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㈠ 有哪些网站类似于多圈课堂讲实验技术例如pcr

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㈡ miRNA的生物合成过程哪位了解啊像生物秀论坛这样的还有哪些啊

RNAi是一种由双链RNA介导的序列特异性基因沉默现象。RNAi行使功能的机制与miRNA相同，都是一种在进化上十分保守的RNA-蛋白质机制。miRNA是由21至23个核苷酸组成的内源非编码RNA。随着RNA为基础的治疗方法学的不断发展与成熟，对于miRNA通路及转录后基因沉默机制的研究便显得尤为重要。已有研究发现，miRNA在人体发育和疾病发生过程中扮演着关键性的角色，并且基因表达调控的复杂程度超出人们预想。本综述将涉及miRNA成熟机制方面的进展，miRNA的作用方式及其在RNA为基础的治疗中的应用。 人们最初在植物和真菌中观察到RNAi现象——某一基因的复制性拷贝可以抑制其本身及其来源基因的表达[1,2]。Andrew Fire和Craig Mello在对线虫的研究中发现，RNAi现象是由双链RNA介导的，这一发现为两位科学家赢得了诺贝尔奖[3]。之后，David Baulcombe又证实了植物中的RNAi效应的介导者是一种由21至25个核苷酸组成的RNA剪切产物[4]。人工合成与靶标序列完全互补的由21个核苷酸组成的RNA双链，将其导入哺乳动物细胞内便可以清晰观察到RNAi效应[5]，这些外源导入的双链RNA叫做siRNA。 由于上述RNA双链的剪切产物和内源性21至23个核苷酸长度的miRNA在结构上十分相似，于是研究人员针对其作进一步研究。结果他们发现miRNA同样具有基因沉默的功能[6~10]，并且siRNA在基因沉默过程中与miRNA具有相同的机制，不过miRNA与其靶序列只是部分互补。由此，人们开始采用RNAi作为基因敲除的实验技术，有关miRNA及miRNA诱导的基因沉默现象也开始成为研究热点。目前，我们已经知道miRNA在很多重要的细胞功能，如在细胞增殖、分化、肿瘤生成、免疫功能以及其它功能中发挥着关键性作用。至于有哪些重要的生物过程有miRNA的参与则不在本综述的讨论范围之内，有兴趣的读者可以参阅文献[11]。本文的重点将集中于有关miRNA成熟机制研究及miRNA介导基因沉默方面的最新进展。 (I) miRNA生物合成 截止到撰写本文时为止，研究人员已在人类基因组中发现并注释了500多种miRNA[12]。在基因组扫描和对发夹结构进行“系统发生性遮蔽(phylogenetic shadowing)”研究的基础上，研究人员预测人类基因组中至少存在1000种miRNA[13]。目前借助进一步发展的测序技术以及其它克隆技术的新进展，研究人员鉴别出越来越多的miRNA，而这恰恰证实了确实有超出我们预期的miRNA的存在[14,15]。大约有60%的miRNA位于基因间隔区(intergenic region)，其余40%则位于蛋白编码基因或其它转录元件的内含子上[16~18,]。很多intergenic miRNA成簇分布，这样的miRNA有可能是在共同的启动子调控下表达的，因为它们具有相似的表达谱[18]。与上述情况相反，内含子miRNA(intronic miRNA)则更可能是在其所在基因的启动子下表达的，因为大多数intronic miRNA的表达与寄主mRNA的表达相似[18]。不过，也有一些例外，这暗示我们有些intronic miRNA具有独立的启动子[19]。 接下来对intergenic miRNA的启动子进行阐述。大部分miRNA启动子需要募集RNA Pol II，且未显示出任何与蛋白编码基因不同的特性[20~23]。它们同样需要募集转录因子以进行时间及空间特异性的基因表达。miR-223就是其中一例，miR-223是一种单核细胞特异性miRNA，其启动子至少包含单核细胞特异性转录因子PU.1以及C/EBP功能性结合位点[24]。miR-146a则是由内毒素诱导而产生的miRNA，它的转录受自身启动子内NF-kB的结合位点调控[25]。另外，miR-375是β细胞特异性miRNA，它可反向调节胰岛素的分泌[26]，这种位于斑马鱼β细胞内的miRNA在胰腺发育中具有重要作用[27]。据推测其miRNA编码区的上游和下游均有β细胞特异性转录因子Pdx1[28]的结合位点。 