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水生生物急性毒性试验的试验步骤有哪些

发布时间:2023-06-13 20:40:14

Ⅰ 什么是静水生物毒性试验法

测定污染物对水生生物的毒性的一种方法,即把受试生物置于不流动的试验溶液中,测定污染物浓度与受试生物中毒反应之间的关系,从而确定污染物的毒性。这种方法又称静水式试验。
影响测试的因素 在测试中,如其他试验条件不变,被测物浓度和试验溶液水质的变化会直接影响测定的结果。如被测物是易挥发、不稳定的化学物质,在试验过程中的挥发或分解会造成被测物浓度的下降,使试验溶液的毒性降低。但也有例外,如农药对硫磷的降解产物对氧磷,其毒性高于对硫磷,因而在试验过程中试验溶液的毒性反有所增加。此外,被测物浓度的下降还同微生物的作用,试验容器的性质,沉淀物和悬浮物的吸附,以及受试生物的吸附等有关被测物是(BOD) 高的废水或耗氧量大的化学物质,能消耗试验溶液中的溶解氧,有时甚至会使溶解氧减少到零。受试生物的代谢产物(二氧化碳、氨等)如不及时排除,也会使水质恶化。溶解氧的减少和代谢产物的积累,不仅影响毒物的毒性,而且危害受试生物。因此在进行生物测试时,不仅要设法保持被测物浓度和试验溶液水质的稳定,还要严格控制其他试验条件。
测试方法 在静水式生物测试中,试验溶液如果通过稀释水的预先曝气,仍不能满足试验对溶解氧的要求,可采用有控制的人工充气来补充溶解氧,或定期更新试验溶液。定期更新试验溶液的生物测试称为换水式生物测试,或称为换水式试验,即每隔一定时间将容器中的试验溶液吸出,加入新配制的试验溶液,或将受试生物转入新配制的浓度相同的试验溶液中。更换试验溶液的时间视被测物的性质而定,一般24小时更换一次。如果在24小时内被测物浓度仍有明显下降,或者溶解氧低于饱和度50%时,更新溶液的时间可适当缩短。换水式生物测试除能提供受试生物所需的溶解氧化,还能保持被测物浓度大致稳定和防止水质恶化,因而是静水式生物测试常用的测试方法。
优缺点 19世纪末就有人用静水式生物测试方法测定化学物质和工业废物对鱼类的毒性,但直到20世纪50年代才制定测试的详细程序。与相比较,静水式生物测试方法简单易行,费用低廉,用水量和废水量均较少,因而至今仍被广泛采用。但是,静水式生物测试只适用于测定不易挥发、相对稳定而又耗氧量不大的污染物,以及BOD不高的工业废水的急性毒性。

Ⅱ 简述,举例说明环境生物学研究的方法有哪些步骤

环境生物学在应用生物学和生态学等学科的研究方法的基础上已经形成自己的一套研究方法。
现场调查
通过对指示生物、农田生物群落结构、森林生物群落结构、草原生物群落结构、水生生物群落结构、污水生物系统的现场调查,以及对生物指数、污染指数和生物种的多样性指数等的分析,从宏观上研究环境中的污染物和人为干预对各种生物或生态系统产生影响的基本规律。
室内实验
通过各种实验手段,如植物人工熏气、静水式生物测试、流水式生物测试、水生生物急性毒性试验、水生生物亚急性毒性试验、水生生物慢性毒性试验和回避反应实验等,从微观上研究污染物和人为干预对生物产生的毒害作用及其机理。
生态模拟

环境生物学
利用数学模型模拟生态系统的行为和特点,预测人类活动对生态系统可能造成的影响或危害(见生态模拟)。人类活动排放的废弃物,越来越大地超过环境自净能力,从而影响全球的环境质量。据70年代估计,全世界每年排入环境的固体废物超过30亿吨,废水约6000~7000亿吨,废气中仅一氧化碳和二氧化碳就近4亿吨。大量废弃物排入环境使大气和水体的组成起了变化。大气中的二氧化碳含量(按体积计)已由19世纪的0.028%增加到21世纪的 0.032%。二氧化碳对地球气候起着调节作用。科学实验证实,如果它的含量继续增高,势必引起全球性的气候异常。西欧一些国家排放的大量硫氧化物、氮氧化物,经风传送,随雨水降落,造成斯堪的纳维亚地区一些淡水湖的湖水酸度显着上升。瑞典一些湖泊水中的氢离子浓度70年代比30年代几乎增加了100倍,鱼产量因而大幅度下降。世界上每年由于海运、沿海钻探和开采石油、事故溢漏和废物处理排入海洋的石油及其制品达到500多万吨。海洋被石油污染,使海洋浮游生物的生存受到严重的威胁。

