A. 如何设计腐烂水果微生物分离纯化实验
主要是采取微生物培养的方法，
1先做微生物的培养基（例如牛肉膏蛋白胨培养基）
2用细丝灼烧后插入水果腐烂部位搅动，然后涂大派抹到培养基上，不要太浓！要均匀分布，这样就能让单个细菌长成一个菌落。
3等过了几天后，就可以去观察了，如果长出的菌落混到了一起就算失败了，最好是有单腊则独的一块，这一块一般都是由一个细菌发育滚局贺分裂而来的，把它小心挖出来继续培养就可以得到纯种的一个菌落了
B. 水果农残检测如何抽样
农业行业标准NY／T 789―2004有明确规定。以下节选您需要的内容：
采样原则
3．1 采样应由专业技术人员进行。
3．2 采集的样本应具有代表性。
3．3 样本采集、制备过程中应防止待测定组分发生化学变化、损失，避免污染。
3．4 采样过程中，应及时、准确记录采样相关信息。
4 采样方法
4．1 产地样本采样
4．1．1 样本采集
按照产地面积和地形不同，采用随机法、对角线法、五点法、z形法、S形法、棋盘式法等进行多点采样。产地面积小于1 hm2时，按照NY／T398规定划分采样单元；产地面积大于1 hm2小于10 hm2时，以1 hm2～3 hm2作为采样单元；产地面积大于10 hm2时，以3 hm2～5 hm2作为采样单元。每个采样单元内采集一个代表性样本。不应采有病、过小的样本。采果树样本时，需在植株各部位(上、下、内、外、向阳和背阴面)采样。
4．1．2．6 果菜类(果皮可食)
除去果梗后的整个果实。采集样本量为6个～12个个体，不少于3 kg。代表种类有：黄瓜、胡椒、茄子、西葫芦、番茄、黄秋葵。
4．1．2．7 果菜类(果皮不可食)
除去果梗后的整个果实，测定时果皮与果肉分别测定。采集样本量为4个～6个个体。代表种类：哈密瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、冬瓜。
4．1．2．9 柑橘类水果
取整个果实。外皮和果肉分别测定。至少6个～12个个体，不少于3 kg。代表种类有：橘子、柚子、橙子、柠檬等。
4．1．2.10 梨果类水果
去蒂、去芯部(含籽)带皮果肉共测。至少12个个体，不少于3 k。代表种类有：苹果、梨等。
4．1．2．11 核果类水果
除去果梗及核的整个果实，但残留计算包括果核。至少24个个体，不少于2 kg。代表种类有：杏、油桃、樱桃、桃、李子。
4．1．2．12 小水果和浆果
去掉果柄和果托的整个果实，样本采集量不少于3kg。代表种类有：葡萄、草莓、黑莓、醋栗、越桔、罗甘莓、酸果蔓、黑醋栗、覆盆子。
罩银4．1．2．13 果皮可食类水果
枣、橄榄：分析除去果梗和核后的整个果实，但计算残留量时以整个果实计。无花果取整个果实。样本采集量不少于1 kg。代表种类有：枣、橄榄、无花果。
4．1．2．14 果皮不可食类水果
除非特别说明，应取整个果实。鳄梨和芒果：整个样本去核，但是计算残留量时以整个果实计。菠萝：去除果冠。样本采集量为4个～12个个体，不少于3 kg。代表种类有：鳄梨、芒果、香蕉、番木瓜果、番石榴、西番莲果、新西兰果、菠萝。
4．2 农药残留田间试验样本采样
根据试验目的和样本种类实际情况，按照随机法、对角线法或五点法在每个采样单元内进行多点采样。
4．3．1 散装样本
对于散装成堆样本，应视堆高不同从上、中、下分层采样，必要时增加层数，每层采样时从中心及四周五点随机采样。抽检样本的采样量按照GB／T 8855规定旅旁进物镇宴行。样本预处理方法按照4．1．2进行。
4．3．2 包装产品
对于包装产品，抽检样本的采样量按照GB／T 8855规定进行随机采样。采样时按堆垛采样或甩箱采样，即在堆垛两侧的不同部位上、中、下或四角中取出相应数量的样本，如因地点狭窄，按堆垛采样有
