① 食品微生物检验内容与检测技术方法
食品微生物检验内容与检测技术方法
近年来,世界各地出现了诸多严重的食品安全事故,由于食品微生物污染而造成的质量事故严重威胁着人们的身体健康,如何做好食品微生物检验,确保食品质量安全,就需要社会各界共同努力。根据国际和国内卫生组织的相关规定和要求,所有的食品生产厂商都要对食品的质量进行严格的检验,对于生产出来食品的菌落种类、细菌数量、大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等进行检测,必须达到要求的合格标准才能进入市场进行出售。下面是我为大家带来的食品微生物检验内容与检测技术方法的知识,欢迎阅读。
需要注意的问题
一是工作人员及活动规定。必须保证参加检测的人员具有相应的资格,并通过相关的考试后,持证上岗才能开展相关活动。同时要求工作人员不仅需要具有高超的专业技术,还应该有良好的职业道德修养,尽可能降低人为问题的制约。检测过程需要按照相关的活动规范和流程进行,使用无菌设备认真地进行抽样活动,采用先进技术获取相关信息。二是存放装置。若想检测过程顺利进行,除了确保实验室有必要的设施外,还应该重点考虑装置存放的条件和要求。三是装置和药品的配置。在各项装置进行安装时应该对气温进行调节,确保其安稳,对装置气温稳定性合乎规定要用的具体时间详细记录。同时在规定的时间内对各种装置进行消毒处理,并通过感应设备对其运作状态进行监测。对于药品的配置,培养基往往在121℃下采用高压湿热灭菌法灭菌15分钟;较为敏感的'培养基一般采用膜过滤法。四是样本的处理。在样本收集过程中,需要确保抽样活动是在无菌环境下展开的,有效避免了样本被污染。在样本输送时,应该防止样本受到光线的影响而出现污染现象,抽样之后就应该及时将其送至测试场地。一般样本输送时间要控制在3h内,如果无法及时送到,要确保在近乎之前的气温时将其完整的存放。
食品微生物检验内容
一是检验食品污染程度指示菌。细菌总数即菌落总数,是食品和生活饮用水检样处理后,在特定培养条件下,所得1g或者1mc检样中所含有的细菌菌落个数,这就是判断食品和生活饮用水污染程度的关键指标。大肠菌群系是在37℃下培养24h的一群发酵乳糖、产气、产配以及需氧或者厌氧的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。这种菌群主要来源于人和牲畜的粪便,因此,可以用粪便的污染指标菌对食品的卫生质量进行评价。二是检测食品中治病菌。在食品微生物相关检验标准中已经明确规定某些微生物的数量,因此在对食品污染程度指示菌检测的同时,还应该对一些治病菌进行测定,如沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
食品微生物检测技术方法
很长时间以来,开展的此项检测活动,是按照琼脂平板的措施来进行的,通常要两到三天的时间才可以完成。最近,许多的专家和组织都不断地对工艺以及措施进行深化分析,获取了非常高的成就,对许多措施进行了改进,切实提升了检测的精准性以及安稳性特征,而且获取了许多全新的工艺,具体有如下的措施:
1.采用电阻抗法。具体的讲,它是指细菌繁衍的时候,将会使培养基中的火分电惰性物质如碳水化合物、蛋白质和脂类等,代谢为具有电活性的小分子物质,其能增加培养基的导电性,进而导致阻抗出现改变,因此,可以通过检测培养基的电阻抗变化情况来判定细菌在培养基中的生长繁殖特性,即可检测出相应的细菌。
2.采用快速酶触反应及代谢产物的检测。细菌在生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶,所以根据其特性来选用相对应的底物和指示剂,而且合理的记载信息。
3.采用分子生物学技术。它涵盖两项内容:1)核酸探针技术。结合碱基互补相关的概念,使用独特的措施来对物体进行标注。2)聚合酶链式反应(PCR)技术。其原理为通过加热使双链DNA经裂解成两条单链,成为引物和DNA聚合酶的模板;接下来把气温变低,使寡聚核苷酸引物与DNA分子上的互补序列退火。通常状态中,当退火的气温非常高的话,它的扩增特性就十分的优秀。
4.采用免疫学方法检测细菌抗原和抗体的技术。具体有三项措施:1)荧光抗体检测技术(IFA),它又有两种,分别是直接的以及间接地。其中第一种是直接在样本上滴加已知特异性荧光标记的抗血清,然后对其清洗,进而获取信息。而后一种措施是在检样上滴加已知细菌特异性抗血清,等到发生反映之后再仔细地清洗,再加入荧光标记的抗体后在荧光显微镜下观察结果。2)免疫酶技术(EIA),其是将抗原、抗体特异性反应和酶的高效催化作用原理结合,此法非常的独特,而且功效非常好。通过共价结合将酶与抗原或抗体结合,形成酶标抗原或抗体,或通过免疫方法使酶与抗酶抗体结合,形成酶抗体复合物。3)免疫磁珠分离法(IMS),即应用抗体包被的免疫磁珠,用一个磁场装置收集铁珠。
5.采用仪器法。1)微型全自动荧光酶标分析仪(Mini-VIDAS),其主要采用具有优异的敏感性和特异性的酶联荧光技术(ELFA),得到的荧光和抗原的比例是一种顺向的关系。2)全自动微生物分析系统(Vietk-AMS)。它能够一次对非常多的样本开展分析,而且检测的时间不需要非常久,通常在两到三个小时即可,此法的效率非常好,同时也将成为检测行业全行的发展趋势。
;② 微生物生长的几种检测方法
