微生物纸片法中的纸片怎么验收

㈠ 微生物的抗菌谱法实验滤纸片和滤纸条法

滤纸片法抑菌试验原理是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。
纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明顷携的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈雀裂伏源渗负相关。

㈡ 微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的整套实验步骤

实验前准备：4个培养皿，2支移液管，1支涂布棒，并将培养皿包好灭菌，取一定的蒸馏水灭菌制成无菌水。
1、配制营养琼脂培养缓段基：称取营养琼脂9.6g，加入300ml蒸馏水，加热煮沸后将培养基导入锥形瓶，然后包扎灭菌(121°C，20min)。
2、倒平板：在无菌环境操作下，将上述培养基倒入4个平板，并编号1，2,，3，4.
3、制菌悬液：用5ml无菌移液管在无菌操作下，吸取3ml无菌水到菌种斜面，用接种环轻刮下菌苔，捣碎，塞上棉塞，振荡片刻。
4、将抗生素稀释成10-3,10-4，10-5,10-6四种不同稀释度的梯度液。
5、取直径1cm圆形滤纸若干，取4个圆形滤纸分别放入10-3,10-4，10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡一会。
6、待平板凝固后接种，各取0.2ml菌悬液倒入平板中，用涂布棒抹匀。
7、在1,2,3,4,号已接种的平板中分别放入4个浸泡在10-3,10-4，10-5,10-6抗生素溶液中的滤纸扰燃誉片，并注意个纸片间的距离应较大。
8、培养，放入37°c恒温箱中培养24h。
9、观察测量并记录数据，观察抗生素滤纸周围的透明抑菌圈，测量16个抑菌圈的大小，求算不同浓度抗生素段空滤纸抑菌圈的大小。

㈢ 检验的五大程序是什么就是化学检验,食品检验等

食品检验操作规范
一、 步骤和方法
1样品采集
1.1按照国家采样规定,每件样品采集200克.
1.2采集样品需在无菌操作下,用已灭菌的镊子、匙、试管、剪子等工具进行.
1.3采集样品后要及时做微生物检验,一般不超过3小时.
2样品检验
2.1大厦一般只做常规化验,即杂菌总数、大肠菌群测定.
2.2所用培养基和试剂为：70%浓度的酒精、0.85%盐水（可自行配制,定量分装玻璃瓶和试管内,灭菌后方可使用）祥顷、快速检验纸片.
3冷荤、冷饮食品检验操作步骤
3.1将检样25G（或25ML）剪碎或捣碎放于含有225ML灭菌盐水中,经过振摇为1:10的均匀稀释度.
3.2用灭菌吸管吸取1:10稀释液1ML,注入含有9ML灭菌生理盐水试管中,振摇混合均匀为1:100的稀释度.
3.3按以上操作程序,做10倍递增的稀释液,每递增一次,即更换一次1ML灭菌吸管.
3.4选择2-3个适宜稀释度,分别移入细胞总数检验纸片内.
3.5将检验纸片置于37℃温箱内培养24小时后取出.
3.6计算检验纸片内菌落数目,将菌落数目乘以稀释倍数,即得到每克样品所含杂菌总数.
3.7检验纸片与对照相同,出现紫色或紫红色菌落,但纸片颜色辩宴芦不变为大肠菌群阳性；纸片变蓝但无紫红色菌落为大肠菌群阴性.
3.8检验纸片出现紫红色菌落且周围有黄圈；或纸片携带出现红、黄、蓝三种混合色；或纸片变蓝出现紫红色菌落均为大肠菌群阳性.
4餐具检验操作步骤
4.1将检验纸片用灭菌生理盐水浸湿后,立即贴于碗、盆、杯等餐具内侧表面,30秒后取下,放入灭菌塑料袋内.
4.2将检验纸片用灭菌生理盐水浸湿后,立即抹拭筷子进口端约5CM处（筷子以5支为一件样品检验）,放入灭菌塑料袋内.
4.3将检验纸片置于37℃温箱内培养15小时后取出.
4.4检验纸片保持青紫色或淡绿色为阴性；纸片出现紫红色菌落且周围有黄圈为阳性.
5检验员填写《食品检验报告单》、《物表涂抹微生物检验报告单》,并拟定检验报告.
二、质量标准
1洗刷：按清洗、消毒、洗涤、清洗、擦干的程序进行.
2分类：分别用报纸包起来待干燥消毒.
3消毒：在120℃干燥箱内消毒40分钟.
4储存：放在灭菌后的干燥箱储存待用.

㈣ 纸片法和管碟法测定微生物对抗菌药物敏感性试验的原理

纸片法和管碟法测定微生物对抗菌药物敏感性试验的原理：将菌制成菌悬液用无菌棉档搜烂签蘸取菌液在管壁上挤去多余菌液，涂布整个M2H平板表面，反复3次，每次将平板旋转60度，保证涂布均匀，35℃培养后菌落呈半漏闷融合状态，否则影响药敏结果。

纸片取出后须放室温10min后方可打开，否则空气中的水份冷凝在纸片上易潮解，使药物失效影响药敏试验结果。

应用直径90cm平皿，在水平的无菌台上倾倒，准确量取高压灭菌后的M2H琼脂液25ml，使之琼脂板厚度为4mm。否则厚度过高，使含药物纸片的药物半球形扩散的体积加大，导致假耐药；反之导致假敏感。

管碟法抗生素效行漏价测量

是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的衡量标准，具有与应用原理相一致、用量少和灵敏度高等优点。管碟法是琼脂扩散法中的一种，已被各国药典广泛采用，作为法定的抗生素生物检定方法。管碟法抗生素效价测量实验包括配制试验所需的样品及药品、加注培养基、放置小钢管、滴加抗生素溶液、双碟中菌株的培养、抑菌圈测量六个步骤。

㈤ 微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的整套实验步骤

1、配知顷制营养琼脂培养基
2、倒平板四个并编号1、2、3、4.
3、制菌悬液。4、将抗生素稀释成不同稀释度的梯度液。
5、取直径1cm
圆形滤纸若干，取四个分别放入不同梯度的抗生素溶液中浸泡一会。
6、平板凝固后接种。7、在平板中分别放入四个薯皮浸泡在抗生素溶液的滤纸片，间距适中
8、培养。数猛差9、观察

㈥ 纸片法测定细菌 应该注意哪些问题

1.细菌的浓度要固定：用接种环挑取菌落，悬浮于NS中，振荡混匀后，调整浊度与0.5麦氏标准比浊管相同，相当于10（8次方）CFU/ml。
2.一般细菌固定用MH培养基
3.制备的菌液必须在15min内使用。
4.接种菌液要均匀：用灭菌棉拭蘸取菌液,在管壁上挤拍拿压几次，去掉过多的饥笑菌液。用拭子涂布整个培养基表面，反复几袭肢搭次，每次将平板旋转60℃，最后沿平皿周边绕两圈，保证涂布均匀。
5.贴纸片：须平板上的水分被琼脂完全吸收后进行。用镊子取纸片一张，贴在平板表面。纸片间距不少于24mm，中心距平皿边缘不少于15mm。
6.贴上纸片后，须在15min内放35℃孵箱培养。不可放在CO2环境中。
7.判定结果：培养后取出平板，测量抑菌环的直径。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。按抑菌环直径判断细菌的敏感性