⑴ 如何正确采集病原微生物标本
【标本的采集方法】
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严团芦激格执行消毒程序是十分重要的。
1 皮肤消毒程序: 严格按以下三步法进行:
(1) 75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s 以上。
(2) 用一根碘酊或聚维酮碘(碘伏)棉签消毒皮肤,1~2%碘酊作用30s 或聚维酮碘作用60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。
(3) 75%酒精脱碘。
对碘过哗橡敏的病人只能用70%酒精消毒,消毒60s。 待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 2 培养瓶消毒程序
(1) 用塌袜75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子
⑵ 工作人员手部微生物检测,涂抹法
10-2、10-3、10-4、10-5都可以的,同时做几个嘛。这样就可以比较哪个浓度更适合检测。
⑶ 手部微生物检测方法
不能将棉球放到培养基里面培养,这样根本没办法计数.将棉签放入10ml灭菌生理盐水中,混匀,取1
ml到平板中,再到平板(45℃的培养基约15ml).37℃培养48h,计数.
假如手很脏,细菌很多,则将棉签放入含10ml灭菌生理盐水的采样管后,取1ml到9ml无菌生理盐水中(相当于10倍稀释),再取1ml该稀释液到灭过菌的平板中,再倒入培养基.
⑷ 无菌棉签的微生物检测
对设备进行清洗后,用无菌棉签擦拭取样区,擦拭面积25cm2。取样前,无菌棉签须在无菌生理盐水中润湿。取样后用10ml无菌生理盐团祥氏水宴斗洗脱,将洗脱液按《微生物限度检查标准操作规程》检测,同时做空白对照。取样位塌散置为不同的三个区域,连续验证三批。在最后一批生产结束后,分别于3、6、9小时同法取样,检测微生物限度,最后一次取样后SOP对设备进行清洁后同法取样检测微生物限度,于第二天、第三天、第四天同一时间同法取样测微生物限度。取样时,应用力平稳而缓慢地擦拭取样点,在向前移动的同时将其从一边移动到另一边,擦拭过程应覆盖整个表面。翻转棉球,让棉球的另外一面也进行擦拭,但与前次擦拭的移动方向垂直。
⑸ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
病原微生物种类繁多,变异迅速,快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前,应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因晶片、多聚酶链反应等,该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物,又称病原体,有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强,往往造成世界性大流行,因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐,检测周期长,而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展,病原学诊断已不再局限于病原体水平,深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交技术、PCR技术、基因晶片技术等检测方法,自动化程度高,快速省时、无污染、结果精确,可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主,将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。1.1 直接涂片镜检病原微生物体形体积微小,大多无色半透明状,将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速,对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用,例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接涂片镜检不需要特殊的仪器和装置,在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。1.2 分离培养与生化反应 分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。细菌的生长繁殖需要一定时间,检测周期较长,不能同时处理批量样本。为解决这一问题,各种自动化培养和鉴定系统不断产生,传统鉴定方法也在逐步改进,大大加快了检验速度。例如Microscan WalLCAway全自动微生物分析仪,可同时做细菌鉴定和药敏试验,检验500多个菌种。苛养菌如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对营养要求比较高,常规培养阳性率低。雍刚 等将不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生长因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌剂加入到巧克力培养基中制成了新型淋病奈瑟菌培养基,大大提高了淋病奈瑟菌的分离培养率。苏盛通等在营养琼脂中加人了中药红枣、赤小豆培养甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌等细菌,生长指数明显高于血平板。1.3 组织细胞培养 活组织细胞培养适于专营活组织细胞内生存的病原体,包括病毒、立克次体、衣原体等。不同病原体敏感的组织细胞是不一样的,将活细胞从病原体敏感的动物组织中取出在体外进行原代培养或用病原体敏感细胞系进行传代培养,再将病原体接种于相应的组织细胞中后,病原体可在其中繁殖增长,引起特异性的细胞病变效应。也可以将病原体直接接种于敏感动物体内,引起相应组织器官出现特异的病理学改变。往往可以根据这些特异的病变对病原体进行鉴定。2 血清学与免疫学检测血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术,简化了鉴定步骤,常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。酶联免疫技术的应用大大提高了血清学检测的敏感性和特异性,不仅可检测样本中病原体抗原,也可检测机体的抗体成分。幽门螺奸菌在我国人群感染率高达50% ~80% ,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HP抗体来诊断HP感染,其结果满意。乙型肝炎病毒(HBV)在我国人群中感染率极高,ELISA应用于乙型肝炎病人早期血清学诊断的效果最为明显。