miRNA通常由RNA Pol II转录,一般最初产物为大的具有帽子结构和多聚腺苷酸尾巴(AAAAA)的pri-miRNA[20,22]。这些pri-miRNA可长达几千个碱基。成熟miRNA序列通常仅位于构成发夹结构的其中一条链上(见图1A)。在哺乳动物细胞内，pri-miRNA在核内由“微处理器(microprocessor)”复合物进行处理，复合物由RNase III enzyme Drosha [29]、DGCR8 (DiGeorge critical region-8)及一个双链RNA结合蛋白[30,31,32]组成。Drosha从pri-miRNA发夹结构末端切下11个核苷酸，切割后的产物在3’端有两个碱基突出，在5’端为磷酸盐基团[29]。体外试验证实，microprocessor复合物可以从发夹结构上“量出”11个核苷酸，在单链RNA与发夹结构结合处将11个核苷酸组成的片段切下，切割后的65至75个核苷酸长度的茎环结构就叫做pre-miRNA(见图1C)。 研究人员构建DGCR8基因的敲除小鼠模型[33]。与Dicer敲除小鼠[34]一样，纯合型DGCR8基因敲除小鼠胚胎在第6.5天可观察到异常，并在第12天时胚胎出现死亡进而被机体重新吸收。这一结果表明DGCR8乃至miRNA在机体发育过程中起着关键性的作用。DGCR8敲除的胚胎干细胞与未经敲除的干细胞相比，其倍增时间显着增长，并且对体外分化刺激没有反应，提示miRNA很可能在细胞增殖与分化中具有重要作用。与Dicer敲除胚胎干细胞相似[35]，DGCR8敲除胚胎干细胞中缺失大部分成熟microRNA，这进一步证实DGCR8在大多数microRNA成熟过程中的重要作用。 (A) miRNA由基因组中某个基因座位转录生成具有5’端帽子结构和多聚腺苷酸尾巴的pri-miRNA。之后在Drosha/DGCR8作用下加工成为pre-miRNA，再经Exportin-5转运至细胞质。pre-miRNA经过Dicer的进一步剪切形成成熟miRNA，miRNA再与RISC以不完全互补的方式结合。(B) 相反，shRNA则自外源导入的DNA转录为类似pre-miRNA的分子，因此不需经过Drosha/DGCR8的加工。之后，与miRNA一样，shRNA经Exportin-5转运至细胞质，在细胞质内经Dicer切割去除环状结构，双链中的一条以完全互补形式与RISC结合。(C) 对于哺乳动物，siRNA则由人工转染进入细胞质，然后与RISC结合。进一步的详细信息请参见文章。 Mirtron(见文后小词典)是intronic microRNA中一个特别的类别，不需要经过microprocessor的剪切。Mirtron通过自身拼接反应形成pre-miRNA。通常经microprocessor的剪切而形成的pre-miRNA的末端是由剪接受体(splice acceptor)与供体位点(donor site)构成的。据此，从逻辑上讲，在mirtron的生物合成过程中，套索结构(lariat structure)的“解套”也是必需的[36,37]。研究者已经利用计算机鉴定出许多哺乳动物体内的mirtron，这些mirtron很明显是从果蝇和线虫体内的mirtron进化而来的[38]。与mirtron不同的是，即使寄主intronic的剪切因其自身剪切位点突变而受阻时，intronic miRNA仍然可以被有效加工，反过来讲，miRNA加工过程受抑也不会影响mRNA的剪切[39]。 Pre-miRNA借助RanGTP依赖性Exportin-5，从核内转运至胞质[40,41]。在细胞质内，pre-miRNA经Dicer剪切，成为成熟的、大约21至23个核苷酸长度的链，Dicer是一种RNase III家族的酶[42]。Dicer与dsRNA分子相结合形成的晶体结构显示，Dicer PAZ(Piwi-Argonaute-Zwille)结构域是与dsRNA分子的末端相结合的，据此可以得知，RNase III酶结构域位于距离RNA双链末端大约25个核苷酸处[43]。与Drosha相同，Dicer切割后所得的RNA片段都有3’端两个碱基的突出和5’端的磷酸基团[42,44]。由于Dicer剪切位点由之前的Drosha剪切位点决定，因此可以说Drosha通过间接的方式决定了成熟miRNA的最终序列。 有空的话可以去生物帮那里详细的了解，那里整合了技术文档、技术视频、行业新闻资讯等相关信息，比较专业。可以看下 www.bio1000.com/zt/rna/221892.html 应该可以详细的了解。

