微生物检验怎么包裹试管

‘壹’ 微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。下面是我为大家带来的微生物检验标本的正确采集及注意事项的知识，欢迎阅读。

一、 血液标本的采集

1、 采集方法

（1）75%酒精清洁局部皮肤。

（2）待皮肤干后，再用2%—2。5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm（直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5—10ml，婴幼儿1—5ml。

（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项

（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38。5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。

（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

（3）培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20：1或大于这个比例。

（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。

（5）每例至少采血两次，间隔0。5—1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3—4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。

（8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的采集

1、采集方法

在病灶部位或髂前（后）上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培养瓶内。

2、注意事项

（1）骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞，因而骨髓培养对伤寒病人的.诊断较血培养优越。

（2）用于怀疑细菌性骨髓炎病人。

三、静脉导管标本的采集

1、采集方法

（1）常规导管部位皮肤消毒。

（2）无菌方法从病人体内拔出静脉导管，剪下导管尖端5cm，放入无菌瓶中。

（3）立即（15min内）送检，避免标本干燥。

2、注意事项

（1）剪下的导管立即接种血平皿，可提高阳性率。

（2）肉汤反复冲洗导管腔内，冲洗液做定量培养。

（3）有人将剪下的导管置肉汤增菌液或培养瓶中，此法不能区分导管感染菌与少量定植菌。

（4）卫生部在《医学感染诊断标准》（试行）（2001年1月3日施行）中规定：导管管尖培养其接种方法应取导管尖端5cm，在血平板表面往返滚动一次。细菌≥15cfu/平板，即为阳性。

四、呼吸道

1、痰标本

（1）采集方法

①清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深部的脓痰，置于清洁干燥容器中送检。

②痰量极少者可用45℃ 3%—10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。

③咳嗽无力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。

④气管切开者可以深入透气孔中取痰。

⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。

⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内，缓慢注入无菌蒸馏水5ml，取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液，放入无菌容器中送检。

⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内，因而可采用胃内溶物做结核菌培养，其阳性结果比咯痰高10%左右，该方法于晨起空腹时，把灭菌的胃管，从鼻腔送入胃内，用20ml注射器抽取胃液。

（2）注意事项

①痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且含菌量也多。

②标本采集后立即送检，若不能及时送检者，可暂存2—8℃冰箱。若晚1—2h接种，会失去苛氧菌，并使得革兰阴性菌过分生长。

③可接受的标本：痰;支气管灌洗液，支气管刷，支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本：唾液;24h留的痰（结核杆菌培养除外）;拭子。

④ 痰标本的质量评价：（用显微镜筛选）在低倍镜下，检查鳞状上皮细胞，至少10个视野，集中在有白细胞处，合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2：1。

2、鼻拭子

（1）用湿的拭子（生理盐水）;

（2）需插两个鼻孔;

（3）深入3。3cm左右，转动4—5次;

（4）以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。

3、咽拭子、口腔拭子

（1）采集方法（到细菌室取专用拭子）

①患者清水漱口后，由检查者将其舌外拉，用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;

②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时，直接用棉拭子在病灶部位擦拭;

③插入运送培养基中立即送检，防止干燥。

（2）注意事项

①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;

②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。

五、胃肠道

1、粪便

（1）采集方法

选取脓血、黏液粪便2—3g，液体粪便取絮状物1—2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。

（2）注意事项

①标本要采集新鲜的，陈旧标本影响阳性检出率;

②切忌粪尿混合;

③若要分离阿米巴，标本要立即送检并注意保温;

④运送培养基可提高阳性率;

⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;

⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;

⑦标本在病理早期或治疗前采集;

⑧一般认为用抗菌药三天后，标本培养病原菌阴性。

2、肛拭子

在无法获得粪便的情况下，可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4—5cm（幼儿2—3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出，置运送培养基中送检。

六、泌尿道

根据卫生部《医学感染诊断标准》（试行）通知，泌尿系统临床诊断为：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热，并具有下列情况之一：

（1）尿检白细胞男性≥5个/高倍视野，女性≥10个/高倍视野，插导尿管患者应结合尿培养;

（2）临床已诊断为泌尿道感染，或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。

1、中段尿

（1）采集方法

①女性 采样前用肥皂水或0。1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴，用手指阴x分开排尿，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口，灭菌纱布擦干，上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

