如何进行生物碱的沉淀反应

A. 能使生物碱发生沉淀反应的溶液性质

能使生物碱发生沉淀反应的溶液主要显酸性，如鞣酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸等，能使各类生物碱发生沉淀反应的的化学试剂叫做生物碱沉淀试剂，或直接称为生物碱试剂。
实际上生物碱大部分不溶于水或难溶于水，但生物碱的盐类却大多溶于水，只有少部分的生物碱盐不溶于水，生物碱沉淀试剂与各类生物碱发生反应所生成的盐就是少数不溶于水的盐。
如麻黄碱和伪麻黄碱多溶于水，他们的盐也多溶于水，不能和大多数生物碱沉淀试剂发生反应。
生物碱沉淀试剂可以是有机酸也可以是无机酸，他们的最主要的特征就是显酸性并能与大多生物碱发生反学反应生成沉淀。

B. 生物碱的一般鉴定反应有哪几种

1、熔点鉴别法
熔点测定是一种常用初步鉴别药物的方法，在药典附录中都规定有详细的测定方法。所测熔点受结晶和测定条件影响大，有许多化合物的熔点相近，易混淆，所以，利用反应生成难溶于水的衍生物，测熔点，增加专属性，来帮助判断。生物碱类常用四苯硼钠和芳磺酸类与之反应，测熔点
2、旋光鉴别
手性碳原子旋光测定鉴别（旋光度）。
3、沉淀反应和显色反应
常用生物碱沉淀试剂：KI-I2，KBiI4，KhgI3和苦味酸（三硝基苯酚）试液，其他还有磷钨酸、磷钨酸钼、鞣酸、HgCl2等试液，通过沉淀颜色和结晶情况，用于鉴别或互相区别；
显色反应的显色试剂：甲醛硫酸试液，浓硝酸、浓硫酸等等，通过氧化，脱水，缩合等反应显色，用于鉴别，也可用于TLC的显色剂。
4、光谱分析
可用UV和IR等分析鉴别。
5、色谱分析
可用薄层色谱、纸色谱、气相色谱和HPLC法分析鉴别和测定。

C. 生物碱沉淀问题

氯化胆碱辨伪方法之四 雷氏盐重量法

一、掺六次甲基四胺 (乌洛托品)的鉴别试验

1、所需试剂

1.1、氢氧化钾

1.2、硫酸溶液(6+100)

