微生物实验室有哪些注意事项

① 微生物实验室的温度和湿度有何要求

一般温度为：18-26度，湿度：45%-65%。《GB 4789.1—2016 食品安全国家标准食品微生物学检验总则》该标准作为了食品微生物学检验基本原则和要求，对检测环境提出了一些要求，内容如下：

1、实验室环境不应影响检验结果的准确性；就食品微生物实验室而言，比较容易受到环境影响的操作有无菌检测，如果在洁净室内进行，那么洁净室容易受到外界环境污染，洁净室设计是否合理，如远离污染区、洁净室与外界环境是否有二级缓冲间隔离、试验人员进入洁净室是否更换洁净服，佩戴口罩，手套等等。

2、实验室区域应与办公区域明显分开；实验室办公室与试验区不得在同一区域，即办公室不得设置在实验室内部，这是实验室设计时需要特别注意的一个要求。

3、实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要，实验室布局宜采用单方向工作流程，避免交叉污染；食品微生物实验室应配备足够的功能区，如：准备室、洁净室、生化室（BSL-2实验室配置生物安全柜）、培养室、洗消室等，且房间的布局因用单向工作流程，洁净区与非洁净区分布兼具合理性、科学性、实用性，一个设计优秀的微生物实验室，是微生物检测准确性的有力保液亮凳障。

4、实验室内环境的温度、湿度、洁净度及照度、噪音等应符合工作要求；该标准未准确提出相关的技术参数，以下是个人总结的一些技术文件对微生物实验室温度、湿度、照度、噪声和洁净度的技术要求，可参考作为实验室设计、日常环境监控时的判定值。

(1)微生物实验室有哪些注意事项扩展阅读

微生物实验室建设时应具备良好的自然通风，必要时应配备抽风机。接种、分离及鉴定细菌等操作应在生物安全柜中进行，对结核杆菌等传染性极强的微生物学检验时必须在100%外临床微生物学实验室接触多种有害微生物，为了防止交叉污染，保护工作人员健康，实验室应至少划分成3个区：

一、清洁区

包括：办公室、休息室、培养基配制室与试剂储藏室。此区域禁止带人细菌检验标本。

二、操作区

(1) 整洁：微生物操作区是各种病原菌相对集中的地方，为了减少粉尘流动，防止交叉污染，操作区应与外界分开。实验室工作人员进入操作区应换鞋，送标本人员不进入操作区，操作区地面用专用拖把每天拖1次，每周用消毒剂擦洗1次。每天早上工作前，用紫外线照射30min，或每天工作后，用紫外线照射60min，对整个操作区进行消毒；下午工作结束后用消毒液消毒工作台面，以保证工作环境的安全清键档洁。

(2) 光线：细菌培养的细小菌落及血清试验凝集颗粒的观察，都需要有充足的光线。操作区除设置常规照明灯外，还必须安装操作台灯，以保证实验结果的正确判断。

(3) 通风：由于各种病原菌集中，空气污浊，实验室要求保持排的生物安全柜中进行。

(4) 温度和湿度：由于无菌操作的要求，实验过程中经常使用酒精灯，因此，微生物实验室不能安装吊扇。为了达到实验所需的适宜温度，尤其：满足某些仪器对温度湿度的要求，实验室应安装空调。

(5) 电源：要求提供稳压、恒频的电源;根据仪器设备要求，必要时配备不间断电源。

(6) 水源：操作区内须设置水源。用于标本处理(如，细菌染色) 的水槽与工作人员洗手用的水槽不能混用。

(7) 污染物处理：操作区须备有消毒缸，以处理沾有活菌的玻片等污染物品。检验剩余的标本及使用过的带菌平板、试管均须集中地点安全放置，经消毒灭菌处理后再洗涤或丢闹旅弃。

二、无菌区

(1) 无菌室应完全封闭，进出无菌室至少要经两道门，中间隔有缓冲间，无菌室与外间设置一个可开闭的窗口，用于传递器具。

(2) 无菌室必须保持整洁。工作人员进入无菌室应换专用鞋、专用衣。无菌室使用前须用紫外线消毒30min，操作结束后清洁台面，再用紫外线消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸，彻底消毒。