临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上,通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物,在外部磁场磁力的作用下,将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠,如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等,广泛应用到各级科研和实验室 。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测,检测时间缩短至4 h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌,免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157最低检测限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测,肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS.PCR检测
目前主要普通培养(简称标)般报告要用仪器、核酸检测(PCR)、目前快速检测(主要包括:免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等根据自需求选择
目前主要有普通培养法(简称国标方法)一般出报告的要用,仪器法、核酸检测法(PCR)、还有目前的快速检测法(主要包括:免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等。这个根据自己的需求来选择吧。
简述hiv的微生物学检测方法有哪些
梅毒是由苍白螺旋体感染引起的一种性传播性疾病 。梅毒螺旋体感染人体后出现两种抗体:一种是特异性抗体(TPHA),为lgM。当有补体存在和厌氧条件下,对活螺旋体的动力有抑制作用,并可将螺旋体杀死或溶解,对机体的再感染有保护作用。另一类是非特异性抗体(快速血浆反应素 RPR)。为lgA与lgM的混合物,可与正常生物组织中的类脂抗原发生非特异性结合,对人体无保护作用
传统检测有三种方法
1、直接显微镜观察,正常情况,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度以及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。
2、选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件,选择培养基,其作用是允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养一般是通过观察微生物的同化作用型别或某一特征进行间接判断,得到的微生物往往并不只有一种,但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。
3、鉴别培养基,根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比,鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小,一般可直接测定某微生物的种类。
现代定义
微生物:个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。
微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。(但有些微生物是肉眼可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”,但是它的生存必须依赖于活细胞。
根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等,按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。
主要特征
1、体小面大
2、吸多转快
3、生长繁殖快
微生物的这一特性使其在工业上有广泛的应用,如发酵、单细胞蛋白等。微生物是人类不可或缺的好朋友。
这个是我在网上找到的的微生物的检测试纸片,也不知道方法咋样,你要也可以去网站上看看的
像大肠杆菌测试纸片 肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食物传播性疾病的病因。它除了引起腹泻、出血性肠炎外,还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来,肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延,相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻爆发和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、进口食品、腹泻病患者、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。大肠杆菌O157测试片(FilmplateTM E.coli O157BO204)3方元方圆生物的采用进口高选择性显色培养基作为主要原料,运用专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15~24h就可确认,大大地简化了检测程式,非常适合各级检验部门和食品企业使用。本品适用于海产品、水产品、各类熟肉制品和冷荤、蛋及蛋制品等的快速检测。参照标准:食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验(GB/T4789.36)。
; 用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面取25cm2的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的取样管内送检。擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具 *** 置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间
先配制固体培养基,再划线培养1天,之后挑每一种菌落的细菌制片,显微镜下观察细菌的种类
⑹ 清洁验证的取样方法
发表个人见解的时间到了:1。
淋洗样品的取样方法需要验证吗?个人觉得不必要。但是你的分析检验方法是需要验证的。你的取样方法只要有取样规程就可以了,描述在哪里取样才有代表性,何时取样,取样量等。我觉得已经足够。验证什么?2。擦拭取样里,这个:“一定量”定义很模糊的,关键是你把这“一定量”抹到板上后,你能擦回来多少。当然你这个一定量可以基于标准限度的50%,100%,150%这样的量来涂抹。比如你的清洁限度是100ug/100cm2,则可以考虑涂抹量为50ug,100ug,150ug(假设板的面积为100cm2),不嫌麻烦的话每个做它三个样品,然后选择个回收率最低的值,作为你的结果。3.
