少量定植菌。
(4)卫生部在《医学感染诊断标准》(试行)(2001年1月3日施行)中规定:导管管尖培养其接种方法应取导管尖端5cm,在血平板表面往返滚动一次。细菌≥15cfu/平板,即为阳性。
四、呼吸道
1、痰标本
(1)采集方法
①清晨起床后用凉开水漱口多次,以除去口腔内大量杂菌,用力咳出肺深部的脓痰,置于清洁干燥容器中送检。
②痰量极少者可用45℃ 3%—10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。
③咳嗽无力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。
④气管切开者可以深入透气孔中取痰。
⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。
⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内,缓慢注入无菌蒸馏水5ml,取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液,放入无菌容器中送检。
⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内,因而可采用胃内溶物做结核菌培养,其阳性结果比咯痰高10%左右,该方法于晨起空腹时,把灭菌的胃管,从鼻腔送入胃内,用20ml注射器抽取胃液。
(2)注意事项
①痰标本的采集以晨痰为准,此时患者痰量较多且含菌量也多。
②标本采集后立即送检,若不能及时送检者,可暂存2—8℃冰箱。若晚1—2h接种,会失去苛氧菌,并使得革兰阴性菌过分生长。
③可接受的标本:痰;支气管灌洗液,支气管刷,支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本:唾液;24h留的痰(结核杆菌培养除外);拭子。
④ 痰标本的质量评价:(用显微镜筛选)在低倍镜下,检查鳞状上皮细胞,至少10个视野,集中在有白细胞处,合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2:1。
2、鼻拭子
(1)用湿的拭子(生理盐水);
(2)需插两个鼻孔;
(3)深入3。3cm左右,转动4—5次;
(4)以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
(1)采集方法(到细菌室取专用拭子)
①患者清水漱口后,由检查者将其舌外拉,用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;
②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;
③插入运送培养基中立即送检,防止干燥。
(2)注意事项
①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;
②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。
五、胃肠道
1、粪便
(1)采集方法
选取脓血、黏液粪便2—3g,液体粪便取絮状物1—2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。
(2)注意事项
①标本要采集新鲜的,陈旧标本影响阳性检出率;
②切忌粪尿混合;
③若要分离阿米巴,标本要立即送检并注意保温;
④运送培养基可提高阳性率;
⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;
⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;
⑦标本在病理早期或治疗前采集;
⑧一般认为用抗菌药三天后,标本培养病原菌阴性。
2、肛拭子
在无法获得粪便的情况下,可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4—5cm(幼儿2—3cm)处,轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出,置运送培养基中送检。
六、泌尿道
根据卫生部《医学感染诊断标准》(试行)通知,泌尿系统临床诊断为:患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状,或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热,并具有下列情况之一:
(1)尿检白细胞男性≥5个/高倍视野,女性≥10个/高倍视野,插导尿管患者应结合尿培养;
(2)临床已诊断为泌尿道感染,或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。
1、中段尿
(1)采集方法
①女性 采样前用肥皂水或0。1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴,用手指阴x分开排尿,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
②男性 用肥皂水清洗尿道口,或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口,灭菌纱布擦干,上翻包皮,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
(2)注意事项
①导尿虽然可以减少污染,但是多次重复导尿可以造成逆行性感染,因此近年来大多采用中段尿。
②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本,减少污染。
③采集标本以晨起第一次尿液为佳。
④采集标本后,若不能在1h内送检,暂放4℃冰箱,但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h,即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml,也不能作为诊断依据,应重新留取标本送检。
⑤疑为尿道炎时可将最初3—4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌,如反复检查为同一细菌,也应考虑为病原菌。
⑥儿童在多数情况下,仅冲洗外阴是不够的,故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多,可以高度怀疑为尿路感染,无菌则可否定。
⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌,需考虑污染可能,建议重新留取标本送检。
⑧尿液中不得加入防腐剂,消毒剂否则影响阳性检出率。
2、膀胱穿刺采集法
避免污染是很困难的,培养结果与病情不符时,或尿厌氧菌培养,或婴幼儿中段尿采集困难时,可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。
3、留置导尿者采集法
拔去闭式引流的集尿袋,弃去导尿管前段尿液,留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。
七、脑脊液
1、采集方法
由临床医师以无菌方法收集脑脊液3—5ml(细菌1ml,真菌2ml抗酸杆菌2ml,病毒1ml)盛于无菌试管或小瓶中立即送检。
2、注意事项
(1)采集标本后立即送检,因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶,肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡;