(3) 无菌室仅用于培养基分装等无菌操作，不能进行有菌标本的操作。操作人员操作时应严格关门并戴好专用的口罩与帽子。

(4)无菌室内应有空气过滤装置，并安装空调。

② 微生物日常检验过程中的注意事项

微生物日常检验过程中的注意事项

在微生物检验操作过程中，要保证检测环境(如超净台、检测室)以及所用工器具的洁净程度，同时保证人员各种操作的规范性，尽量保证其无菌性，防止因人为原因操作失误而出现误差结果，同时在适宜温度进行培养，为合理决策和指导生产提供依据。下面是我为大家带来的关于微生物日常检验过程中的注意事项的知识，欢迎阅读。

培养基的灭菌及使用

1.每次配制时，要注意其生产日期是否在保质期内，查看其开瓶日期及瓶口密封性，保证其未变质，并且未吸潮。

2.培养基配制时，称量要准确，包括盐水的分装要准确。

3.一定要保证现配制现灭菌，未灭菌的配好培养基不能长时间放置，更不可隔夜。

4.灭菌时要保证恒温、恒压，同时要保证有效的灭菌时间。

5.灭菌过的培养基要冰箱保存，可保存一周，一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则，先配制的要先使用。

6.在使用时，要根据当班次的使用量，用水浴锅先将培养基溶化为液态，然后及时调低水浴温度(先化好的可从水浴取出，放在水浴锅锅盖上)待用，千万不可长时间使培养基处于高温状态。

7.做产品微生物检测时，倾倒培养基温度在 45℃左右，不可过烫，避免将菌烫死;也不可过凉，化好的培养基又结块凝固，不便于观察结果。

8.每瓶培养基均要做空白。

9.尽量集中做样，避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞，增大培养基的污染几率，出现误差结果。

10.培养基剩余过少时，可先将其倾倒成空白用板。

检测环境的维持

一、大环境(检测室)

1.检测时，窗户和空调要关闭，或用酒精对房间进行喷雾消毒，避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。

2.如果在原来的原料微生物检测室进行检测，要定期开启紫外灯，对房间进行杀菌。

二、小环境(超净工作台)

1.定期清洁初效过滤器，要及时更换。

2.检测前，将超净台内部进行清洁，用 75%酒精进行擦拭消毒，并提前半小时将超净台紫外灯打开，对超净台内部环境进行杀菌。

3.关紫外灯，开风机，调整合适进风量，风量不可过低。

4.每次检测后，要对超净台内部进行清理、清洁，并用 75%酒精进行擦拭消毒。

5.紫外灯根据其使用寿命要及时更换。

6.检测同时，要做上相应菌落检测的`环境空白。

7.检测区域的选择：

a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作;

b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

工器具的洁净度

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌。

2.检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用，不可与其它操作器具混用，使用时，先用75%酒精消毒，再采用灼烧方式进行灭菌。

3.接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌，但要注意检测时要先将接种针(环)进行冷却。

样品的采集及检测

一、保证采样器具的无菌性

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌，保证恒温、时间足够(但不可时间过长，容易导致玻璃器皿易裂纹而报废)。

2.取样筐：使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。

3.取样勺：要保证其清洁消毒，清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。

4.取样袋：可先用酒精进行擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。

5.电子称表面用 75%酒精消毒。

二、人员操作

1.保证手部的清洗、消毒：取样前及检测前都要先洗手再消毒。

2.取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。

3.取样完毕，不可在车间逗留，要及时将样品放入超净台，对其外表面进行紫外灯照射消毒。

4.在要求的检测区域进行操作。

5.检测前，要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒，再开口。

6.往盐水瓶加样品时，要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7.样品计量要准确，稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉)，进行 100 倍稀释时，1mL 吸管要伸入盐水中，不可以将样品从管壁流下去，同时要避免将管底部捅破。

8.盐水温度以 40℃左右为宜，不能过热，会将部分微生物烫死;也不能温度太低，不能将样品溶解完全。

9.进行稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。

10.倾倒平皿时，要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量，不可以太少，在培养过程中易干掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右为宜。

11.做大肠菌群样时，要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好，放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。

