Ⅰ 如何设计实验方案从环境筛选具有抗细菌作用的微生物
如何设计实验方案从环境筛选具有抗细菌作用的微生物
1.从环境中大量获得微生物样品,以不同稀释度制备菌悬液 2.将不同稀释度的不同菌悬液与目标细菌共培养,在平皿上做好标记 3.观察,筛选出有抗细菌作用的微生物(在微生物周围出现没有目标细菌的抑菌圈) 4.进一步纯化筛选出来的微生物,再次进行不同浓度下的抑菌试验,以验证其抗菌作用。
1,首先要明确准备筛选光谱还是窄谱的抑菌微生物,其次要选好你的指示菌
2,一般采用透明圈法进行抑菌微生物的筛选。
步骤:1,培养基、牛津杯的灭菌;
2,培养基冷却至不烫死指示菌的温度后,在其中加入2%左右的指示菌
3,混合均匀后倒平板
4,平板凝固后在其上加入牛津杯,并在牛津杯中加入你筛选的菌悬液
5,培养
6,观察透明圈大小
7,透明圈有且明显较大的,其中菌就是拟筛选的菌
Ⅱ 土壤中筛选微生物的具体步骤
在100ml培养基(含1.5%的NaCl)中加入1.5克土壤进行初步富集培养。富集培养1星期后取出1.5ml的菌液加入到100ml的培养基中再次富集培养一星期,再取出1.5ml的菌液加入到100ml的培养基中富集培养一星期。取出50ul富集培养菌液涂板,挑取单菌落在试管中富集培养。
Ⅲ 如何筛选微生物药物
市面上有很多微生物制剂的菌种,多种多样,造成在选择上产生很大困惑,下边是选择菌种的方法:
1、微生物菌种选择
动物消化道微生物具有多样性和特异性,不同动物种类对菌种的要求不同,同一菌株用于不同动物,产生的效果差异也较大。使用时一定要掌握菌种的特性和功效,选择不当起不到应有效果,反而会破坏原有菌群,甚至引发疾病
2、微生物菌种应用时间
微生物制剂应用要从子畜开始使用,以保证有益菌优先定植。因为制剂进入体内后要有一段时间进行微生物菌群调整才能定植下来。
一般认为,乳酸菌类在各种动物的各阶段添加均较好,芽孢杆菌类在生长期添加较好,在幼龄期可以添加;曲霉菌类在幼龄期,水产动物全期不必添加;酵母菌类在生长期不必添加;在水产动物养殖中,以改善水质为目的时,可将微生物制剂或光合细菌直接洒于水中。
3、微生物菌种添加方式
一般粉状饲料添加微生物制剂效果较好,颗粒饲料和膨化饲料在加工过程中的高温可造成10%~30%的芽孢杆菌,90%以上的肠球菌以及99%以上的酵母失活,而乳酸杆菌几乎全部被杀灭。因此,在颗粒饲料中要使用耐热,耐挤压的芽孢杆菌制剂。乳酸菌不耐高温,应采用冻干后包被或采用喷雾干燥的方式制成的乳酸菌制剂。使用时最好采用饮水方式,以利于乳酸菌优先粘附于肠壁。
4、微生物菌种剂量与浓度
微生物制剂中必须含有相当数量的活菌才能达到效果。当进入动物肠道食糜中外源菌数大于1000万个每克时,都会对肠道内原有菌群产生较大的影响。因此,微生物制剂在产品中活菌数含量为10亿~20亿每克时效果最佳。
我国正式批准生产的微生物制剂中规定每克芽孢杆菌含量要多于5亿个。以酵母菌产品为例,目前市场上销售的产品活菌数从每克几亿到200亿不等,在选择是要认真鉴别。
5、微生物菌种抗生素的影响
细菌类的微生物制剂对抗生素敏感,不宜与抗生素同时使用,使用微生物制剂的前后二天应停止使用抗生素。最好先用抗菌药物清理肠道,为益生菌的定植和繁殖扫除障碍,然后再饲喂微生物制剂,可提高使用效果。酵母菌类属于真核生物,生物学活性与细菌完全不同,对抗生素、磺胺类药物和一些抗菌剂有天然抗性,可与抗生素同时使用。
