A. 如何从污水(或土壤)中提取微生物
把污水加蒸馏水分别稀释10,100,1000倍,然后加入培养基中培养,如果培养出来菌落重合,菌非常多,无法分离,就加大稀释倍数,直至获得清晰可分离的菌落,有时甚至是非常小的菌落,要用倒置显微镜操作。而培养基则根据要分离的菌的营养类型进行配置,若要获得多种微生物就要配置多种培养基进行如上操作。对于土壤加水溶解,对溶解液进行如上操作,不溶的部分就不用管了
B. 1.土壤微生物分离计数时主要采用什么方法
为研究土壤中细菌、真菌、放线菌森坦的数目,我们利用选择培养基,以便在土壤水溶液中选出目的菌种,在用分浓度梯度法在选择培养基上培养出但菌落,以便计数。计数时可以根据不同菌种的不同形态学特征来分辨,如果出现与上述三种以外特性的菌种可以用革兰氏染色鉴别。
一、主要的实验药品与仪器
(1)实验药品:牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl, 可溶性淀粉 , KNO3 , K2HPO4, MgSO4 ,FeSO4,KH2PO4,葡萄糖
(2)实验仪器:试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
二、实验方法
1、细菌分离:取土样1g,加入99ml无菌水中,震荡10min,制成10-2 土壤稀释液,再取0.5ml 10-2 土壤稀释液加入4.5ml无菌水中,制成10-3 土壤稀释液,以此类推··· ···。取10-5 ,10-6 ,10-7 土壤稀释液0.1ml加入相应编号培养基中,涂平板,每个稀释度两个平板。在30度恒温培养箱中培养24h后观察结果。
2、放线菌分离:取土样1g,加入99ml无菌水中,震荡5min,制成10-2 土壤稀释液,再取0.5ml 10-2 土壤稀释液加入4.5ml无菌水中,制成10-3 土壤稀释液,以此类推··· ···。取10-3 ,10-4 ,10-5 土壤稀释液0.1ml加入相应编号培养基中,涂平板,每个稀释度两个平板。在28度恒温培养箱中培养5~7d后观察结果。
3、霉菌分离:取土样5g,加入95ml无菌水中,震荡5min,制成10-2 土壤稀释液,再取0.5ml 10-2 土壤稀释液加入4.5ml无菌水中,制成10-3 土壤稀释液,以此类推··· ···。将以灭菌的培养基融化,加入链霉素溶液,但培养正悄基凝固后,取10-2 ,10-3 ,10-4 土壤稀释液0.1ml加入相应编号培养基中,涂平板,每个稀释度两个平板。在28度恒温培养箱中培养3~5d后观察结果。
三、结果与讨论 当培养结束后,观察培养基上的菌落,由于本次试验的各种经济,效果,作用等等方面的原因,培养基并不能完全分离土壤中的各种菌类,例如,土壤中除了细菌,霉菌,放线菌举春渣外还有大量的杂菌,如:酵母菌、真菌、藻类等,微生物,如:各种寄生虫(卵)等,所以我们要根据细菌,放线菌,霉菌的宏观物理特性来分别。当进行显微观察时,霉菌不用染色,放线菌、细菌要进行简单的染色,然后再显微镜下观察菌体形态。
C. 土壤中微生物怎样分离纯化培养
1、土样采集:取10cm左右深层土壤10g备用。
2、制备土壤稀释液:称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10-2的土壤悬液。然后进行十倍梯度稀释,依次制备 10-3、10-4、10-5
、10-6 、10-7 稀释度的土壤稀释液。 3、培养基平板制备:按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml。灭菌后分别倒3个平板。(高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚;马丁氏培养基倒平板前加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml 1万单位/ml链霉素)
4、接种:用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液,以无菌操作技术接种在平板上,涂布均匀。细菌选用10-4、10-5、10-6 三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌与霉菌选用10-2 、10-3、10-4 三个稀释度,分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基。(一个稀释度一个平板)
5、培养:细菌平板于37℃恒温培养1~2d,放线菌于30℃培养2~3d,霉菌于30℃培养3~5d ,观察。
6、计数:用稀释水样检测平板的菌落计数方法进行计数,报告细菌总数/(CFU·ml-1)
7、纯化:挑取典型菌落接种于相应平板,培养条件同上,培养纯化。
D. 如何从土壤中分离纯化某种微生物
先取土样,然后提纯稀释,放在选择培养基上.例如竖枯分离纯化能分解纤维素的微生物,就放在以纤维素为唯首庆一碳源的培养基上.能存活的就是你要的了者纤握.
纯手打
E. 土壤微生物的分离方法
取土壤配好适当浓度的溶液,然后稀释成十的负七次方或者六次方这样。
用微生物接种的方法在酒精灯边上稀释液拿微滴管取500微升置入固体培养基,然后加入玻璃小球摇晃,这是为了让稀释液均匀分布。然后37度培养一天到两天就行了,不能太久不然会长杂菌。
就是这样吧,抱歉细节没有写,太长了。注意过程无菌
F. 如何从复杂的土壤样本中分离我们所需要的目标微生物
如何从复杂的土壤样本中分离我们所需要的目标微生物?
有机肥之中有机质的分解转化是一个复杂的过程,微生物活动在分解转化过程之中起着重要作用。土壤环境非常适合微生物活动,所以土壤之中天然微生物数量最多。因为土壤之中微生物种类繁多,数量大;一克土壤之中,微生物有几十种到几百种,几亿到几十亿个,土壤微生物繁殖迅速,在有机质的转化和分解之中起着重要作用。土壤微生物包括细菌、放线菌、真菌和藻类。
(1)细菌
细菌是一种单细胞微生物,是土壤之中分布最广、数量最多的微生物。细菌有三种基本形态:球形、杆状和螺旋形;有球菌、杆菌和螺旋体(40种);包括号菌&41;三种类型。土壤细菌按其营养类型可分为自养菌、兼性自养菌和异养菌。
(2) 真菌
土壤真菌分布广泛,适应广泛的酸性条件,在PH4.0条件之下生长良好,对森林土壤有机质的转化起着重要作用。土壤真菌是异养的。它们必须从土壤有机质之中获取能量和碳源,并在发育过程之中需要良好的供氧。根据真菌与树木的关系及其营养类型,真菌可分为腐生真菌、寄生真菌和共生真菌。
(3) 放线菌
放线菌是细长的菌丝体,呈分枝状或放射状。它们在土壤之中仅次于细菌。大多数是腐生植物。许多放线菌能分解纤维素、淀粉、脂肪、木质素和蛋白质。
G. 土壤中筛选微生物的具体步骤
在100ml培养基(含1.5%的NaCl)中加入1.5克土壤进行初步富集培养。富集培养1星期后取出1.5ml的菌液加入到100ml的培养基中再次富集培养一星期,再取出1.5ml的菌液加入到100ml的培养基中富集培养一星期。取出50ul富集培养菌液涂板,挑取单菌落在试管中富集培养。
H. 如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体
首先你需要确定你分离的是什么微生物,然后按照以下步骤
1.
选择合适的富集培养基,加入土壤把目标菌属富集
2.
选择合适的选择性培养基把目标菌属分离出来。
3.
通过稀释平板涂布,培养三天后,观察不同的菌落,在平板反面用记号笔编号不同的菌落。
4.
把标记的菌落在培养基上划线分离,每一个编号划线三个平板
5.
待平板长出单菌落后,显微镜镜检,观察目标菌是否单一。
单一菌落即为微生物的纯培养体。