(2)疑为上述细菌感染时,应注意保温,不可置冰箱或低温保存。
八、胆汁
1、十二指肠引流法
在无菌操作下,将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部(距齿65—70cm)时,收集A液(来自总胆管,为橙黄或金黄色),随之注入25%硫酸镁溶液40ml,经1—2min后再采取B液(来自胆囊,为棕黄绿色),随后收取C液(来自肝胆管,为柠檬色),一般认为B液做细菌培养意义较大。
2、胆囊穿刺法
胆囊造影术时,可同时采取胆汁。
3手术采取法
由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。
以上采集之标本应立即送检,否则置于4℃冰箱内,采集时需小心,避免被唾液、十二指肠液细菌污染。
九、穿刺液标本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。
1、采集方法
由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5—10ml,心包液、关节液收集2—5ml,置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中,充分混匀后,立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐,标本与抗凝剂之比10:1。
2、注意事项
⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1—2天后进行;
⑵不能立即送检可置4℃冰箱保存;
⑶疑为淋病性关节炎患者的关节液,采集后立即送检,或床旁培养为佳;
⑷不能用棉拭子浸蘸标本送检。
十、脓汁及病灶分泌物
1、伤口
⑴表面伤口拭子采集方法及注意事项
① 仅限于皮肤与皮下组织,包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。
②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;
③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;
④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物,拭子放在运送培养基中立即送检,不要采集创口表面的渗液。
⑵伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项
①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后,用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检,疑为厌氧菌感染时,排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;
②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭,用小刀刮取,穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本;
③当创伤出血时,敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本,此时获得阳性结果机会甚少。
④采集标本注意观察脓汁及分泌物性状、色泽、气味等。可为培养鉴定提供依据。
⑶烧伤创面
①烧伤创面需要脓性分泌物,焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色,烧伤边缘水肿。患者发烧>38℃或低体温<36℃,合并低血压。
②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。
③由于创面部位不同,细菌种类也不尽相同,要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。
④采集痂下变黑或变性的不健康区边缘或引流液等做定量培养及组织活检。
2、厌氧伤口拭子
⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;
⑵可用注射器抽吸,排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;
⑶立即送检,送检过程中必须保持在无氧条件;
⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物,胃、小肠及大肠内容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口,然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;
⑵采集前列腺液时,先将尿道、膀胱冲洗,然后从肛门用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;
⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口,然后从阴道内诊压迫尿道,使分泌物溢出;
⑷取子宫颈分泌物,先用内窥镜扩张阴道,然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物,尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。
4、蜂窝织炎
⑴用无菌生理盐水或酒精消毒皮肤;
⑵用细针在炎症最显着处穿刺吸引;
⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;
⑷注入无菌试管内送检。
5、组织标本
⑴活体组织采取的微量标本,可直接接种在培养基内;
⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;
⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5—10s,然后用灭菌剪刀切开,取其中的脓汁;
⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;
⑸组织标本不可用福尔马x固定;
⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
十一、眼标本采集
⑴一般细菌,以无菌棉拭子采集眼分泌物,尤其脓性分泌物;
⑵沙眼衣原体,首先擦去眼结膜上面的分泌物,然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞,用链霉素处理后备用;
⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12—24h后采集标本;
⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。
;㈤ 临床病原体检测通常可采集的标本有哪些