困难时，可在成堆过程中每隔若干箱甩一箱，取出所需样本。样本预处理方法按照4．1．2进行。
5．3 小体积蔬菜和水果
均匀混合后，按四分法缩分，用组织捣碎机或匀浆器处理后取250 g～500 g保存待测。
5．4 大体积蔬菜和水果
切碎后，按四分法缩分，取600 g～800 g保存待测。
5．5 冷冻样本
冷冻状态下破碎后进行缩分。如需解冻处理，须立即测定。
6 样本包装、贮存
6．1 样本的包装
采集的样本用惰性包装袋(盒)装好，写好标签(包装内外各一个)和编号(伴随样本各个阶段，直至报告结果)。样本及有关资料(样本名称、采样时间、地点及注意事项等)在24 h内运送到实验室，在运
输过程中应避免样本变质、受损、失水或遭受污染。
6．2 样本的贮存
6．2．1 对含性质不稳定的农药残留样本，应立即进行测定。
6．2.2 容易腐烂变质的样本，应马上捣碎处理，在低于-20℃条件下冷冻保存。
6．2．3 水样在冷藏条件下贮存，或者通过萃取等处理，得到提取液，在冷冻条件下贮存。
6．2．4 短期贮存(小于7 d)的样本，应按原状在l℃～5℃下保存。
6．2．5 贮藏较长时间时，应在低于-20℃条件下冷冻保存。解冻后应立即分析。取冷冻样本进行检测时，应不使水、冰晶与样本分离，分离严重时应重新匀浆。
6．2．6 检测样本应留备份并保存至约定时间，以供复检。
7 样本记录
样本记录表包括以下基本内容：
a) 样本名称、种类、品种；
b) 识别标记或批号、样本编号；
c) 采样日期；
d) 采样时间；
e) 采样地点；
f) 样本基数及采样数量；
g) 包装方法；
h) 采样(收样)单位、采样(收样)人签名或盖章；
i) 贮存方式、贮存地点、保存时间；
j) 采样时的环境条件和气候条件；
k) 对市场抽检样品需标明原编号及生产日期、被抽样单位，并经被抽样单位签名或盖章。
C. 水果微生物的检测主要检测哪些菌类指标是什么
主渣郑要检测：1、如拦颂细衡弯菌菌落总数；2、大肠菌群；3、霉菌；4、致病菌
细菌菌落总数、大肠菌群、霉菌要符合相关国家卫生标准；不得检出致病菌.
D. 怎样测水果腐烂指数
水分是影响水果变质腐烂的原因之一，水果中的销迟水果高达70-95%，所以水分锋败多的水果越容易腐烂。还有水果的蒸腾作用是影响水果保鲜的主要因银斗颤素，主要跟水果的种类，成熟度有关。具体有表面积比，表皮覆盖层性质，住址细胞的持水力。
E. 微生物腐败菌的测定
（1）采集样品
采样前要了解所采样品的来源、加工、储藏、包装、运输等情况，采样时必须做到：使用的器械和容器需经灭菌，严格进行无菌操作；不得加防腐剂；液体样品应搅拌均匀后才去采样，固体样品应在不同部位采取以使样品具代表性；取此困样后及时送检。
国际食品微生物标准委员会(ICMSF)制定的食品微生物学分析采样方法，目前已在国内外被逐步推广采用。ICMSF根据以下原则来规定不同的采样数：①各种微生物本身对人的危害程度各有不同；②食品经不同条件处理后，其森首念危害程度可分为3种情况：危害度降低；危害度未变；危害度增加。依据ICMSF采样方法规定，其中：n：指一批产品采样个数；c：指该批产品中检样菌数超芹纤过限量的检样数；m：指合格菌数限量；M：指附加条件后判定为合格的菌数限量。
（2）样品送检
采集好的样品应及时送到食品微生物检验室，一般不应超过3h，如果路程较远，可将不需冷冻的样品保持在1～5℃的环境中，勿使冻结，以免细菌遭受破坏。样品送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。检验人员接到送检单后，应立即登记，填写序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，并积极准备条件进行检验。