㈢ 生物 学习

生物秀（最全面，视频和资料下载等内容较好）
生物谷
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㈣ 如何提高扩增效率和PCR的特异性

引物

引物设计：引物长度适当，18-24mers，并保证序列独特性，以降低序列在非目的片段中存在的可能性，但长度大于24核苷的引物并不意味着有更高的特异性，较长的序列可能会与错误配对序列杂交，反而降低特异性，而且长序列比短序列杂交慢，影响产量； 引物浓度：引物的浓度会影响特异性。最佳的引物浓度一般在0.1到0.5μM。较高的引物浓度会导致非特异性产物扩增。 ---生物秀实验频道

Mg2+

较高的Mg2+浓度可以增加产量，但也会降低特异性。为了确定最佳浓度，从1mM到3mM，以0.5mM递增，进行最适Mg2+浓度测定

退火温度

Tm对于设定PCR退火温度是必需的。退火温度一般设定为比引物的Tm低5℃的温度。合理的退火温度为55-70℃。在理想状态下，退火温度应足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合 ---生物秀实验频道www.bbioo.com

巢式PCR

使用巢式引物进行连续多轮扩增，由于同两套引物都互补的靶序列很少，巢式PCR的使用降低了扩增多个靶位点的可能性，从而提高PCR反应的特异性和灵敏度

递减PCR

通过在PCR的前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性。循环设在比估算的Tm高大约5℃的退火温度下开始，然后每个循环降低1℃到2℃，直到退火温度低于Tm 5℃。这样，特异性最高的目的模板会被优先扩增，并在随后的循环中继续扩增占据优势

热启动PCR

通过抑制一种基本成分延迟DNA合成，直到PCR 仪达到变性温度。最常用的是热启动DNA 聚合酶，常温时该酶活性被抑制，94-95℃加热数分钟后回复正常活力开始反应，这样可以避免起始循环温度下的非特异性扩增，大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。热启动PCR是除了好的引物设计之外，提高PCR特异性最重要的方法之一

PCR增强剂

包括甲酰胺，DMSO，甘油，甜菜碱等，能构降低熔解温度，从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区。