1.3、钠氏试剂

1.4、氨制硝酸银溶液：称取1.0g硝酸银,置于100ml烧杯中,加20ml水溶解,在不断搅拌下

滴加氨水溶液，至棕色沉淀,几乎全部溶解后,过滤,滤液置于棕色试剂瓶中保存。

1.5、红色石蕊试纸：取滤纸条浸入石蕊指示液中，加极少量的盐酸使滤纸条变成红色，

取出阴处晾干备用。

2、鉴别方法：

2.1、水剂样品：称取0.5g实验样品，精确至0.01g，加10ml水，为试验溶液。

2.2、粉剂样品：称取2g实验样品，精确至0.1g，加20ml水溶解，过滤，弃去残渣，为试

验溶液。

在试验溶液中，加10ml硫酸溶液，于电炉上加热，煮沸，用沾有氨制硝酸银溶液或

钠氏试剂的试纸检验产生的蒸汽，观察试纸颜色，若试纸颜色变黑，则加入2g氢氧化钾

，继续加热产生的蒸汽能使润湿的红色石蕊试纸变蓝，证明有甲醛和氨产生，判定样品

中含有六次甲基四胺，此样品为不合格产品，不必做进一步实验。

二、雷氏盐重量法

1、方法提要

水剂样品用水稀释作为试液，粉剂样品中的氯化胆碱用水在加热的条件下振荡提取，定

容并过滤，取适量滤液试液；试液中氯化胆碱与雷氏盐(二氨基四硫代氰酸铬铵)反应，

形成晶状沉淀，用重量法测定氯化胆碱含量。

反应方程式如下：

2、试剂

2.1、盐酸溶液：1+4；

2.2、雷氏盐(二氨基四硫代氰 酸铬铵)甲醇溶液20g/l；

称取2g雷氏盐，溶于100ml甲醇，过滤该溶液配成48h后不能使用。

2.3、甲基红－亚甲斟蓝混合指示液；甲基红1g/l，亚甲基蓝1g/l，按2＋1体积混合，乙

醇溶液；

2.4、氢氧化钠溶液：400g/l。

3、仪器

3.1、玻璃砂芯坩埚：滤板孔径（5～15）um；

3.2、电热干燥箱：可控制温度在（105±2）摄氏度；

4、水剂的测定
4.1、称取约0.7g实验室样品，精确至0.0002g，置于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度

，摇匀，移取该试验溶液10.0ml置于100ml高型烧杯中，加1滴甲基红－亚甲基蓝混合指

示液，用盐酸溶液调至紫红色（PH约5－6），不冰浴中冷却至5摄氏度，滴加15ml雷氏盐

甲醇溶液，不时搅拌反应30min，再静置陈化30min。将沉淀转移到预先已于（105±2）

摄氏度干燥至质量恒定的玻璃砂芯坩埚移入（105±2）摄氏度电热干燥箱内，干燥2h,取

出,置入干燥器内冷却至室温,称量（沉淀质量应在0.1g－0.2g,可适当调整称样量.)同时

进行空白试验。

4.2、粉剂的测定

称取在（105±2）摄氏度下干燥2h的实验室样品约1g,精确至0.0002g,置于250ml碘

量瓶中,加水70ml,摇匀,在约70摄氏度水浴上热15min,塞紧瓶塞,在电动振荡器振荡

10min，转移至250容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用干燥的滤纸和漏斗过滤，弃去

最初10ml滤液后，移取该滤液25.0ml，置于100ml高型烧杯中，加3ml氢氧化钠溶液，盖

上表面皿，在电炉上加热微沸5min。加2滴甲基红－亚甲基蓝混合指示液，以下按4.1规

定的方法进行。

5、结果计算

氯化胆碱的质量分数W2，数值以%表示，按下式计算

W 2 ＝〔（ m 2 -m 1 )/m〕×10×0.33045×100

式中：m 2 －沉淀质量的数值，单位为克（ g）;

m 1 －空白试验沉淀质量的数值，单位为克（ g）;

m－试料质量的数值，单位为克(g）;