（3）样品处理
样品处理应在无菌室内进行，若是冷冻样品必须事先在原容器中解冻，解冻温度为2～5℃不超过18h或45℃不超过15min。
a.固体样品：用无菌刀、剪或镊子称取不同部位的样品，剪碎放入灭菌容器内，加一定量的水混匀，制成1:10混悬液，进行检验。在处理蛋制品时，加入约30个玻璃球，以便震荡均匀。生肉及内脏，先进行表面消毒，再剪去表面样品，采集深层样品。
b.液体样品：原包装样品用点燃的酒精棉球消毒瓶口，再用经石炭酸或来苏儿消毒液消过毒的纱布将瓶口盖住，用经火焰消毒的开关器开启。摇匀后用无菌吸管吸取；含有二氧化碳的液体食品，按上述方法开启瓶盖后，将样品倒入无菌磨口瓶中，盖上消毒纱布，将盖开一小缝，轻轻摇动，使气体逸出后进行检验；将冷冻食品放入无菌容器内，融化后检验。
c.罐头：罐头进行密闭试验、膨胀试验和检验。将被检验罐头置于85℃以上的水浴中，使罐头沉入水面以下5cm，观察5min，如有小气泡连续上升，表面漏气；另外将罐头放在(37±2)℃环境下7d，如是水果、蔬菜罐头，放在20～25℃环境下7d，观察其盖和底有无膨胀现象。检验时，先用酒精棉球擦去罐上油污，然后用点燃的酒精棉球消毒开口的一端，用来苏儿消毒纱布盖上，再用灭菌的开罐器打开罐头，除去表层，用灭菌匙或吸管取出中间部分的样品进行检验。
（4）检验
每种指标都有一种或几种检验方法，可根据不同的食品、不同目的来选择恰当的检验方法。通常所用的常规检验方法为现行国家标准，或国际标准，（如FAO标准、WHO标准等），或食品进口国的标准（如美国FDA标准、日本厚生省标准、欧共体标准等）。
食品卫生微生物检验室接到检验申请单，应立即登记，填写试验序号，并按检验要求立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。
一般阳性样品发出后3d（特殊情况可适当延长）方能处理样品；进口食品的阳性样品，需保存6个月方能处理。阴性样品可及时处理。
（5）结果报告
样品检验完毕后，检验人员应及时填写报告单，签名后送主管人核实签字，加盖单位印章，以示生效，并立即交给食品卫生监督人员处理。
F. 烂苹果中含有什么化学成分有哪些微生物
水果腐烂后，只将腐烂部分挖去，即可食用吗？其实，这种做法并不正确。据测定，在距离腐烂部分1厘米处的正常果肉中，仍可检出毒素。
实际检测证明，只要水果发生霉变腐烂，各种微生物特别是各种真菌都会在腐烂水果中不断加快繁殖，并在繁殖过程中产生大量有毒物质。这些有毒物质又不断从腐烂部分，通过水果汁液向未腐烂部分渗透、扩散，导致未腐烂部分同样含有微生物的代谢物。人吃了烂水果中的真菌毒素，可能会发生头晕、头痛、恶心、呕吐、腹胀等，严重的还会发生抽风、昏迷，危及生命。其中对人体健康威胁最大的有毒物质是展青霉菌的毒素。吃入后除了会对神经、呼吸、泌尿等系统造成伤害外，还有较强的致癌作用。此外，水果腐烂后其所含的硝酸盐，还会变成有毒的亚硝酸盐。
因此，为了健康，吃水果要选择表皮色泽光亮、肉质鲜嫩、有香味、新鲜的水果。如略有小斑或少量虫蛀，应用刀挖去腐烂虫蛀处及其周围超过1厘米处的好果部分；如霉变腐烂或虫蛀面积达到或超过水果的1/3，应果断弃之，以防后患。
最多的是酵母菌，其次是真菌（霉菌）
一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠蒙形。菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。生殖方式分无性繁殖和有性繁殖。无性繁殖有芽殖和裂殖两种。解脂假丝酵母等当环境条件适宜而生长繁殖迅速时，出芽形成的子细胞尚未与母细胞分开，又长了新芽 ，形成成串的细胞，犹如假丝状，故称假丝酵母。有性繁殖产生子囊孢子。酵母菌分布很广，在含糖较多的蔬菜、水果表面分布较多，在空气土壤中较少。