㈤ 孟德尔是哪个国家的

孟德尔（GregorMendel，1822-1884），1822年7月22日出生于奥地利西里西亚附近的农民家庭。他从小爱好园艺，由于家境困难，没有读完大学，到布龙一所修道院当院士。1847年获得牧师职位。在朋友的资助下，于1850年到维也纳大学理学院深造。1853年夏天，他回到布龙修道院，担任时代学校的动植物学教师。他结合教学，从事植物的杂交实验工作，终于发现了遗传规律，并在1865年的布尔诺自然科学协会上，发表了他的研究成果，但却被埋没，直到20世纪初才重新被发现，从而确定了孟德尔在遗传学上的地位。 基本资料 姓名：孟德尔 生卒：1822年7月22日 星座：巨蟹座 出生地：奥地利 描述：孟德尔是现代遗传学之父，是这一门重要生物学科的奠基人。1865年发现遗传定率。 童年经历 孟德尔 孟德尔的父亲酷爱园艺，是果树栽培嫁接方面的行家，左邻右舍的农民经常来向他请教。约翰从小就在父亲影响下学会了干各种农活，并且对果树嫁接产生了浓厚的兴趣。 一次他问父亲：“爸爸，一枝小小的良种接穗，尽管全部养料都由劣种砧木供给，为什么仍能长成粗人的枝干和香甜的果实？” “孩子，我也不知道为什么！但事实的确如此。比养料力量更大是树木的本性，就是人们称为‘遗传’的那种性质吧！”父亲根据自己掌握的知识回答了约翰的问题。 小孟德尔默默地听着听着，陷入了沉思：“树木的本性”、“遗传”，那是怎么一回事呢？他不断地喃喃自语。 童年的嫁接经验和小学校里组织的生物活动，这些生物学的遗传现象在孟德尔幼小的心灵里扎下了深深的根基，这对他成为举世闻名、发现遗传规律的伟大的生物学家影响极大。 职业生涯 孟德尔 孟德尔出生于奥匈帝国西里西亚一个贫困的果农家庭，曾经常帮家里护理果树和帮学校养蜂，因而在这方面积累了大量的经验。为了供他读完高中，他的姐姐放弃了遗产，此后少年孟德尔为了钻研科学的同时不连累父母姊妹，也为了受到良好的教育而进了修道院，这也使他有机会在维也纳大学系统研习近代的自然科学。所有这些为他后来的发现打下了坚实的基础。 大学毕业以后，孟德尔就在当地教会办的一所中学教书，教的是自然科学。他能专心备课，认真教课，所以很受学生的欢迎。1843年，年方21岁的孟德尔进了修道院以后，曾在附近的高级中学任自然课教师，后来又到维也纳大学深造，受到相当系统和严格的科学教育和训练，为后来的科学实践打下了坚实的基础。孟德尔经过长期思索认识到，理解那些使遗传性状代代恒定的机制更为重要。 从维也纳大学回到布鲁恩不久，孟德尔就开始了长达8年的豌豆实验。孟德尔首先从许多种子商那里，弄来了34个品种的豌豆，从中挑选出22个品种用于实验。它们都具有某种可以相互区分的稳定性状，例如高茎或矮茎、圆料或皱科、灰色种皮或白色种皮等。 孟德尔通过人工培植这些豌豆，对不同代的豌豆的性状和数目进行细致入微的观察、计数和分析。运用这样的实验方法需要极大的耐心和严谨的态度。他酷爱自己的研究工作，经常向前来参观的客人指着豌豆十分自豪地说：“这些都是我的儿女！” 8个寒暑的辛勤劳作，孟德尔发现了生物遗传的基本规律，并得到了相应的数学关系式。人们分别称他的发现为“孟德尔第一定律”和“孟德尔第二定率”，它们揭示了生物遗传奥秘的基本规律。 孟德尔开始进行豌豆实验时，达尔文进化论刚刚问世。他仔细研读了达尔文的着作，从中吸收丰富的营养。保存至今的孟德尔遗物之中，就有好几本达尔文的着作，上面还留着孟德尔的手批，足见他对达尔文及其着作的关注。 起初，孟德尔豌豆实验并不是有意为探索遗传规律而进行的。他的初衷是希望获得优良品种，只是在试验的过程中，逐步把重点转向了探索遗传规律。除了豌豆以外，孟德尔还对其他植物作了大量的类似研究，其中包括玉米、紫罗兰和紫茉莉等，以期证明他发现的遗传规律对人多数植物都是适用的。 从生物的整体形式和行为中很难观察并发现遗传规律，而从个别性状中却容易观察，这也是科学界长期困惑的原因。孟德尔不仅考察生物的整体，更着眼于生物的个别性状，这是他与前辈生物学家的重要区别之一。孟德尔选择的实验材料也是非常科学的。