⑴ 如何对微生物菌种进行活化
有同学已经说的很专业了,我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。如果你是用冻存管保存的菌株进行活化,取出2颗小珠放在适宜的固体培养基上,合上盖让小珠在平皿上滚动,适宜条件培养就可以了。长出一个菌落,你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种,准备适宜的液体培养基,少少一点点粉末接种就可以了,根据此菌种一般液体培养所需时间,大概在36-48h,你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时(沉淀者也可能为原本死亡的细菌),取100微升液体涂抹在固体培养基上。
一般的话,复苏的菌种需要重复几次复壮。
⑵ 怎样将冻干粉的大肠杆菌复苏
配好LB培养基,常规灭菌,无菌操作把冻干粉倒进去,37度摇床过夜,第二天去看就复苏好了- -LB培养基1L水加10g peptone,10g NaCl,5g Yeast Extract.用多少培养基看你心情,不过一般要转接一次确认复苏成功.复苏完了赶快想办法把菌给保上,甘油斜面随便你,有条件自己也能做冻干保
⑶ 冻干粉怎么做微生物检测
得看是水针剂使用的还是口服的,或者外用的。
如果水针剂需要进行无菌检查,把样品溶解后过滤,然后加入液体培养基,如果长菌即是不合格。
口服的溶剂后加入固体TSA和SDA分别培养。33℃细菌25℃霉菌。控制菌做大肠杆菌和沙门。
如果外用,同微生物限度测试。
⑷ 菌种冻干国内有哪些机构可以做把握一些的,最好能全程参与的。
很多啊,省微生物研究所,各大高校的微生物实验室,很多生物发酵公司,都有菌种冻干设备。
你想全程参与的话,那就应该找离你近的。
你哪里的?
我们都在浙江微生物研究所做。
也在福建微生物研究所做过。
都是自己全程参与的。
其实是否可以参与,你可以和对方商谈的。
⑸ 我第一次微生物,刚买回来了菌种,但不知道如何复苏和保存,帮帮忙,谢谢
复苏就是挑一点在培养基上培养。保存一般4度冰箱里
⑹ 求关于微生物冻干菌株复苏的一些注意事项,尤其是弧菌
冻干菌株复苏注意事项:
将冻干菌种管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干,用75% 乙醇棉擦净,待干;
无菌操作打开包装;
用无菌吸管将菌种复苏液体培养基约0.3ml左右注入被启开的菌种瓶中并吹打,使瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液;
将上述菌悬液吸出,分别接种到非选择性固体斜面或平板如:血平板和菌种复苏培养基中,一般放置在37℃培养箱培养18~24h。对需要特殊培养条件的细菌,如需5%~10%二氧化碳或厌氧条件等,应分别于二氧化碳培养箱或厌氧培养箱中培养;
次日取出培养物,仔细观察菌苔(落)形态、有无杂菌生长、并进行涂片染色镜检,若无异常,转种1~2代后可使用;
如菌种未生长,应继续培养至72h;
如发现培养物生长不良或不纯,可用选择性培养基进行平板分离单个菌落后再传代。不同的细菌对冷冻干燥的抵抗能力不同,弧菌对冷冻干燥的抵抗能力相对较弱,在冷冻干燥过程中菌体细胞容易受伤。因此复苏时应根据其生长特性,选用碱性蛋白胨水(霍乱弧菌)或3%氯化钠碱性蛋白胨水(副溶血性弧菌、创伤弧菌)为复苏培养基,待菌体细胞修复后再接种于适合弧菌生长的非选择性培养基上培养。
⑺ 如何对微生物菌种进行活化
菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境
要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括:定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
对于不同的保存方式活化的方式也不同:
1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;
3 沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;
4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
总结一下菌种活化需要以下几个步骤:
第一配置菌种适宜生长的培养基
第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻
第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮
第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤2-3次,从而得到生长良好的菌落
经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的
希望对你有帮助!
⑻ 菌种冷冻后如何复苏
菌株的复苏
1、 从冰箱取出保存管。不要将保存管解冻。如果同时取出几支管,可以用冰袋来防止保存管的解冻。
2、 打开盖子,用无菌的针插入玻璃珠的孔挑出或用镊子取出玻璃珠
3、 取出的玻璃珠,可以投入一专用的液体培养基,或者立即在一专用的固体培养基上滚动。培养基置合适的条件培养
4、 遵循废物处理手册安全地处理该玻璃珠
5、 保存管重新封好,尽快将它置冰箱保存