且对混有杂菌和混合感染的标本不易明确其结果,报告可能的病原菌和直接药敏结果。直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助.鉴定。对于散宽某些感染标本中发现的细菌临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物学检验。 3,其临床意义的确定有赖于定量培养法,有些标本如尿液。主要包括直接镜检,直接镜检还可评价标本是否符合检验要求,如尿路感染的尿液中检出大肠埃希菌、生化反应.分离培养:通常由正派中常无菌部位采取的标本接种血平板,故分离出纯培养物后应再作体外药物敏感试验,但据镜检结果和临床信息提示可能有病原菌存在、生物发光测定法和基因或蛋白微型阵列芯片技术等、进行分离培养和鉴定、联合药敏试验和检测细菌产生的抗生素灭活酶等,分别取0,直接将临床标本接种于平板。即取一定量的标本如液体标本用液体培养基作一系列稀释。若原始培养为阴性。 (四)常规检验 1、酶免疫技术、PCR技术。核酸检测包括核酸探针杂交、菌落特点、检测特异性抗原或病原体成分.1ml涂布于血琼脂平板或倾注培养、血清学试验,离心浓缩或溶解离心法处理。目前尚有某些微量鉴定系统:常用方法包括抑菌试验、杀菌试验,则应再采集大量标本。 (二)快速诊断 快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测,也可能是污染菌或正常菌群。如用于鉴定肠杆菌科的20E。 对于存在正常菌群部位采集的标本.体外纯菌药物敏感性试验,分离时应采用选择培养基以利于病原菌生长。特异性抗原检测包括免疫荧光技术。 (三)直接药敏试验 直接药敏试验即在分离培养病原体的同时、化学发光;最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3天,大部分细菌可于24~48h生长良好,鉴定非发酵菌的20NE及鉴定厌氧菌的20A等、体外药敏试验等,35℃24h后计算每克标本所含细菌数。 2、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对有些病人标本有诊断参考价值、简便、动物接种等鉴定,还规定除血培养外。但因其在试验时接种量难以标准化;组织标尘掘山本称量后制成悬液、对流免疫电泳,在18~24h内可获得结果,置于空气或含5%~10%CO2的气缸中培养,可能是病原菌、胶乳凝集试验。 (一)直接镜检 标本经涂片染色或制备湿片镜检。其他快速检测法还有气-液相色谱法,所有送检标本必须在24h内预报,值得推广,说明标本是否合格,取沉淀接种营养丰富的需氧或厌氧培养基来培养:分离出的细菌一般应经过细菌形态,用抗生素纸片作药物敏感性试验,10-3等,10-2;初步鉴定和直接药敏结果于24h或次晨报告,其鉴定快速、化学发光免疫测定等。另外,也可加某些抗生素抑制污染菌的生长,并稀释成l0-1。 (五)报告 直接镜检要求2h报告,发现微生物情况和特点
㈥ 临床微生物检验的常见标本有哪些
这个可多了,血液、尿液、脑脊液、骨髓液、痰液、关节液、胸水、腹水、脓液分泌物,等等
㈦ 微生物检测包括哪些啊
食品中微生物指标的常见检验项目如下:菌落总数、大肠菌群计数、大肠杆菌计数、肠道致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌)、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、双岐杆菌、空肠弯曲菌、霉菌计数和酵母计数。
一般食品中活菌数达到108cfu.g⁻¹时,则可认为食品处于初期腐败阶段。
(7)临床微生物检验常见标本有哪些扩展阅读
微生物检验方法包括显微镜检、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。
接种,将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。
分离纯化,在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程。
培养,根据培养时是否需要氧气,可分为好氧培养和厌氧培养。根据培养基的物理状态,可分为固体培养和液体培养两大类。
㈧ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
1、快速测试片技术法
快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体,将特定的培养基和显色物质附着在上面,通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。
细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代,其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。
2、生物电化学方法
生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷,从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中,培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化,所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。
常见的有:阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。
3、微菌落技术
微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点,其研究始于 20 世纪50年代,定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始,国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。
4、气相色谱法
气相色谱应用到微生物的检测中,主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异,利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等,以确定病原微生物的特异性化学标志成分,协助病原诊断和检测。
5、高效液相色谱法
利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等,以确定病原微生物的特异性化学标志成分,协助病原诊断和检测。
㈨ 微生物检验包括哪些项目
微生物检测有一般微生物如细菌总数、霉菌和酵母计数检测,以及致病菌检测,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度以及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。
根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比,鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小,一般可直接测定某微生物的种类。
选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断,得到的微生物往往并不只有一种,但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。
微生物检验范围
国内外开展微生物检验的食品种类较多,食品分类方法也不尽相同。总的来看涉及微生物检验的食品种类主要有:奶制品、预烹煮食品、饮用水、蛋制品、水果、谷物、婴幼儿食品、肉及肉制品、软体动物、禽肉、贝类、白明胶、香草(药)。
即食食品、罐头食品、调味品,粉类制品、豆制品、冷冻饮品、糖果、海鲜、甜点、蔬菜、藻类、食疗食品、米面制品等。
我国开展微生物检验的重点食品种类为:奶制品、罐头食品、调味品、蛋制品、淀粉类制品、发酵和非发酵性豆制品、冷冻饮品、糖果、饮用天然矿泉水等,其中食糖以及保健品的微生物检验为我国所独有。