因为豌豆属于具有稳定品种的自花授粉植物，容易栽种，容易逐一分离计数，这对于他发现遗传规律提供了有利的条件。 孟德尔清楚自己的发现所具有的划时代意义，但他还是慎重地重复实验了多年，以期更加臻于完善、1865年，孟德尔在布鲁恩科学协会的会议厅，将自己的研究成果分两次宣读。第一次，与会者礼貌而兴致勃勃地听完报告，孟德尔只简单地介绍??使听众如坠入云雾中。 第二次，孟德尔着重根据实验数据进行了深入的理论证明。可是，伟大的孟德尔思维和实验太超前了。尽管与会者绝大多数是布鲁恩自然科学协会的会员，中既有化学家、地质学家和生物学家，也有生物学专业的植物学家、藻类学家。然而，听众对连篇累续的数字和繁复枯燥的沦证毫无兴趣。他们实在跟不孟德尔的思维。孟德尔用心血浇灌的豌豆所告诉他的秘密，时人不能与之共识，一直被埋没了35年之久！ 孟德尔晚年曾经充满信心地对他的好友，布鲁恩高等技术学院大地测量学教授尼耶塞尔说：“看吧，我的时代来到了。”这句话成为伟大的预言。直到孟德尔逝世16年后，豌豆实验论文正式出版后34年，他从事豌豆试验后43年，预言才变成现实。 孟德尔实验 实验图 孟德尔于1856年至1864年选用具有明显差异的7对相对性状的豌豆品种作为亲本，分别进行杂交，并按照杂交后代的系谱进行详细的记载，采用统计学的方法、计算杂种后代表现相对性状的株数最后分析了它们的比例关系。这7对性状都很稳定，例如：开红的豌豆品种，自花受粉后，其后代只开红花；圆粒豌豆品种的后代多结圆粒种子，它们是： 1、种子形状--圆粒和皱粒； 2、子叶颜色--黄色和绿色； 3、花色（种皮色）--红色和白色（种皮黑褐色和白色）； 4、花着生位置--叶腋和顶端； 5、未成熟豆荚色--绿色和黄色； 6、茎蔓（植株）高度--高的和矮的； 7、豆荚状--饱满的和不饱满的。 在孟德尔所做的红花×白花的杂交组合试验中，经统计开红花和开白花两者的比例接近于3∶1，而且其他对相对性状的杂交试验也都获得同样的试验结果。子一代中所有植株的性状表现都一致，都只表现一个亲本的性状。而另一个亲本的性状隐藏来表现。在这一对相对性状中表现出来的，称为显性性状。未表现出来的，称为隐性性状；子二代中植株在性状表现上，一部分植株表现一个亲本的性状，其余植株表现另一个亲本的相对性状，即显性性状和隐性性状都同时出现了，这就是性状分离现象。 孟德尔学说 孟德尔 1866年，孟德尔在《布尔诺自然史学会杂志》、《》上发表了他的实验结果，揭露了生物遗传地粒子性，并阐明其遗传规律，但其工作很快就被人们置之脑后，知道1900年才被重新认识。孟德尔学说的主要内容为： 1、分离定律： 基因作为独特的独立单位而代代相传。细胞中有成对的基本遗传单位，在杂种的生殖细胞中，成对的遗传单位一个来自雄性亲本，一个来自雌性亲本，形成配子时这些遗传单位彼此分离。按照现代的术语，即是说：基因对中的两个基因(等位基因)分别位于成对的两条同源染色体上，在亲本生物体产生性细胞过程中，上述等位基因分离，性细胞的一半具有某种形式的基因，另一半具有另一种形式的基因。由这些性细胞形成的后代可反映出这种比率。 2、独立分配定律： 在一对染色体上的基因对中的等位基因能够独立遗传，与其他染色体对基因对中的等位基因无关；并且含不同对基因组合的性细胞能够同另一个亲本的性细胞进行随机的融合。孟德尔已经认识任何一个相当于人体中的精细胞或卵细胞的生殖细胞都仅仅包含一个偶然代代相传的基因。 孟德尔的这两条遗传基本定律就是新遗传学的起点，孟德尔也因此被后人称为现代遗传学的奠基人。 被称为“怪人” 孟德尔 1857年，捷克第二大城市布尔诺南郊的农民们发现，布尔诺修道院里来了个奇怪的修道士。 这个“没事找事”的怪人在修道院后面开垦出一块豌豆田，终日用木棍、树枝和绳子把四处蔓延的豌豆苗支撑起来，让它们保持“直立的姿势”，他甚至还小心翼翼地驱赶传播花粉的蝴蝶和甲虫。 这个怪人就是孟德尔。 在其他修道士眼中，孟德尔的样子是使人过目不忘的：“头大，稍胖，戴着大礼帽，短裤外套着长靴，走起路晃晃荡荡，却有着透过金边眼镜凝视世界的眼神。” 