一、生长量测定法
1.1体积测量法:又称测菌丝浓度法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是,取一定量的待测培养液(如10毫升)放在有刻度的离心管中,设定一定的离心时间(如5分钟)和转速(如5000rpm),离心后,倒出上清夜,测出上清夜体积为v,则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有一定偏差。
1.2称干重法:
可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中,将一定体积待测培养液倒入离心管中,设定一定的离心时间和转速,进行离心,并用清水离心洗涤1-5次,进行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干,或采用红外线烘干,也可在80℃或40℃下真空干燥,干燥后称重。如用过滤法,丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤,过滤后用少量水洗涤,在40℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(activitydryyeast,ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
1.3比浊法:
微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时,可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中,即可随时测定其生长情况,而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计,在波长600nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600,以此监控E.Coli的生长及诱导时间。
1.4菌丝长度测量法:
对于丝状真菌和一些放线菌,可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度,或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管,到入合适的培养基,卧放,在开口的一端接种微生物,一段时间后记录其菌丝生长长度,借此衡量丝状微生物的生长
二、微生物计数法
2.1血球计数板法:
血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片,玻片上有四条沟和两条嵴,中央有一短横沟和两个平台,两嵴的表比两平台的表面高0.1mm,每个平台上刻有不同规格的格网,中央0.1mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察,统计一定大格内微生物的数量,即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种方法简便,直观,快捷,但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数,并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。
2.2染色计数法:
为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数,而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足,人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色,可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液,染色后在显微镜下观察,活细胞为无色,而死细胞为蓝色。
2.3比例计数法:
将已知颗粒(如霉菌孢子或红细胞)浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合,在显微镜视野中数出各自的数目,即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。
2.4液体稀释法:
对未知菌样做连续十倍系列稀释,根据估计数,从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样,接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中,经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查最大或然数表MPN(mostprobablynumber)得出菌样的含菌数,根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测,例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。
2.5平板菌落计数法:
这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释,取一定
体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合,或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后,用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度,即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9cm的平板上出现50-500个菌落为宜。但方法比较麻烦,操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数,而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养,获得了单克隆。
2.6试剂纸法:
在平板计数法的基础上,发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片,琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基,其中加入活性指示剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC,无色)待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确,相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。
2.7膜过滤法:
用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品,经丫叮橙染色,在紫外显微镜下观察细胞的荧光,活细胞会发橙色荧光,而死细胞则发绿色荧光。
2.8生理指标法:
微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化,例如酸碱度,发酵液中的含氮量,含糖量,产气量等,与生长量相平行的'生理指标很多,它们可作为生长测定的相对值。
2.9测定含氮量:
大多数细菌的含氮量为干重的12.5%,酵母为7.5%,霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25,即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多,如用硫酸,过氯酸,碘酸,磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合,在CO2气流中加热后产生氮气,收集在呼吸计中,用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。
2.10测定含碳量:
将少量(干重0.2-2.0mg)生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中,用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在1000C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升,在580nm的波长下读取吸光光度值,即可推算出生长量。需用试剂做空白对照,用标准样品做标准曲线。
2.11还原糖测定法:
还原糖通常是指单糖或寡糖,可以被微生(转载于:mHg)的条件下才能生长,他们有完整的呼吸链,以分子氧为最终氢受体,具有超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶。
兼性厌氧菌:它是以在有氧条件下的生长为主也可兼在厌氧条件下生长的微生物,有时也称“兼性好氧菌”。
微好氧菌:只能在娇滴滴额氧分压(1.33~3.Pa,正常大气中的氧分压为0.2bar)下才能正常生长的微生物。
耐氧菌:耐氧性厌氧菌的简称,是一类可在分子氧存在下进行发酵性厌氧生活的厌氧菌。
厌氧菌:有一般厌氧菌与严格厌氧菌(专性厌氧菌)之分。
超氧阴离子自由基:活性氧的形式之一,因有奇数电子,故带负电荷;它既有分子性质,又有离子性质;其性质极不稳定,化学反应力极强,在细胞内可破坏各种重要生物大分子和膜结构,还可形成其他活性氧化物,故对生物体极其有害。
超氧化物歧化酶(SOD):保护好氧菌免受超氧化物阴离子自由基的毒害的酶。按SOD分子中所含金属辅基的不同分三类:1、含Cu、Zn的SOD,存在于几乎所有真核生物的细胞质中;2、含Fe的SOD,主要存在原核生物中;3、含Mn的SOD,主要存在于真核生物的线粒体中。SOD除可清除超氧阴离子自由基外,还发现在防治人体衰老、治疗自身免疫性疾病、抗癌、防白内障、治疗放射病和肺气肿以及解除苯中毒等方面有一系列疗效。
PRAS培养基:用严格厌氧方法配置、分装、灭菌后的厌氧菌培养基,称为预还原无氧灭菌培养基,即PRAS培养基。
厌氧罐:培养厌氧菌的装置。
亨盖特滚管技术:一种集制备高纯氮、以氮驱氧和全过程实现无氧操作、无氧培养、无氧检测于一体,用于研究严格厌氧菌的技术和装置。
厌氧手套箱:一种用于无氧操作和培养严格厌氧菌的箱形密闭装置。
