Ⅰ 怎么测定土壤中微生物啊大家来帮帮忙!
详细的自己去查书,我说大概
1.土样按一定量拿来后融于水中。
2.稀释多少倍自己定,(因为这需要做预实验,估计范围)
3.做平板培养基.
4.将稀释后的溶液涂平板。
涂的方式有很多,自己定,划线也行
5.等个12小时左右就会有单菌落出现。
6.观察。
如果你要研究测定特殊菌。
就要把它挑出来做形态学观察。
Ⅱ 怎么测定土壤中微生物啊大家来帮帮忙!
,加入蒸馏水,小心震荡。
2作为土壤微生物,应为它们种类繁多,如果真菌的颜色不明,要有一个提取的过程。
1,可以用高倍的光学显微镜.制作土壤浸出液。
4:取干净土壤.培养:使用完全培养皿,滴入浸出液,培养
3.长出菌落后,根据菌落的形状大小,有些是真菌菌落,有些是细菌菌落,真菌菌落可先用肉眼观察,再都制成生物涂片,分层后取出上层清液。观察真菌可以用较低倍数的光学显微镜,可染色处理,对于细菌的观查,共生在一起,要想观察好
Ⅲ 土壤中微生物碳氮的测定方法
1.3 土壤微生物区系测定
细菌、真菌、放线菌采用平板培养法。细菌采用牛肉膏蛋白胨培养基,放线菌采用改良高氏1号培养基,真菌采用马丁氏培养基。
1.4 土壤微生物活性指标测定方法
1.4.1 土壤微生物生物量碳、氮的测定:土壤微生物生物量碳的测定:采用氯仿熏蒸—0.5mol (L-1K2SO4提取法,TOC自动分析仪测定;土壤微生物生物量氮的测定:采用熏蒸提取一开氏定氮法测定微生物生物氮量。
1.4.2 土壤氨化作用强度、硝化作用强度分析:土壤氨化作用测定采用土壤培养法,用半微量开氏定氮蒸馏法测定NH4+-N的含量;土壤硝化作用测定采用溶液培养法,用比色法测定NO2-N的减少量。
Ⅳ 土壤微生物数量的测定方法
Ⅳ 土壤微生物的检测怎么做,哪里可以做
土壤微生物是土壤中一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称,严格意义上应包括细菌、古菌、真菌、病毒、原生动物和显微藻类。其个体微小,一般以微米或毫微米来计算,通常1克土壤中有几亿到几百亿个,其种类和数量随成土环境及其土层深度的不同而变化。它们在土壤中进行氧化、硝化、氨化、固氮、硫化等过程,促进土壤有机物的分解和养分的转化;那土壤内的微生物如何测定呢,下面喆图小编带大家来了解一下。
一、培养方法
(1)稀释平板涂抹法
具体操作如下:
①准确称取 10g(精确到 0.001)采集的鲜土,倒入装有 90 ml 无菌水的 500 ml 的三角瓶中,置于往返震荡机上(120r/min,常温),震荡 20 min,使土壤充分分散成为土壤悬液。
②将上面的土壤悬液用无菌移液管吸取 5 ml 到 45 ml 稀释液中,即为 10-2稀释度,依次按 10倍法稀释,制成 10-1~-~10-6稀释度。注意:每次吸取悬液时,在稀释液中反复吸入和吹出 3-~5 次,减少因管壁吸附而造成的误差,并使悬液进一步分散,每个稀释度需要更换无菌吸管吸取悬液。)
③根据各类微生物在土壤中的数量多少选择适当稀释度的悬液接种。本实验选择细菌的稀释度为 10-~10-5,放线菌为 10~-10-4,真菌为 10-1~-10-3。 -3-2
④土壤悬液的接种方法:在无菌培养皿中倒入 15~20 ml 选择性培养基,待凝固后,用 0.2 ml无菌移液枪吸取0.2 ml各稀释度的土壤悬液,然后立即用涂抹棒将悬液均匀的涂抹于培养基表面。用同一支吸管接种时,从高稀释度开始,依次接种到低稀释度。
⑤接种了土壤悬液的培养皿,平放在超净工作台 20~30 min,使得菌液渗透入培养基内,然后倒置于 28~-30°C 生化培养箱中培养一定时间:细菌 1~-3 天,放线菌 10-~14 天,真菌 3~-7 天。
⑥培养结束后,取出培养皿计数。
(2)稀释培养法
一系列稀释度的制作与稀释平板法相同。根据各类微生物在土壤中数量的多少选择适当的稀释度,分别接种 1 ml 稀释液与制作好的液体培养基中,根据需要做 3~4 次重复,适温培养。2 三大类土壤微生物培养基的分离三大类土壤微生物的分离采用稀释平板涂抹法,每个菌种要求做 3 个稀释度,每个稀释度做3-4次重复,选取细菌和放线菌的菌落在20~-200之间的培养皿、真菌的菌落在 10-~100 的培养皿计数,并计算三次重复的平均值。每克干土中微生物数量计算式:
每克干土中菌落数=(菌落平均数×稀释倍数×100%)/(湿土质量×干土)
1, 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏 3g、蛋白胨 5g、琼脂 18g、蒸馏水 1000 ml、pH 值 7.0-~7.2 。
2, 放线菌:改良高氏 1 号培养基:KNO3 1g,FeSO4·7H2O 0.01g,K2HPO4 0.5g,淀粉 20g,MgSO4·7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、琼脂 18g、3%重铬酸钾溶液 3.3ml、蒸馏水 1000ml、pH 值 7.2~-7.4
3,真菌:马丁氏培养基(虎红琼脂):蛋白胨 5g、KH2PO4 1g、MgSO4 0.5g、葡萄糖 10g、琼脂 18.5g、孟加拉红 0.033g、氯霉素 0.1g、蒸馏水 1000ml。
所有培养基需在湿热灭菌锅中121°C灭菌 20-~30min
以上土壤微生物测定方案仅供参考,可以查询专业公司进行检测。
Ⅵ 如何测定土壤中特定细菌的数量
直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方法.
测量土壤中微生物,一般采用平板计数法,因为直接计数法只能依靠肉眼在显微镜下观察,误差较大。
1、采集特定地区的土壤作为待测样品。
2、要将待测样品配制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开。
3、再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内; 或是将一定量的稀释液,与溶化后冷却至45℃左右的琼脂培养基混合,倾入无菌培养皿中,摇匀、静置待凝。(选用细菌培养基:牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠)
4、经过培养后,就由单个微生物生长繁殖形成菌落,这样的一个形态的菌落就代表着一个微生物个体。统计培养基中出现的菌落数,即可推算出检测样品中的活菌数。
Ⅶ 将土壤中的微生物(细菌,真菌,放线菌)进行分离,纯化,培养保藏的具体步骤及注意事项
1.用三种培养基培养,分别是牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养、分离)、马铃薯葡萄糖培养基(真菌培养),高氏1号培养基(放线菌)
2.培养一定时间,待菌长出,根据三种菌的菌落特点,选取菌种,用划线法接种到各种菌对应的斜面培养基上,培养。
3.进行生化实验,确定是否是你猜想的菌。三种菌的生化实验具体我也不是很清楚。
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