孟德尔出身于贫寒农家，很喜欢自然科学，对宗教和神学并无兴趣。为了摆脱饥寒交迫的生活，他不得不违心进入修道院，成为一名修道士。 当时的欧洲，人们热衷于通过植物杂交实验了解生物遗传和变异的奥秘，而研究遗传和变异首先要选择合适的实验材料，孟德尔选择了豌豆。1857年夏天，孟德尔开始用34粒豌豆种子进行他的工作，开始了被人称为“毫无意义的举动”的一系列实验，并持续了8年时间。 研究成果被埋没 孟德尔 1865年2月8日的傍晚，天气晴朗，孟德尔带着历时8年累积的实验报告，登上了奥地利当时的小镇布鲁恩（现为捷克的布尔诺）高等实业学校的讲台，40多个听众来听他的讲演，绝大多数是布鲁恩自然科学研究协会的会员———知名的化学家、地质学家、生物学专业的植物学家和藻类学家。 这次讲演，几乎没有人明白孟德尔到底在说些什么，当时的日志上这样记载：“对于孟德尔的讲演，没有任何人提问题，也没有进行任何讨论。”他们不能明白生物和数学怎么可以扯到一块，他们也完全不能理解这位修道士浪费了八年时间究竟都在做些什么。 孟德尔将自己的讲演稿取名为《植物杂交的试验》。第二年，孟德尔的论文按惯例登在了学会的《布鲁恩自然科学研究学会学报》上，并随着学报被送往欧洲一百多个大学和图书馆。但是有谁会去注意一个地方组织的学报呢？孟德尔自己是知道这个发现的重要性的，他在收到论文的单行本（共四十份）后，就分寄给世界各地着名的植物学家，试图引起科学界的注意。但是有哪一个植物学家会去理睬一位业余研究者的成果呢？ 在绝望中孟德尔给当时最着名的植物学家拿戈里(KarlvonNageli)写了许多封信，希望能够引起这位大植物学家的重视。过了很久，他终于收到了拿戈里的回信。拿戈里告诉孟德尔，他的实验还仅仅是个开端，不能轻易得出结论。他建议孟德尔改用山柳菊（拿戈里喜用的研究材料）重复这些实验。在敷衍了事地回了这封信后，拿戈里就把孟德尔置之脑后。差不多二十年后，他出了一本有关植物遗传的大部头学术着作，总结了他所知道的有关植物遗传的所有实验，唯独没有一个字提到孟德尔。 孟德尔还将其中的一份寄给了达尔文，人们后来在达尔文的藏书中发现，这本小册子连页边都没有割开。 现代遗传学的奠基者 孟德尔 1822年，即拿破仑死后第二年，孟德尔生于当时奥地利西里西亚德语区一个贫穷的农民家庭。他幼年名叫约翰·孟德尔，是家中五个孩子中惟一的男孩。他的故乡素有“多瑙河之花”的美称，村里人都爱好园艺。一个叫施赖伯的人曾在他的故乡开办果树训练班，指导当地居民培植和嫁接不同的植物品种。孟德尔的超群智力给他留下深刻印象。他说服孟德尔的父母送这个男孩进入更好的学校继续其学业。1833年，孟德尔进入一所中学。1840年，考入一所哲学学院。在大学中，他几乎身无分文，不得不经常为求学的资金而奔波。1843年，大学毕业后，21岁的他进入了修道院，不是由于受到上帝的感召，而是由于他感到“被迫走上生活的第一站，而这样便能解除他为生存而做的艰苦斗争”。因此，对于孟德尔来说，“环境决定了他职业的选择”。 1849年他获得一个担任中学教师的机会。但在1850年的教师资格考试中，他的成绩很惨。为了“起码能胜任一个初级学校教师的工作”，他所在的修道院根据一项教育令把他派到维也纳大学，希望他能得到一张正式的教师文凭。 就这样，孟德尔被准许在维也纳大学学习，度过了从1851到1853年的四个学期。在此期间，他学习了物理学、化学、动物学、昆虫学、植物学、古生物学和数学。同时，他还受到杰出科学家们的影响，如多普勒，孟德尔为他当物理学演示助手；又如依汀豪生，他是一位数学家和物理学家；还有恩格尔，他是细胞理论发展中的一位重要人物，但是由于否定植物物种的稳定性而受到教士们的攻击。孟德尔也许从他那里学到了把细胞看做为动植物有机体结构的观点。恩格尔是孟德尔有史以来遇到的最好的生物学家。他对遗传的看法具体而实际：遗传规律不是用精神本质决定的，也不是由生命力决定的，而是通过真实的事实来决定的。孟德尔在这方面也受到了恩格尔的很大影响。 