（2）注意事项

①导尿虽然可以减少污染，但是多次重复导尿可以造成逆行性感染，因此近年来大多采用中段尿。

②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本，减少污染。

③采集标本以晨起第一次尿液为佳。

④采集标本后，若不能在1h内送检，暂放4℃冰箱，但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h，即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml，也不能作为诊断依据，应重新留取标本送检。

⑤疑为尿道炎时可将最初3—4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌，如反复检查为同一细菌，也应考虑为病原菌。

⑥儿童在多数情况下，仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多，可以高度怀疑为尿路感染，无菌则可否定。

⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌，需考虑污染可能，建议重新留取标本送检。

⑧尿液中不得加入防腐剂，消毒剂否则影响阳性检出率。

2、膀胱穿刺采集法

避免污染是很困难的，培养结果与病情不符时，或尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难时，可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。

3、留置导尿者采集法

拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。

七、脑脊液

1、采集方法

由临床医师以无菌方法收集脑脊液3—5ml（细菌1ml，真菌2ml抗酸杆菌2ml，病毒1ml）盛于无菌试管或小瓶中立即送检。

2、注意事项

（1）采集标本后立即送检，因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡;

（2）疑为上述细菌感染时，应注意保温，不可置冰箱或低温保存。

八、胆汁

1、十二指肠引流法

在无菌操作下，将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部（距齿65—70cm）时，收集A液（来自总胆管，为橙黄或金黄色），随之注入25%硫酸镁溶液40ml，经1—2min后再采取B液（来自胆囊，为棕黄绿色），随后收取C液（来自肝胆管，为柠檬色），一般认为B液做细菌培养意义较大。

2、胆囊穿刺法

胆囊造影术时，可同时采取胆汁。

3手术采取法

由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。

以上采集之标本应立即送检，否则置于4℃冰箱内，采集时需小心，避免被唾液、十二指肠液细菌污染。

九、穿刺液标本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。

1、采集方法

由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5—10ml，心包液、关节液收集2—5ml，置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中，充分混匀后，立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐，标本与抗凝剂之比10：1。

2、注意事项

⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1—2天后进行;

⑵不能立即送检可置4℃冰箱保存;

⑶疑为淋病性关节炎患者的关节液，采集后立即送检，或床旁培养为佳;

⑷不能用棉拭子浸蘸标本送检。

十、脓汁及病灶分泌物

1、伤口

⑴表面伤口拭子采集方法及注意事项

① 仅限于皮肤与皮下组织，包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。

②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;

③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;

④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物，拭子放在运送培养基中立即送检，不要采集创口表面的渗液。

⑵伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项

①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后，用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检，疑为厌氧菌感染时，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本;

③当创伤出血时，敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本，此时获得阳性结果机会甚少。

④采集标本注意观察脓汁及分泌物性状、色泽、气味等。可为培养鉴定提供依据。

⑶烧伤创面

①烧伤创面需要脓性分泌物，焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色，烧伤边缘水肿。患者发烧>38℃或低体温<36℃，合并低血压。

②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。

③由于创面部位不同，细菌种类也不尽相同，要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。

④采集痂下变黑或变性的不健康区边缘或引流液等做定量培养及组织活检。

2、厌氧伤口拭子

⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;

⑵可用注射器抽吸，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

⑶立即送检，送检过程中必须保持在无氧条件;

⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物，胃、小肠及大肠内容物等。

3、尿道口分泌物拭子

⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口，然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;

⑵采集前列腺液时，先将尿道、膀胱冲洗，然后从肛门用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出;

⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口，然后从阴道内诊压迫尿道，使分泌物溢出;

⑷取子宫颈分泌物，先用内窥镜扩张阴道，然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物，尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。

4、蜂窝织炎

⑴用无菌生理盐水或酒精消毒皮肤;

⑵用细针在炎症最显着处穿刺吸引;

⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;

⑷注入无菌试管内送检。

5、组织标本

⑴活体组织采取的微量标本，可直接接种在培养基内;

⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;

⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5—10s，然后用灭菌剪刀切开，取其中的脓汁;

⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;

⑸组织标本不可用福尔马x固定;

⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。

十一、眼标本采集

⑴一般细菌，以无菌棉拭子采集眼分泌物，尤其脓性分泌物;

⑵沙眼衣原体，首先擦去眼结膜上面的分泌物，然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞，用链霉素处理后备用;

⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12—24h后采集标本;

⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。

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‘贰’ 微生物检验细菌的接种方法

微生物检验细菌的接种方法

常用的细菌接种方法有平板划线分离法、斜面接种法、穿刺接种法、液体和半固体接种法、涂布接种法等。下面是我为大家带来的关于微生物检验细菌的接种方法的知识，欢迎阅读。

一、平板划线分离法

平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。

为方便划线，一般培养基不宜太薄，每皿约倾倒20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表面光滑。划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种(如图1， A、B)。

分区划线法是将平板分四区，故又称四分区划线法。划线时每次将平板转动60~70°划线，每换一次角度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线;

另一种连续划线法是从平板边缘一点开始，连续作波浪式划线直到平板的另一端为止，当中不需灼烧接种环上的菌。

1)连续划线法

将琼脂平皿半开盖倒置于培养箱内至无冷凝水，接种环于酒精灯外焰烧至红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环至红。

轻轻摇匀待接种试管，左手手心托待接种试管底侧部，右手执接种环，右手小指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插入待接接种液中，蘸一下，取满一环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。或将接种环通过稍打开皿盖的缝隙伸入平板，在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却，然后以无菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。

于靠近酒精灯处打开平皿盖约30°，右手将环伸进平皿，将菌种点种在平板边缘一处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘(如图2)，抽出接种环，盖上平皿盖，然后将接种环上多余的培养液在火焰中灼烧，打开平皿盖约30°伸入接种环，待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表面轻巧滑动划线，接种环不要嵌入培养基内划破培养基，线条要平行密集，充分利用平板表面积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上皿盖。灼烧接种环，待冷却后放置接种架上。培养皿倒置于适温的恒温箱内培养(以免培养过程皿盖冷凝水滴下，冲散已分离的菌落)。培养后在划线平板上观察沿划线处长出的菌落形态，镜检后再接种斜面。

2)分区划线法

取菌、接种、培养方法与“连续划线法”相似。

分区划线法分离时平板分四个区，故又称四分区划线法。其中第4区是单菌落的主要分布区，故其划线面积应最大。为防止第4区内划线与1、2、3区线条相接触，应使4区线条与1区线条相平行，这样区与区间线条夹角最好保持120°左右。

先将接种环沾取少量菌在平板1区划3~5条平行线，取出接种环，左手关上皿盖，将平板转动60~70°，右手把接种环上多余菌体烧死，将烧红的接种环在平板边缘冷却，再按以上方法以1区划线的菌体为菌源，由1区向2区作第2次平行划线。第2次划线完毕，同时再把平皿转动约60~70°，同样依次在3、4区划线。划线完毕，灼烧接种环，关上皿盖，同上法培养，在划线区观察单菌落。

二、斜面接种法

该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。

(1)左手平托两支试管，拇指按住试管的底部。外侧一支试管是斜面上长有菌苔的'菌种试管，内侧一支是待接的空白斜面，两支试管的斜面同时向上。用右手将试管塞旋松，以便在接种时容易拔出。

(2)右手拿接种环(如握毛笔一样)，在火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部位也过火灭菌.

(3)将两支试管的上端并齐，靠近火焰，用右手小指和掌心将两支试管的试管塞一并夹住拔出，试管塞仍夹在手中，然后让试管口缓缓过火焰。注意不得将试管塞随意丢于桌上受到沾污，试管口切勿烧得过烫以免炸裂。

(4)将已灼烧的接种环伸入外侧的菌种试管内。先把接种环的先端触及无菌苔的培养基上使其冷却(如果操作迅速，此时接种环尚未完全冷却)。再根据需要用接种环沾取一定量的菌苔，注意勿刮破培养基。将沾有菌苔的接种环迅速抽出试管，注意勿使接种环碰到管壁或管口上。

(5)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部，轻轻向上划线(直线或曲线，根据需要确定)，勿划破培养基表面。

(6)接好种的斜面试管口再次过火焰，试管塞底部过火焰后立即塞入试管内。

(7)将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼，使其干燥后，再在外焰中烧红，以免菌苔骤热，会使菌体爆溅，造成污染。

(8)放下环后，再将试管塞旋紧，在试管外面上方距试管口2～3cm处贴上标签。

(9)28℃～37℃恒温培养。

斜面接种方法及无菌操作过程如下具体操作过程见图3。

三、穿刺接种法

用接种针经火焰灭菌，沾取少量菌种，垂直地穿入试管固体培养基中心至底部，然后将挑起菌落的接种针平行于管壁插入琼脂斜面底部、沿着原接种线将针拔出、烧试管塞和试管口、塞上试管塞，再将接种针上残留的菌体在火焰上烧掉。要做到手稳、动作轻巧快速。见下图4。(a:垂直接种法，b：水平接种法)