0.33045－氯化胆碱相对分子质量与雷氏盐－氯化胆碱沉淀产物相对分子质量的比值；

10－实验室样品溶液的稀释倍数。

取两次平行测定的结果的算术平均值为测定结0。水剂两次平行测定结果的绝对值不大于

0.5%，粉剂两次平行测定结果的绝对值不大于0.8%。

理论上无法配制硫酸银标准溶液。

氯化钡溶液配置你找中华人民共和国化工标准吧，那上面比较全，太多了，不好复制

D. 如何进行生物碱的分离

一、生物碱的提取：
1.水或酸水提取法
（1）生物碱在植物体内都以盐的形式存在，常以无机酸水提取。使生物碱的大分子有机酸盐变为小分子无机酸盐，增大在水中的溶解度，且方法比较简便。
（2）常用0.1%～l%的硫酸、盐酸或醋酸、酒石酸溶液作为提取溶剂，采用浸渍法或渗漉法提取。
（3）主要缺点是提取液体积较大，浓缩困难，且水溶性杂质多。故用酸水提取后，一般可采用下列纯化和富集生物碱的方法：
1）阳离子树脂交换法
生物碱盐在水中可解离出生物碱阳离子，能和阳离子交换树脂发生离子交换反应，被交换到树脂上。交换完全后，用中性水或乙醇洗除柱中的杂质。最后，再用适当的方法（酸水或酸性乙醇）将生物碱从树脂上洗脱下来。
2）萃取法
将酸水提取液碱化，生物碱游离后，如沉淀，过滤即得；如不沉淀，以适当亲脂性有机溶剂萃取，回收溶剂，即得总生物碱。
2.醇类溶剂提取法
（1）游离生物碱或其盐均可溶于甲醇、乙醇，可用醇回流或渗漉、浸渍等方法提取。
（2）优点：适应性广，不同碱性的生物碱和盐均可用，提取出来的水溶性杂质较少。缺点：脂溶性杂质多。
（3）还可配合酸水-碱化-萃取法处理去除脂溶性杂质。
具体方法是醇提液回收醇后加稀酸水搅拌，滤过，滤液调碱性后以亲脂性有机溶剂萃取，回收溶剂即得总生物碱。
3.亲脂性有机溶剂提取法
（1）大多数游离生物碱都是亲脂性的，故可用氯仿、苯、乙醚等提取游离生物碱。可采用浸渍、回流或连续回流法提取。
（2）但一般要将药材用少量碱水湿润后提取，以便使生物碱游离，也可增加溶剂对植物细胞的穿透力。
（3）挥发性生物碱如麻黄碱可用水蒸气蒸馏法提取。可升华的生物碱如咖啡碱可用升华法提取。
二、生物碱的分离：
1.利用碱性差异进行分离
（1）总碱中各生物碱的碱性不同，可用pH梯度萃取法进行分离。
（2）将总生物碱溶于氯仿等亲脂性有机溶剂，以不同酸性缓冲液依pH由高至低依次萃取，生物碱可按碱性由强至弱先后成盐依次被萃取出而分离，分别碱化后以有机溶剂萃取即可。
（3）将总生物碱溶于酸水，逐步加碱使pH值由低至高，每调一次pH值，即用氯仿等有机溶剂萃取，则各单体生物碱依碱性由弱至强先后成盐依次被萃取出而分离。
2.利用溶解度差异进行分离
（1）游离生物碱：如苦参中苦参碱和氧化苦参碱的分离，可利用氧化苦参碱极性稍大难溶于乙醚，苦参碱可溶于乙醚的性质，将苦参总碱溶于氯仿，再加入10倍量以上乙醚，氧化苦参碱即可析出沉淀。汉防己中汉防己乙素极性大于甲素，故在冷苯中的溶解度小于甲素，借此可用冷苯法将两者分离。
（2）生物碱盐：不同的生物碱与不同酸生成的盐是溶解度也不同：如麻黄中分离麻黄碱、伪麻黄碱，即利用二者草酸盐的水溶性不同，提取后经处理得到的甲苯溶液，经草酸溶液萃取后浓缩，草酸麻黄碱溶解度小而析出结晶，草酸伪麻黄碱溶解度大而留在母液中。
3.利用特殊官能团进行分离
（1）酚性或含羧基生物碱在碱性条件下成盐溶于水，可与一般生物碱分离。
（2）内酯或内酰胺结构的生物碱可在碱性水液中加热开环生成溶于水的羧酸盐而与其他生物碱分离，在酸性下又环合成原生物碱而沉淀。
4.利用色谱法进行分离
（1）吸附柱色谱：常用氧化铝或硅胶作为吸附剂，有时也用纤维素、聚酰胺等。
（2）分配柱色谱：对某些结构特别相近的生物碱，可采用分配色谱法。
（3）其他：高效液相色谱、制备性薄层色谱、干柱色谱、中压或低压柱色谱等也常用于分离生物碱。

E. 沉淀反应鉴别生物碱如何排除假阳性干扰

利用沉淀反应鉴别生物碱时，应注意假阴性和假阳性反应。仲胺一般不与生物碱沉淀试剂反应。如麻黄碱。水溶液中如有蛋白质、多肽、鞣质亦可与此类试剂产生阳性反应，故在被检测液中除掉这些成分。除掉的方法是将酸水提取液碱化，以氯仿萃取，分取氯仿层，再用酸水萃取氯仿层，此酸水层除去了上述水溶性干扰物质，可作为沉淀反应用溶剂。此外，对生物碱的定性鉴别时，应使用三种以上试剂分别进行反应，均阳性或者阴性方有可信性。