淋洗样品做回收率做得很少哦,不过你又要问这个“一定量”的话,可以自己计算一下。计算依据为:淋洗样品的限度的50%,100%,150%(mg/l)*该设备最后一次淋洗液的体积(l),搅匀后,取样,检测。4。残留物在下个产品中的残留量有两种计算方式,一是根据残留物的毒性数据ld50值,二是根据mtdd的千分之一(maximum
therapeutical
daily
dose最低治疗剂量
,主观认为,一个活性物质的千分之一“最低治疗剂量”已经不能显示治疗作用了,也就是就算有这么点儿残留在下个产品里,姐也可以不理会它了!),两种算法我比较倾向于,哪个算出来限度低就选哪个。5
据我所知,没什么其他算法。你说的那书我没看过,但是万变不离其宗,都一样。无非就是四个因子:上个产品的毒性(ld50值)或者活性数据(mtdd)以及下个产品的批量以及每日最大口服剂量。
值得注意的是计算出来的都是一个量值,单位为g,或者kg,而我们在实际运用过程中应更直观的体现,就要用这个量去除以设备的最终淋洗液的量,得到一个淋洗液的浓度值。比如:计算出来的结果是50g,而最终淋洗液的总体积为2000l,那么你这个限度就是50g/2000l,即为0.025g/l:当然我只是瞎举了个例子而已。
⑺ 生物物证棉签简单介绍棉签使用步骤
生物物证棉签简单介绍棉签使用步骤
1. 产品组成:2支棉签+1瓶提取液/包。
2. DNA消毒:在洁净车间将棉签和提取液放入透析纸包装袋密封,用环氧乙烷进行消毒。环氧乙烷能穿透透析
纸漏谈,对棉签进行消毒,消除所有DNA,确保没有残余DNA。
3. 使用方法:用棉签蘸取提取液,使棉签湿润,再用棉签擦拭遗留DNA的印迹,将棉签放入专用保存盒,确保
棉签不与任何物体接触。
4. 在现场,擦拭DNA后的棉签可放回原包装袋进行保存,确保不会受到DNA污染。透析纸上可书写简单说明。
5. 在实验室,将棉签头伸入离心管口部,用离心管盖压住棉签头,用力搬动棉签杆,可以轻易使棉签头折断,
并掉入离心管。
生物物证棉签 产品特点:
用于生物物证的提取和保存,适合现场血斑、唾液斑、精斑等各种生物物证的提取和DNA检验使用。本品所用棉签均在净化条件下生产,并经灭菌处理,棉签头部由纯棉之城,绝无外源DNA污染。
使用方法:
1.用棉签擦取斑迹部位(若为干燥检材,使用2-3滴超纯水湿润棉签头)余袭,擦拭时力度适中。擦拭后在棉签擦拭的一侧用记号笔标记,以明确竖搜兄棉签提取斑迹的部位。
2.将采集生物物证检材后的棉签阴凉放入物证袋中,置于阴凉干燥处保存。
⑻ 接触碟表面微生物采样后 怎样验证有无培养基残留
接触碟表面微生物采样后 怎样验证有无培养基残留
表面微生物的监睁和告测方法有两种,一是培养皿接触法,二是棉签擦拭法,棉签擦拭法需要做棉签的回收率验证,目前基本上都改用“培养皿接触法”了。
具体方法:
1、提前将平皿培养基从冷库中取出,放置至室温。
2、打开培养皿上盖,使无菌培养基表面与取样面直接接触,均匀按压培养皿底板,确保全部培养基表面与取样点表面均匀接触10秒左右,盖上碟盖,做好标记。
3、取样后,用蘸有70%酒精的湿棚雀纱布擦拭被取样表面,以除去残留培养基。
4、全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养,每批监测需放置两个空白培养皿进行阴性对照。培养温度为20~25℃,悉明培养5天,然后再在30~35℃下培养2天。