克隆哪些单细胞微生物

㈠ 微生物是怎么样被克隆的

一．实验目的
在油镜下观察粪便中微生物的个体形态
二．实验原理
微生物的细胞小且透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。因此，微生物染色技术是观察微生物形态结构的重要手段。
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师gram创立的。革兰氏染色法（gram
stain）不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用g
表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用g-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic
dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising
agent）和复染液（counterstain）。碱性染料初染液的象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫（crystal
violet）。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine
）是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精（ethanol）。复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染液，复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，而且将细胞区分成g
和g-两大类群，常用的复染液为番红。
三．实验材料
1．菌种：？？？
2．器材：显微镜，载玻片，染色缸等
3．染色液：草酸铵结晶紫染色液，路哥氏（lugol）碘液，95%乙醇，0.5%沙黄染色液
四．实验步骤
1．
涂片
取粪便少许，用蒸馏水将其浸泡，将一滴浸泡液滴到载玻片，干燥、固定。固定时通过火焰1—2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
2．
染色
（1）初染
加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
（2）媒染
滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
（3）脱色
将载玻片上的水甩净，并衬以白背景，用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30分钟，立即用水冲净酒精。
（4）复染
用番红液染1—2分钟，水洗。
（5）镜检
干燥后，置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。
五．注意事项
1．
革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。因此必须严格把握脱色时间。
2．
选用培养18—24小时菌龄的细菌为宜，若细菌太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
粪便中主要的细菌是大肠杆菌。

㈡ 单细胞生物有哪些

1、草履虫

无脊椎动物，原生动物门，纤毛纲的主要代表动物之一，又称尾草履虫。生活在有水草的淡水池沼和水沟中，为最常见的大型原生动物。喜聚集在有机物较多和阳光充足之处，营自由游动生活。

2、酵母菌

真菌门、子囊菌纲、酵母科中的酵母菌属。圆形、椭圆形或卵形，也有腊肠形，少数种类可形成假菌丝。细胞宽1～5微米，长5～30微米。细胞壁的主要成分是甘露聚糖和葡聚糖。

3、变形虫

无脊椎动物，原生动物门，肉足虫纲，变形虫科。体表无坚韧的表膜，仅有1层薄的质膜。膜内为较透明的细胞质，可明显区分为内质和外质两部分。内质又可分为不能移动的凝胶质和可随虫体的移动而流动的溶胶质。

4、衣藻

绿藻门、团藻目、衣藻科中的衣藻属。藻体为单细胞，球形、卵形或椭圆形，细胞前端有2条等长的鞭毛，藻体借鞭毛的摆动而游动。细胞质中多具1个大形杯状叶绿体，在叶绿体内靠细胞前部有1个红色眼点，有感光作用。

5、眼虫

鞭毛纲，眼虫科。体小，长梭形。前端钝圆，后端尖削，中央有一大的胞核。体外表膜具细的斜纹。体通常因含大量卵圆形的叶绿体而呈绿色。有鞭毛2条，1条自胞口伸出。

㈢ 请问单细胞生物有哪些

单细胞蛋白质曾被称为发酵蛋白、生物合成蛋白、生物蛋白、石油蛋白、工业蛋白及菌体蛋白等。目前可供作饲料用的单细胞蛋白质微生物主要有酵母、真菌、藻类及非病原性细菌4大类。第一个单细胞生物出现在35亿年前。单细胞生物在整个动物界中属最低等最原始的生物。根据传统的分类法，很多动物，植物和真菌多是多细胞生物。变形虫算作单细胞动物，它的一些种类却算作黏菌，带鞭毛的鞭毛虫如眼虫有时被归为单细胞藻类或者是单细胞动物。新的分类法中，所有的真核单细胞生物都算作原生生物。