F. 用生物碱沉淀反应检查生物碱时，须有什么条件结果如何判断

大多数生物碱在酸水或稀醇中能与某些试剂反应生成难溶于水的复盐或分子络合物，这些试剂称为生物碱沉淀试剂。

常用的生物碱沉淀试剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸类等。常见的生物碱沉淀试剂有碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等。

生物碱沉淀反应的条件：

1、反应环境：生物碱沉淀的反应一般在稀酸水溶液中进行。

2、净化处理：共存的蛋白质、多肽、鞣质等成分，这些物质也能与生物碱沉淀试剂发生沉淀的反应。为了避免其干扰，可将酸水液经碱化后用氯仿萃取，除去水溶性干扰成分，然后用酸水从氯仿中萃取出生物碱，以此酸水液进行沉淀反应。

生物碱沉淀反应阳性结果的判断：

1、阳性结果判断：一般需选用三种以上的沉淀试剂进行反应，如果均有生物碱的沉淀反应，可判断为阳性结果。

2、需要注意的问题：少数生物碱不能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应，如麻黄碱、咖啡碱与多数生物碱沉淀试剂不能发生沉淀反应。中药中有些非生物碱类物质也能与生物碱沉淀试剂产生沉淀的应，如蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等。

(6)如何进行生物碱的沉淀反应扩展阅读：

生物碱均为含氮的有机化合物，总有些相似的性质，因为在其生物合成的途径中氨基酸是起始物，主要有鸟氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、色氨酸等，主要经历两种反应类类型：环合反应和碳——氮键的裂解，所以总有些性质相似。

生物碱具环状结构，难溶于水，与酸可以形成盐，有一定的旋光性和吸收光谱，大多有苦味。呈无色结晶状，少数为液体。生物碱有几千种，由不同的氨基酸或其直接衍生物合成而来，是次级代谢物之一，对生物机体有毒性或强烈的生理作用。

在常压时绝大多数生物碱均无挥发性。直接加热先熔融，继被分解；也可能熔融而同时分解。只有在高度真空下才能因加热而有升华现象。但也有些例外，如麻黄碱，在常压下也有挥发性；咖啡因在常压时加热至180℃以上，即升华而不分解。

G. 大多生物碱与生物碱沉淀试剂反应是在什么条件下进行的

大多生物碱与生物碱沉淀试剂反应是在酸性水溶液条件下进行的。

H. 何谓生物碱的沉淀反应怎样通过沉淀反应鉴定生物碱

大多数生物碱在酸水或稀醇中能与某些试剂反应生成难溶于水的复盐或分子络合物，这些试剂称为生物碱沉淀试剂。
常用的生物碱沉淀试剂
碘化物复盐、重金属盐、大分子酸类等。常见的生物碱沉淀试剂有碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等。

I. 如何进行生物碱的初步分离

生物碱在植物体内都以盐的形式存在，常以无机酸水提取。使生物碱的大分子有机酸盐变为小分子无机酸盐，增大在水中的溶解度，且方法比较简便。
（1）常用0.1%～1%的硫酸、盐酸或醋酸、酒石酸溶液作为提取溶剂，采用浸渍法或渗漉法提取。
（2）主要缺点是提取液体积较大，浓缩困难，且水溶性杂质多。故用酸水提取后，一般可采用下列纯化和富集生物碱的方法：
1）阳离子树脂交换法
生物碱盐在水中可解离出生物碱阳离子，能和阳离子交换树脂发生离子交换反应，被交换到树脂上。交换完全后，用中性水或乙醇洗除柱中的杂质。最后，再用适当的方法（酸水或酸性乙醇）将生物碱从树脂上洗脱下来。
2）萃取法
将酸水提取液碱化，生物碱游离后，如沉淀，过滤即得；如不沉淀，以适当亲脂性有机溶剂萃取，回收溶剂，即得总生物碱。

J. 生物碱沉淀反应 凉皮沉淀后需要放碱吗

1.性状：大多数生物碱为结晶，极少数分子量较小的呈液态如烟碱、槟榔碱。个别小分子生物碱，如麻黄碱，具有挥发性。少数分子中有较长共轭体系及助色团的生物碱有颜色，如小檗碱等均呈黄色。