摇瓶培养:一般将三角瓶内培养液的瓶口用8层纱布包扎,以利通气和防止杂菌污染,同时减少瓶内装液量,把它放在往复式或旋转式摇床上作有节奏的震荡,以达到提高溶氧量的目的。
曲:是一类用麸皮、米糠等疏松的固体营养料接种、培养微生物而制成的含氧活菌产品。
曲法培养:将麸皮、碎麦或豆饼等固态基质经蒸煮和自然接种后,薄薄地铺在培养容器表面,使微生物即可获得充足的氧气,又有利于散发热量,对真菌来说,还有利于产生大量孢子。
通风曲:一种机械化程度和生产效率都较高的现代大规模制曲技术,在我国酱油酿造业中广泛应用。
污染:有害微生物通过气流、水流、接触和人工接种等方式,传播到合适的基质或生物对象上而造成种种危害。
巴氏消毒法:有发过微生物学家巴斯德用于果酒消毒,故名。这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的也太风味食品或调料的低温消毒方法(一般在60-85度下处理30min至15s)。有两种方法:1、低温维持法;2、高温瞬时法。
间歇灭菌法:适用于不耐热的培养基灭菌。方法是:讲带灭菌的培养基放在80-100度下蒸煮15-60min,以杀灭其中所有的微生物营养体,然后放至室温37度下保温过
夜,诱使其中残存的芽孢发芽,第二天再以同样方法蒸煮和保温过夜,如此重复3天即可在较低的灭菌温度下同样达到彻底灭菌的效果。
连续加压蒸气灭菌法:让培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却,然后流进发酵罐。
梅拉特反应:高温灭菌时,培养基中得氨基化合物(氨基酸、肽、蛋白质)的游离氨基与羧基化合物(糖类)的羰基间发生复杂的化学反应,导致培养基褐变同时,还降低了有关营养物成分,故应设法避免。
石炭酸系数:一定时期内,被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效果的石炭酸的最高稀释度之比。
抗生素:一类有微生物或其他生物生命活动过程中合成的此生代谢产物或其人工衍生物,他们在很低浓度时就能一直或干扰他种生物的生命活力,因而可用作有两的化学治疗剂。
抗代谢药物:一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似,并可干扰正常代谢活动的化学物质。3种作用:1、与正常代谢物一起共同竞争酶的活性中心,从而使微生物正常代谢所需要的重要物质无法正常合成,例如磺胺类;2、“假冒”正常代谢物,使微生物合成出无法正常生理活动的假产物,如8-重氮鸟嘌呤取代鸟嘌呤而合成的核苷酸就会产生无正常功能的RNA;3、某些抗代谢药物与某一生化合成途径的终产物结构类似,可通过反馈调节破坏正常代谢调节机制,例如,6-巯基腺嘌呤可抑制腺嘌呤核苷酸的合成。
选择毒力:大于病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病源微生物的生长繁殖,借以达到治疗该宿主传染病的一种措施。
③ 检测微生物的方法有哪些
目前主要有普通培养法(简称国标方法)一般出报告的要用,仪宽竖器法、核酸检测法(PCR)歼喊、还有目前慎改大的快速检测法(主要包括:免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等。这个根据自己的需求来选择吧。
④ 微生物的传统检测方法有哪些
传统检测有三种方法
1、直接显微镜观察,正常情况,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度以及培养时间),同种微生物表现出稳穗激者定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。
2、选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件,选择培养基,其作用是允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断,得到的微生物往往并不只有一种,但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。
3、鉴别培养基,根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比,鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小,一般可直接测定某微生物的种类。
⑤ 谁知道无尘手套的测试标准及方法
测试标准
由于高科技产品的精度越来越高,愈来愈多的产品被要求在相对洁净的无尘室中生产、包装、测试,如电脑的磁头、硬盘、LCD、数码像机、光学电子等行业。在这些行业中,会使用到大量的无尘室专用手套用于保护产品、人员、环境等。
由于高科技产品的精度越来越高,愈来愈多的产品被要求在相对洁净的无尘室中生产、包装、测试,如电脑的磁头、硬盘、LCD、数码像机、光学电子等行业。在这些行业中,会使用到大量的无尘室专用手套用于保护产品、人员、环境等。从污染的角度理解,人被视为洁净室内最大的污染物发生源,操作人员通过穿上特殊的服装系统来保护洁净室环境,免受人员产生的污染物的污染。手套作为这种服装系统的重要组成部分,不但具有充分的防护作用,同时不会污染受控环境中生产工艺的关键区域,所以手套的作用很关键。IEST-RP-005.3主要就手套的原料、生产、包装、测试碰没液等做了详细的规定。