1953年，已经31岁的孟德尔重新回到布尔诺的修道院。同时有机会在布尔诺一所刚创建的技术学校教课。大约从这时起，孟德尔决定把他的一生贡献给生物学方面的具体实验。 1854年夏天，孟德尔开始用三十四个豌豆株系进行他的工作。1855年，继续试验它们在传递特性性状时的不变性。1856年，他开始了着名的一系列试验，八年试验的结果是产生了那篇在1865年“布隆自然历史学会”上宣读的论文。这篇论文1866年发表于该会的会议录上。就是这篇当时被完全忽视而日后被发掘出来的论文奠定了孟德尔遗传学史上的地位。 1868年，孟德尔被选为修道院院长，他的管理工作剥夺了他从事科学研究的时间和精力。在孟德尔的同代人眼中，这个有教养的老修士似乎是在用一些愚蠢的、但却也无害的方法来消磨时间。1884年6月6日，孟德尔死于慢性肾脏疾病。他的后继者烧毁了他的私人文件。因此我们几乎没有关于孟德尔的原始资料或灵感的直接知识。 下面，我们就转到这位被看做有些古怪的人所从事的古怪研究上来吧。 孟德尔先是收集了34个各自具有易于识别的形态特性的豌豆品系。为了保证这些品系的独有特性是稳定不变的（即是说每个品系自交繁殖的后代具有一致的特性），他把这些品系先种植了两年，最终挑选出22个有明显差异的纯种豌豆植株品系。 孟德尔的豌豆田 不同的豌豆 在挑选出纯种豌豆后，孟德尔用它们进行杂交，例如把长得高的同长得矮的杂交，把豆粒圆的同皱的杂交，把结白豌豆的植株同结灰褐色豌豆的植株杂交，把沿豌豆藤从下到上开花的植株同只是顶端开花的植株杂交。他的实验目的就是通过这种杂交，“观察每一对性状的变化情况，推导出控制这些性状在杂交后代中逐代出现的规律”。 八年时间中，孟德尔一共研究了28000株植物，其中有12835株是经过“仔细修饰”的。通过这些实验，孟德尔获得了大量的实验数据。 他发现如果把仅有一对性状的品系进行杂交，第一代杂种（F1）只出现亲本一方的性状。比如光滑的圆豆粒与皱的粗糙豆粒杂交，结果得到的完全是光滑的圆豆粒。如果让F1代自交，那么在得到的杂交第二代（F2）中就出现了两种情况：既有光滑的圆豆粒，也有粗糙的皱豆粒。他的一次实验结果是：5474个光滑种子，1850个粗糙种子。两者的比例约为2.96:1。这只是孟德尔所研究的豌豆一种性状的实验结果。孟德尔一共研究了七种性状。孟德尔关于F2代的试验结果如下表： 可以发现，所有的实验都有相似的结果。在F1代只出现一种性状，而在F2代中亲本双方的性状都将出现，而且在F1代中出现过的性状与F1代中未出现过的性状之比例接近3：1。 孟德尔的实验并没有只停留在F2代上，某些实验继续了五代或六代。但在所有实验中，杂交种都产生3：1的比例。正是通过这些试验，孟德尔创立了着名的3：1比例。但如何解释这样的实验结果呢？ 孟德尔引入了孟德尔因子。他假定豌豆的每个性状都有一对因子所控制。如对于纯种的光滑圆豌豆，可以假定它由一对RR因子决定；对于纯种的粗糙皱豌豆，假定它由一对rr因子决定。对于杂交一代来说，是从亲本中各获取一个因子，于是得到Rr。由于性状只是出现圆豆粒，因此就把这种F1中出现的性状称为显性性状，而F1中未出现的性状称为隐性性状。相应的，决定显性性状的因子称为显性因子，而决定隐性性状的因子称为隐性因子。而对于具有Rr因子的F1代而言，进行自交的结果就会出现四种结果：RR、Rr、Rr、rr。或者简单记作：RR＋2Rr＋rr。结合上显性、隐性，显然恰好会出现显性性状与隐性性状之比为3：1的结果。并且“杂种的后代，代代都发生分离，比例为2（杂）：1（稳定类型）：1（稳足类型）…” 孟德尔豌豆实验--生物秀 于是，在孟德尔因子的假定下，实验结果得到了完美的解释。 以上只是单变化因子的实验。如果是多变化因子又如何呢？孟德尔对此也做了一些实验与研究。他做过两个双变化因子杂交和一个三变化因子杂交试验。结果与他根据上述理论的预测非常吻合。各种实验证明了他的理论假定是正确的。他已经解开了遗传之谜，得到了遗传的重要规律。