6、微生物菌种保存条件和期限
微生物制剂均为活菌制剂,由于大多数菌种在饲料加工、运输中容易失活,应用中要注意保存期限。通常微生物制剂应密封保存于阴凉避光处,储存时间不宜过长,有效期一般为一年左右,随着保存时间的延长,活菌数量不断减少。厌氧菌类暴露在空气中容易死亡,有的产品对其进行了包被或真空包装处理,应在打开包装后规定的时间内用完。酵母类属于兼性厌氧菌,可以保存较长时间。芽孢杆菌类有效期比其他类型长,可达2年左右。
Ⅳ 从自然界分离筛选微生物菌种的基本程序包括哪些
⑴采样:从适合微生物生长的环境采样
⑵富增:根据其特性选择性的富集目的微生物
;⑶初筛:采用平板对富集的目的微生物纯种分离,确定其活性选出高产菌种,一般200株;
⑷复筛:对第一次分离的微生物菌种,再次筛选,一般40株;
⑸二级复筛:从40株选出5株⑹确定菌种,进行生产性能测定.
Ⅳ 海洋微生物的筛选方法有哪些
海洋微生物的筛选方法有哪些
海洋中有自养和异养、光能和化能、好氧和厌氧、寄生和腐生以及浮游和附着等类型的细菌.几乎所有已知生理类群的细菌,都可在海洋环境中找到.最常见的有:假单胞菌属 (Pseudomonas)、 弧菌属(Vibrio)、无色杆菌属 (Achromobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、螺菌属 (Spirillum)、微球菌属(Micrococcus)、八叠球菌属(Sarcina)、芽孢杆菌属(Bacillus)、棒杆菌属 (Corynebacterium)、枝动菌属(Mycoplana)、诺卡氏菌属 (Nocardia)和链霉菌属(Streptomyces)等十多个属.在海水中,革兰氏阴性杆菌占优势;在远洋沉积物中,则革兰氏阳性细菌居多;在大陆架沉积物中,芽孢杆菌属最为常见.
Ⅵ 微生物问题:营养缺陷性的筛选方法有什么举例说明。。
营养缺陷型微生 物是 指经过诱变处理,使某一菌株丧失合成某些 必需 的营养物质(氨基酸、维生素和碱基等)的能力,从而必须在培养 基中加人相应 的营养成 分才能 正常生 长 的变异菌株。
分离:
1、青霉素浓缩法。
青霉素 能抑 制细菌 细胞壁 的合 成,因此,用青霉素只能杀死生 长繁殖 中的细 菌,而 不能杀死停 止分裂 的细菌。在 只能使野生 型生长而不 能使 突变型 生长 的选 择性液体 培养 基中加人青霉 素,野生型被 青霉 素杀死,突变 型 则不被 杀死 而得 以 浓缩。
2、菌丝过滤法。
先用 诱变 剂处理 真菌 (如脉 胞菌 ) 的分生抱子,然 后接 种到液体培养基 中,不 断给营养液通 气
,刺激分生抱子生长,并 防止它们相互结合在一起。大约 经过l d 的培养,分生抱子萌发,长 出菌丝。然 后用棉 花把 萌发 了的分生抱子过 滤掉,未萌发的分 生抱 子 (死亡 的、需要 较 长 时间萌 发 的和突变为营养缺 陷型 的分 生抱 子 ) 则仍 留在 培养 液 中,以后 每隔一段时间进行过滤
,连续若 干次后,所剩下 的就都是 缺陷 型的或死亡 的分生抱子。通过补充各种成分 鉴定缺陷型
检出:
影印接种法。采用一种 特制的工具—“印章” ,将 在完全培养基上长 出的菌 落的平 皿上“印”一 下,然 后分 别在 完全培养基和基本培 养基 的相 应位 置上 各 印一下,若 在 完全 培养基上生长,而在基本培养基上 不生 长,即认为是营养缺 陷型