到底该选用何种手套在无尘室中使用,IEST没有明确的规定,但是建议从产品的精度、无尘室的级别、成本核算等方面综合考虑。一般来说,如果是ISO 5级或以上的无尘室,建议使用丁腈橡胶手套;如果是生产晶圆、磁头、硬盘、光学仪器等应使用丁腈橡胶手套。
由于手套多数时候是和产品直接接触的,所以对其品质要求是非常严格的,IEST标准要求对生产后的手套,在使用前必须进行清洗以及测试笑物合格后方可使用。测试主要分四部分:外观检查、物理测试、ESD性能测试、化学测试。下面主要介绍一下化学方面的测试。
要做化学测试,首先需要专门的仪器、环境、水源、辅助系统等支持,即需要建造一个实验室。这是一笔相当大的开支,多数企业不会选择自己做测试,选用专门的有资格的实验室测试是一个好的办法,不过需要付出一定的测试费用。
由于对产品的影响多是微观因素,即一些肉眼看不见的尘粒子、微生物等,所以测试手套也是从微观方面做出分析:
1.LPC测试(液态尘粒测试):LPC测试是将被测物浸泡于DI水中,再进行1分钟的超声波震荡,将附着在被测物上的尘粒溶解于DI水中,然后计算DI水中液态尘粒的数量的方法。该测试是检查手套洁净度的一种重要测试方法,主要看手套会跌落多少对产品有影响的尘粒,如磁头行业,对于大于或等于0.5um的尘粒,不能超过3000个每平方厘米(@0.5um<=3000counts/cm^2)。
2.NVR(非挥发性残留物)测试:是测试手套上非挥发性残留物含量的一种测试方法,测试时,用一定量的溶剂察陆对被测试部位进行淋洗或浸泡,收集淋洗或浸泡后的溶液使溶剂挥发,用微量天平称量残留物,即可得出手套上非挥发性残留物的含量.NVR超标可知手套表面有非挥发性残留物污染。在电脑硬盘行业,一般规定NVR<20ug/cm^2。
3.FTIR(傅立叶红外线光谱)测试:由于产品的要求,无尘室不允许有硅油、氨基化合物、DOP等物质存在,因为该些物质会影响到产品的质量。因此,对手套必须进行FTIR测试。测试时,用一定量的溶剂对被测试部位进行淋洗或浸泡,收集淋洗或浸泡后的溶液使溶剂挥发,将残留物作红外线光谱分析。这种方法可以分析出手套上是否残留有硅油、氨基化合物、DOP等。(注意:该测试的结果如果合格,则表示上述三种残留物没有超过敏感线,并不表示完全没有)。
4.IC(离子测试):是将被测物浸泡于DI水中,再进行超声波震荡,将附着在被测物上的无机阴阳离子溶解于DI水中,然后再进行色谱分析的方法。IC测试可测出被测物上阴阳离子的种类,及每种离子的含量。该测试最常监控的离子是Cl-、NO3-、SO4-、PO4-等,一般总重量不能超过1.0(Total<1.0)。
5.GC(有机挥发物色谱测试):是用来分析手套上有机污染物的种类和含量的一种方法。测试时,将手套加温到一定温度,使有机污染物挥发,将挥发出来的气体收集起来,进行色谱分析,可得出有机污染物的种类和含量,当GC测试超标时,说明手套上的有机污染物超标。一般在磁头行业其标准控制在10ug/g(Total:GC<10ug/g)。
以上测试是行业中最常规的几种测试,同时IEST还规定了如硫化氢测试、耐腐蚀测试、灰烬测试等,企业可以根据产品的需要做出适当的选择。
⑥ 工作人员手部微生物检测,涂抹法
10-2、10-3、10-4、10-5都可以的,同时做几个嘛。这样就可以比较哪个浓度更适合检测。
⑦ 做微生物实验的步骤
1、准备工作,培养基的配制及灭菌(121-126度灭30分钟高压蒸汽式灭菌),玻璃器皿的灭菌(170度灭2小时干热灭菌,也可用湿热灭菌)若量大可加长灭菌时间。
⑧ 一次性医用乳胶手套怎么进行无菌检查检查方法麻烦描述一下!
应该参照药典中的“无菌检查法”来进行检查。
简单地说一下,因为药典中这部分好象占了4页纸,你真要去做大概还是得看药典上的详细操作。另外卫生部的《消毒技术规范》也有无菌检验详细叙答清述。
取供试品4个包装,以无菌操作拆开包装,于不同部位分别剪取约100mg或1cm×3cm的供试品11份,以无菌操作将该供试品分别接种于需气菌、厌气菌培养基6管,其中`1管接种金黄色葡萄球菌对照用菌液1ml,作阳性对照,另接种于真菌培养基5管。轻轻摇动,使供试品与培养基混合,需气菌、厌气菌培养基管置30~50℃、真菌培养基管置20~25℃培养7日。在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。阳性对照管在24小时内应有菌生长,如在加入供试品后,培养基出现浑浊,培养7天后,不能从外观上判断有无微生物生长,可取该培养液适量转种至同种新鲜腊举锋培养基中或斜面培养基上继续培养,细菌培养轮晌2日,真菌培养3日,观察是否再出现浑浊或斜面有无菌生长,或用接种环取培养液涂片,染色,用显微镜观察是否有菌。
⑨ 手部微生物检测方法
不能将棉球放到培养基里面培养,这样根本没办法计数.将棉签放入10ml灭菌生理盐水中,混匀,取1
ml到平板中,再到平板(45℃的培养基约15ml).37℃培养48h,计数.
假如手很脏,细菌很多,则将棉签放入含10ml灭菌生理盐水的采样管后,取1ml到9ml无菌生理盐水中(相当于10倍稀释),再取1ml该稀释液到灭过菌的平板中,再倒入培养基.