Ⅲ 毒理学试验方法有哪些

现代毒理学的研究方法,由于其本身包括众多的分支学科,分别在相应的学科领域里建立了自己的研究方法,现归纳为两大类。(一)实验研究(微观研究)动物实验的方法仍是现代毒理学实验的重要方法之一,传统的毒理学通过整体动物实验已为人类提供了大量的以剂量-效应(反应)为主的数据库,结合人群接触水平对许多化学物质进行了安全性(危险度)评价。
由于外源物的数量巨大,整体动物实验需要消耗大量的时间和经费,也不能满足数以万计的外源化学物质的毒性评价要求,另一方面为了保护动物,尽量减少动物的使用,所以由过去以整体动物试验占主导地位的观念,转向以体外试验为主导地位的趋势。但也需指出,体外试验的发展并不排斥整体实验的重要性,两者相互补充,互为验证才能为科学研究提供可靠数据,随着生命科学的发展,分子生物学的理论及技术被引入现代毒理学,近年来在分子水平上建立了许多新方法。

1.体内试验
哺乳动物体内试验,也称整体动物实验,一般包括:急性毒性试验、亚急性毒性试验、亚慢性毒性试验及慢性毒性试验。还有特殊毒性实验,如哺乳动物致突变试验、致畸试验、致癌试验。以上试验在毒理学中统称“三性”和“三致”试验。

常用的试验动物:大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、家兔、狗、猴等。检测环境污染物的毒性试验,常选用鱼、蚤类或其他水生生物。还可用鸟类、昆虫进行试验。
近年来为了从分子水平探讨致突、致癌机制,转基因动物已开始在毒理学试验中应用。
转基因动物是一种集整体水平、细胞水平和分子水平于一体的实验动物,更能体现生命整体研究的效果,它是把经典的与现代的毒理学研究方法相结合,无疑会推动现代毒理学实验研究的发展。
2.体外试验
利用游离器官、培养的细胞、细胞器以及利用微生物等进行毒性研究的方法为体外试验,此方法多用于观察外源物对生物体特殊毒性的初步筛检及作用机制和代谢转化过程的深入研究。

体内与体外试验各有优点和局限性,应根据试验目的和要求,选择一组试验,才能互相弥补优缺点。(二)人群调查(宏观研究)人群调查也称为人群毒理学,是在人群中研究外源物对人体产生毒作用的规律,为人群检测和制订预防措施提供比动物试验更直接更可靠的毒理学资料,主要包括以下3个方面:
1.中毒临床观察
常见于偶然发生的事故,如误服、自杀、毒性灾害等,通过急性中毒事故的处理和治疗,可直接观察到中毒的症状并分析可能的毒效应的靶器官。

2.志愿者试验
在不损害人体健康的原则下,有时可设计一些不损害人体健康的受控试验,仅限于低剂量、短时期的接触毒性作用可逆的化学品,目前国际上提倡健康志愿者的毒性试验,减少由动物试验结果外推于入的不确定性,特别是一些神经毒物出现的毒性效应,如头晕、目眩、复视等需要表达的中毒症状,只有人才能真实地反映出来,所以国外健康志愿者的毒理学研究资料倍受重视。

3.流行病学调查
将动物试验的结果,进一步在人群调查中验证,可以从人群的直接观察中,取得动物试验所不能获得的资料,优点是接触条件真实,观察对象是一个大的群体,为人群检测和防治措施提供比动物试验更直接、更可靠的科学资料,但是也存在许多难点:①人群中观察外源物的毒性效应大多数为慢性毒性效应,特别是人类致癌物质其致癌效应所需时间过长;②接触人群中所用的观察指标是非特异性的,与对照人群比较需要足够例数:③外环境因素混杂,外源物的种类繁多而且多种化学物质可出现联合作用,难以确定某种特定的化学物质毒性效应和其因果关系。
近年来由于分子生物学的发展和渗透,在传统流行病学调查方法中引进了细胞、分子水平的人群检测方法,如生物标志物作为癌症早期判断的信息,把分子生物学与流行病学结合为一体发展为分子流行病学。这门新兴学科利用分子生物学、分子遗传学、生物化学、免疫学等手段研究,评价不同人群或个体致癌危险度及其机制,从而使现代毒理学由实验动物研究发展到人群和个体易感性研究的新阶段。
它可以解答人体从接触化学物质到发生疾病的过程中所发生的一系列连续性的变化,从中提取更多的癌前病变的信息,为癌症的早期判断、早期防治提供科学依据。可以预测,分子流行病学在21世纪将会得到更大的发展。
综上所述,正确的方法是将宏观研究与微观研究有机地结合起来,宏观研究为微观研究提供线索,微观研究为宏观研究提供依据,两者结合起来才能对外源化学物质作出准确的危险度评价。

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