如何避免和利用肠道微生物进行实验动物

① 实验室预防微生物污染的措施有哪些

这个问题问得好宽泛啊，而且这样的问题是没有标准答案的，具体怎么预防微生物感染要自己在实验过程中才能体会到。美国进口普卫欣天猫首先是“有菌观念”和“无菌操作意识”，进实验室一般都要戴手套（一般是至少两层），穿实验服，有的时候还要护目镜（液氮之类的），操作中一定要按正确的程序严格无菌操作，一方面避免感染，另一方面加强自我防护，如果实验出现意外（如菌种管打翻等），立即用消毒剂（酒精）清洁桌面，洗手等，及时杀灭细菌和病毒，避免污染面扩大，每次实验必须清洁消毒桌面，并彻底洗手等。一些污染或盛有有害的细菌和病菌的器皿、不要的菌种等，一定要消毒和高压灭菌处理后，方可弃掉，而器皿才能再利用。无菌室，超净工作台都是用紫光灯灭菌的，严格定期消毒灭菌，定期沉降菌，仪器定期清洁。

② 实验室微生物检验需要注意哪些问题

微生物检验无菌操作的注意事项有很多细节，日常的微生物检验过程中要注意无菌操作，除了要在洁净台和操作器皿上的消毒，还需要注意人员卫生和环境的卫生。

【操作技巧】

进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。

【培养前准备】

在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。

【火焰消毒】

在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。

【洗手和着装】

原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75%酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。

【操作台消毒】

体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用).紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

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③ 动物细胞的原代培养实验中为克服微生物污染采取了哪些措施

橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度，各种溶液灭菌除菌要仔细，有时即使想尽各种办法也难以挽回、擦瓶口和烧灼瓶口，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗。但要注意；烧过的器械要冷却后才能使用，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用，可以复苏早期冻存的细胞使用，随着滤过体积的增大，预防性应用比污染后使用好、消毒要彻底。定期对二氧化碳培养箱进行消毒、添加抗生素各种抗生素性质不同。开始操作前要用75%酒精棉球擦手。因此，防止污染，以防止下落细菌的污染、从操作者做起（1）进无菌室前要彻底洗手，如发现原有的细胞遗传物发生改变，金属器械不能在火焰中长时间烧灼、从物品试用中心实验方法资讯采购保障中心品牌专区NSFC如何预防细胞培养的污染问题2009-10-11 00。同时：75%的酒精搽拭培养箱后:00体外培养的细胞受到严重污染时，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染，危害培养细胞，且对细胞本身也有一定影响。2。具体操作。4，才能将发生污染的可能性降到最小程度。（4）使用培养液前不宜过早开瓶。（2）操作者动作要轻，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，预防是关键，对各种微生物的作用也不同；胶塞、细胞悬液时。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中，可做细胞遗传学方面的鉴定。重要细胞系（株）的传代工作应由两人独立进行，联合应用比单用效果好、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行，应定期更换培养系统中的抗生素，因此为避免诱导抗药细菌。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，在无菌过滤操作中、防止细胞交叉污染所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备。3，吸管再用时会将其带到培养液中，以防退火，按规定穿隔离衣，滤膜破损的可能性增加，安装吸管帽。一般预防可从以下几方面着手，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用，一旦怀疑发生交叉污染，应专管专用。（3）操作时尽量不要谈话，使用可移动的紫外灯至少消毒 30min，避免直立。（6） 吸取培养液，或尽可能不用抗生素处理：1，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，以免烧焦产生有毒气体，开瓶后的培养液应保持斜位，故应选择最后过滤的液体进行检测。（5）操作完毕后应整理好工作台面；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中

④ 做了一次微生物实验，我该如何防护

立即用稀释的84消毒液或石炭酸溶液浸泡消毒抹布毛巾拖把，沾有消毒液的抹布毛巾拖把等擦拭桌面、地面，用稀释的84消毒液洗手。一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫)，实验脊椎动物生物安全防护实验室。

每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的生物安全防护要求依次为:一级最低，四级最高。

(4)如何避免和利用肠道微生物进行实验动物扩展阅读

微生物学实验设计：

1、取材：

指材料选择，微生物分离一般来源是自然界的土壤及其他生物体内。你最好选择在常年高温的环境中采样。譬如火山口，热泉口，常年高温的戈壁沙漠土壤等。

2、分离：

指分离野生菌株。在实验室，分离微生物的传统途径是选择合适的培养基选择性分离土壤中的微生物，这个题目的要求说明实验中需要在高温条件培养，最好选用多种培养基，以便于分离到种类较多的各类微生物。相关实验技术请自行查阅书籍。

3、纯化：

微生物分离过程中重要一步，目的是需要得到菌株的纯培养，即多次纯化过程中需挑取单菌落接种扩培，同时可以起到活化菌株生命力的作用。当然此过程中合适的培养基相当重要。否则菌株可能反而退化失活。

4、筛选：

获得适合高温生长的菌株库之后，依据要求筛选菌株。即指提供单因子培养条件筛选，譬如选择能产高温蛋白酶的，需要在培养基中单一添加高级蛋白（即未降解过的或未胨化过的）作为氮源。

以葡萄糖或其他易利用糖类作单一碳源。又如选择产高温淀粉酶的，以淀粉作为单一碳源，补充其他无碳利用的氮源。能在选择条件下生长的为目的菌株。

5、确证：

得到目的菌株后即可通过相应的酶提取方法确证。提取总酶在高温条件下进行体外蛋白消化或者淀粉消化实验来确证。

⑤ 研究肠道微生物有哪些方法与技术

研究肠道微生物有哪些方法与技术
肠道微生态系统是哺乳动物健康与疾病的重要基础,在生理、病理、预防、治疗中都具有重要的地位和作用[1]。对于哺乳动物,肠道微生物的营养作用非常重要,如合成维生素、消化碳水化合物、氨的利用、脂的利用以及合成酶类[2]。在食物相对缺乏时,肠道多形类杆菌对糖苷水解酶的分泌会增多,提高肠道微生物群系利用食物的能力[3]。可见,肠道微生态系统能根据食物的特点做出改变,以其功能的多样性和较大的适应性来应对外界环境的变化。人体肠道微生物群基因的多态性还为宿主提供了许多人体自身所不具备的酶与生化途径,从而使得人体不易消化的食物残渣及上皮细胞分泌的内生粘液被发酵利用[4]。为探寻肠道微生物在机体的营养与健康以及疾病与治疗机制中的作用,越来越多的科研工作者开始关注对肠道微生物的研究[5,6]。悉生生物学、厌氧培养技术、电镜技术、细胞分子生物学、基因组学、代谢组学及蛋白质组学等现代科学技术的发展对肠道微生态的研究起到了积极的推动作用[7,8]。在Biolog等研究方法中,需先将肠道中的微生物提取出来,所得到的菌悬液,既保证活体微生物的种类和数量,又去除可能会干扰研究结果的杂质[9]。