12.接二步时，要注意先将接种针(环)进行冷却，避免出现接不上菌落的情况，导致无法判断、确认。

13.检测完毕，及时放入相应培养箱进行培养，并清理清洁超净台。

微生物的培养

1.在培养过程中，要随时监控培养箱温度，保证其在适宜的温度进行培养。

2.要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果，出现异常，要及时分析原因进行反馈。

③ 微生物实验室是如何保证安全和避免污染的

BSL3实验室是用来研究那些对个体危险高（一旦感染容易导致严重后果），对群体危险较低（不易大范围高效传播）的活病原体的场所，这些病原体包括鼠疫、高致病性禽流感、狂犬病毒、SARS、黄热病毒、结核杆菌等等。BSL3实验室必须遵循强制标准（生物安全实验室建筑技术规范GB 50346-2011）建设，通过中国合格评定国家认可委员会验收之后才能根据所批准的研究范围挂牌运行。整洁：微生物操作区是各种病原菌相对集中的地方,为了减少粉尘流动,防止交叉污染,操作区应与外界分开.实验室工作人员进入操作区应换鞋,送标本人员不进入操作区,操作区地面用专用拖把每天拖1 次,每周用消毒剂擦洗1 次.每天早上工作前,用紫外线照射30 min ,或每天工作后,用紫外线照射60 min ,对整个操作区进行消毒；下午工作结束后用消毒液消毒工作台面,以保证工作环境的安全清洁.光线：细菌培养的细小菌落及血清试验凝集颗粒的观察,都需要有充足的光线.操作区除设置常规照明灯外,还必须安装操作台灯,以保证实验结果的正确判断。温度和湿度：由于无菌操作的要求,实验过程中经常使用酒精灯,因此,微生物学实验室不能安装吊扇.为了达到实验所需的适宜温度,尤其是满足某些仪器对温度湿度的要求,实验室应安装空调.

④ 微生物实验室仪器摆放要注意什么

微生物实验室仪器摆放要注意什么
微生物实验室是生物学领域必备实验室。如何配置才能成就一个完备的微生物实验室，哪些仪器必不可少，哪些仪器可有可无？
(1)超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。

(2)培养箱
培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。 培养箱有多种类型，包括生化培养箱，霉菌培养箱，厌氧培养箱等。具体来说区别如下： a. 生化培养箱只能控制温度。可作为一般细菌的平板培养。 b. 霉菌培养箱可以控制温度和湿度。可作为霉菌的培养。 c. CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养，例如双歧杆菌。
(3)天平
天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。
(4)微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。
(5)菌落计数器
菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。
(6)微波炉/电炉
用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。
(7)高压灭菌锅
微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。
(8)移液器
液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。
(9)冰箱
冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。具体来说，不同温度下保存的物品如下： a. 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 b. -20℃适用于某些试剂、药品、配好的抗生素等。 c. -80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、感受态等的保存。
(10)生物安全柜
微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。
(11)摇床
摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。
(12)纯水装置
纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜，但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些，但是使用方便，可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别，实验中配制试剂，配制培养基均需用纯水。
(13)生物显微镜
由于微生物体积较小，所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构，形态等的观察。
(14)冷冻干燥机
主要适用于细菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脱水的产品，在加水以后能够再次恢复原材料的特性，不影响其生物活性等。通过冷冻干燥，细菌之类的材料成为干燥状态，从而不会发生化学改变。
(15)分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度，可以正确选取合适的培养时间。一般是在600nm波长测定菌液浓度。
(16)恒温干燥箱
恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围，用户可以根据实验需求进行选择。例如，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干，一般玻璃用具的烘干可以选择60℃。
(17)恒温水浴锅
水浴锅是一种控温装置，水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度，42度，56度下水浴进行，所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。
(18)酸度计
用于配置试剂时精确测量PH值，从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。
(19)离心机
用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定，需要低温环境，要视样品的种类而定。
(20)液氮罐
液氮罐储存液氮，可用于细菌、酵母、霉菌和大型真菌等各种微生物的长期保存。以上介绍的是微生物实验室的基本仪器配置，在组建实验室时还需要其他一些耗材，例如酒精灯，试管架，三角瓶，量筒，玻璃试管，灭菌吸管，凉干架，剪刀，镊子，脱脂棉，纱布，试管筐，无菌采样及称样袋，接种环，过滤器等。实验人员可以根据自己的需求为微生物实验室配置合适的仪器和耗材。
微生物实验室管理制度
一、实验室管理制度
1.实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。