酵母菌（Saccharomyces）是真菌生物，分类上比较混乱，主要是因其形态不一所致。按J·Lodder的酵母分类学，能形成子囊孢子的属子囊菌纲的酵母菌科（Saccha romycetaceae），也称真酵母如德巴利酵母（S·Debaryomyces）。还有些酵母不形成孢子，属于不完全菌纲、苁梗孢目，隐球酵母科（Cryptococcaceae），如假丝酵母（Candidaspp）。
酵母菌体呈圆形、卵形或椭圆形，内有细胞核、液泡和颗粒体物质。通常以出芽繁殖；有的能进行二等分分裂；有的种类能产生子囊孢子。广泛分布于自然界，尤其在葡萄及其他各种果品和蔬菜上更多。是重要的发酵素，能分解碳水化合物产生酒精和二氧化碳等。
枯草杆菌以水果为营养源,靠分解水果中的有机物获得物质和能量,导致水果的腐烂
黄曲霉（Aspergillusflavus）
半知菌类，黄曲霉群的一种常见腐生真菌。多见于发霉的粮食、粮食制品或其他霉腐的有机物上。菌落生长较快，结构疏松，表面黄绿色，背面无色或略呈褐色。菌体由许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，梗的顶端产生烧瓶形或近球形的顶囊，囊的表面产生许多小梗(一般为双层)，小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢于合成孢子穗。可用于生产淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。近年来，发现其中某些菌株会产生引起人、畜肝脏致癌的黄曲霉毒素。
细菌，主要有芽孢杆菌属（Bacillus）的枯草杆菌粘液变种(Bac.subtilus var.mucoides)和蜡状芽孢杆菌粘液变种（Bac.cereus var.mucoides）；假单孢菌属(Pseudomonas)的托氏假单孢菌(P.tolassii)和荧光假单孢菌（P.fluorescens）等。在分类上属原核界、裂殖菌门，裂殖菌纲。
细菌的个体形态有杆状、球状或弧状。芽孢杆菌属的细菌呈杆状或圆柱状，大小为1～5微米×0.2～1.2微米，当做成水装片时，经特殊染色，可观察到鞭毛。当环境不良时，能在体内形成一个圆形或椭圆形的芽孢。芽孢外被厚壁，抗逆性强，尤其是对高温有非常强的忍耐力，一般在100℃下，3小时仍不丧失其生活力，革兰氏染色呈阳性反应。假单孢属的细菌，细胞形状差异很大，通常呈杆状或球形，大小为0.4～0.5微米×1.0～1.7微米，典型的细胞在一端或两端具有1条或多条鞭毛，形成白色菌落，有的种能产生荧光色素或其它色素，革兰氏染色呈阴性反应(图11-6)。黄色单孢菌仅具一根端生鞭毛，菌落黄色粘质状，革兰氏染色呈阴性反应。
G. 想做个实验：将烂掉的水果皮（含细菌及真菌）在培养皿中滴入大蒜汁。想请问下如何观察现象
可以做一组实验，估计你是在家里，就用沸水消毒，把一些有盖子的瓶子高温煮好让核亮，备用。再煮点氏槐肉汤，调稍微浓一点。过滤之后倒在一个个消过毒的瓶子里。再把你要做的实验对象分组，比如实验组（这个自己想好），阳性对照组（烂水果），阴性对照组（比如大蒜汁，可能会有菌的或者纯肉汤）。可以先做个预实验坦宽，看看自己消毒和无菌操作如何。实验组大蒜汁和烂水果的比例估计是你要好好分析的吧。肉汤如果有菌了，会浑浊，有沉淀，有臭味。没有染菌，就还是香香的！
也可以从烂水果中提取细菌，均匀涂抹在琼脂平板上，把大蒜汁滴在平板上，看看抑菌圈，医院做药敏基本原理就是这个。可以在想想，细节很重要，纯手打，祝你实验成功，有个好的收获~~