‘壹’ 微生物研究中的传统平板法是什么方法具体怎么做的
传统的平板法为:稀释混合倒平板法
平板是指经熔化的固体培养基倒入无菌培养皿中,
冷却凝固而成的盛有固体培养基的平皿。该法是先将待分离的含菌样品,
用无菌生理盐水作一系列的稀释(常用十倍稀释法,
稀释倍数要适当),
然后分别取不同稀释液少许
(0.5-1.0ml)于无菌培养皿中,
倾入已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基,
迅速旋摇,
充分混匀。待琼脂凝固后,
即成为可能含菌的琼脂平板。
于恒温箱中倒置培养一定时间后,
在琼脂平板表面或培养基中即可出现分散的单个菌落。
‘贰’ 微生物实验平板制作方法
(1)培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。分为液体培养基和固体培养基。
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
(2)常用消毒方法:煮沸消毒法、紫外线照射、巴氏消毒法和化学药剂消毒。
(3)常用灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。
(4)平板培养基的制备:计算、称量、融化、灭菌、倒平板。
(5)接种方法:平板划线法和稀释涂布法。
倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰;然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完,管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速例入培养基约15mL,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。
平板划线操作:
①挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。
②划A区:将平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上,仍留在煤气灯旁),右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完A区后应立即烧掉环上的残菌,以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时,左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内),以防止杂菌的污染。
‘叁’ 微生物技能操作中常用的平板和移液管如何洗涤和包装
正常用水洗加试管刷刷就可以呀,但如果是新的,就还需要用盐酸洗涤一下。
包装的时候,因为平板都是成对的,把他们扣好,立起来,用报纸边滚动平板边包,包好后再用绳十字交叉缠上就可以了~