四、液体和半固体接种法

1)液体接种法

包括从外面菌种接人培养液，或从液体菌种接入液体培养液，两种情况都可以用接种环接种。但在培养量比较大的情况下，液体接种宜采用移液管接种，要求无菌操作。

左手持试管，右手将烧灼过的接种环伸入菌种管，待冷却后，取菌液一环，立即移入培养基管中，在接近液面的管壁上轻轻研磨，然后将试管稍倾斜，并沾取少许液体调和，使菌液混合于培养基中

2)半固体培养基接种法

将烧灼过的接种针插入菌种管冷却后，沾取菌液少许，立即垂直插入半固体培养基的中心至接近于管底处，但不可直刺至管底，然后循原路退出(图5，B)。管口通过火焰，塞上棉塞，接种针烧灼灭菌后放下。

将上述已接种好的培养物， 37℃度恒温箱内培养，24小时后取出观察结果。

五、涂布接种法

将琼脂平皿半开盖倒置于培养箱内至无冷凝水，用无菌移液管吸取菌悬液0.1mL，滴加于培养基平板上，右手持无菌玻璃涂棒，左手拿培养皿，并用拇指将皿盖打开一缝，在火焰旁右手持玻璃涂棒与培养皿平板表面将菌液自平板中央均匀向四周涂布扩散，切忌用力过猛将菌液直接推向平板边缘或将培养基划破。接种后，将平板倒置于恒温箱中，培养观察。

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‘叁’ 实验室微生物检验需要注意哪些问题

微生物检验无菌操作的注意事项有很多细节，日常的微生物检验过程中要注意无菌操作，除了要在洁净台和操作器皿上的消毒，还需要注意人员卫生和环境的卫生。

【操作技巧】

进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。

【培养前准备】

在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。

【火焰消毒】

在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。

【洗手和着装】

原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75%酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。

【操作台消毒】

体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用).紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

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‘肆’ 微生物实验，无菌操作，斜面接种操作中，小试管口在哪些时候、哪些情况下

首先，接种环是要完全灼烧灭菌的。我们一般做接种挑取菌落的操作，是在打开试管塞时，让试管塞和试管口过过火焰，不像接种环烧得那么仔细。然后，挑取时，把接种环靠在试管壁上冷却之后，保持试管口在无菌区，挑取目的菌。挑取结束，再次将试管塞和试管口过火灼烧，之后盖上试管塞。斜面接种时，没有需要灼烧的仪器，但是，要保持接种过程在无菌区内。并且，操作时间越短，暴露在空气中的时间越短，污染几率越小。这里，考虑到要缩短暴露在空气中的时间，所以，有的老师不会刻意去烧试管。所谓无菌区也只是相对而言的。。。

你说的两种做法其实都可行，只要结果是不染菌的，就是没错的。但是如果是笔考答题，硬要有个对错的话，还是灼烧试管的做法最妥当。

‘伍’ 微生物检验的标本采集和运送原则

微生物检验的标本采集和运送原则

正确的标本采集和及时送检是保证细菌学检验质量的关键 !其目的是要捕捉到与感染相关的病原菌并保持其活性，同时尽可能的减少其它与感染无关细菌的干扰。下面是我为大家带来的关于微生物检验的标本采集和运送原则的知识，欢迎阅读。

采样时机

抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样

采样方法

采集无菌部位的标本应严格无菌操作，非无菌部位尽量减少正常菌群的污染，采样量足。

采样容器

专用的无菌，防渗漏，有盖，无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。

送检

尽快送检，一般不超过2小时。

若不能及时送检可于4-8℃保存，但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。

当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。

微生物检查的标本采集和运送原则

1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。

2.尽量在抗菌药物使用前，或停药3至5天后采集标本，如不能停用抗菌药物，应于下次抗菌药物应用前采集。应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。

3.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。

4.采样时应严格执行无菌操作，将污染可能降至最低。

5.收集真正感染的病灶处的`标本，且避免邻近区域常居菌群的污染。

6.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理，防止渗漏，但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。

7.采样后应立即送检，最好在2h内。如不能及时送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但不超过24小时。对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。

8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本，应使用专用的纤维拭子。

9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)

10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。涂片检查最好和细菌培养同时做!

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