对孟德尔的发现，后人归纳为两条定律：（1）分离律：基因不融合，而是各自分开；如果双亲都是杂种，后代以3显性：1隐性的比例分离；（2）自由组合律：每对基因自由组合或分离，而不受其他基因的影响。 孟德尔的上述杰出研究成果都体现在他1865年的论文与1866年布隆会议录上。这一会议录曾寄给约120个图书馆，此外40本此论文的单行本也曾发给其他的植物学家们。然而，孟德尔的非凡工作除了被德国植物学家福克等个别人提到外，可以说在当时几乎没有产生任何反响，孟德尔的研究成果被完全忽视了。作为一个插曲，达尔文让提到孟德尔工作的福克的文章在眼皮下滑过：达尔文曾看过福克文章的目录，但没有去注意正文。如果达尔文能认真看一下正文，那结果会如何呢？我们无意做更多的历史遐想了。 这篇伟大的论文在被忽视了30多年后，于二十世纪初被三位植物学家各自独立地发现。于是，这位生前默默无闻的先驱获得了重新评价，他的论文也被公认为开辟了现代遗传学。1965年，英国一位进化论专家在庆祝孟德尔上述论文发表100周年的讲话中，说“一门科学完全诞生于一个人的头脑之中，这是惟一的一个例子”。在同年的另一次演讲中，他更明确地指出：“准确地说出一门科学分支诞生的时间和地点的事是稀奇的，遗传学是个例外，它的诞生归功于一个人：孟德尔。是他于1865年的2月8日和3月8日在布尔诺阐述了遗传学的基本规律。” 逝世 在1868年，孟德尔被选为修道院院长，从此他把精力逐渐转移到修道院工作上，最终完全放弃了科学研究。这一年他才四十六岁，当修道院院长显得还太年轻了。在当时，修道院院长死后，政府就会派人来查账并课以重税。正是由于这个原因，修道院倾向于选举较年轻的修道士当院长。1874年，奥地利政府颁布了一项严苛的税法。孟德尔认为新税法不公平，拒绝交税，花了大笔的钱与政府打一场旷日持久的官司。其它修道院的院长纷纷被政府收买，屈服了，只有孟德尔坚拒政府的威胁利诱，决心抵抗到底。结果可想而知。法庭判决孟德尔败诉，修道院的资金被没收了。修道院的修道士们也背弃了孟德尔，向政府妥协。孟德尔的身心完全垮了，得了严重的心脏病。 1884年1月6日这天，他精神看起来“似乎不错”，护士问候了他一句：“你的气色真好。”五分钟后，前去看望孟德尔的修女发现，他靠在沙发上已经停止了呼吸。 成果被认可 孟德尔的全身像 17年后的1900年，荷兰生物学家德弗里斯通过与孟德尔类似的实验，发现了遗传学的规律。他去图书馆查阅文献资料，发现早在35年前，孟德尔的《植物杂交的试验》已经论证了植物遗传规律。 与此同时，德国生物学家科伦斯和奥地利生物学家切尔马克也不约而同地发现了这一点。三位欧洲知名的生物学家在各自发表的论文中都提到了孟德尔的学说，并声明自己只是证实了孟德尔的观点。 孟德尔的名字立刻传遍了欧洲，人们争相在自己的试验田里种下豌豆，检验孟德尔的遗传学法则。 1965年，英国一位进化论学者在庆祝孟德尔论文发表100周年的讲话中说：“遗传学的诞生归功于一个人———孟德尔，是他于1865年的2月8日在布尔诺阐述了遗传学的基本规律。一门科学完全诞生于一个人的头脑之中，这是惟一的一个例子。” 晚年的孟德尔曾经对友人G·尼尔森说过：“等着瞧吧，我的时代总有一天会来临。” 随着20世纪雄鸡的第一声啼鸣，来自三个国家的三位学者同时独立地“重新发现”孟德尔遗传定律。1900年，成为遗传学史乃至生物科学史上划时代的一年。从此，遗传学进人了孟德尔时代。 个人影响 孟德尔 随着科学家破译了遗传密码，人们对遗传机制有了更深刻的认识。现在，人们已经开始向控制遗传机制、防治遗传疾病、合成生命等更大的造福于人类的工作方向前进。然而，所有这一切都与圣托马斯修道院那个献身于科学的修道士的名字相连。 今天，通过摩尔根、艾弗里、赫尔希和沃森等数代科学家的研究，已经使生物遗传机制——这个使孟德尔魂牵梦绕的问题建立在遗传物质DNA的基础之上。

㈥ 什么是高通量测序技术，哪位生物秀前辈能否介绍一下

高通量测序可以帮助研究者跨过文库构建这一实验步骤, 避免了亚克隆过程中引入的偏差. 依靠后期强大的生物信息学分析能力, 对照一个参比基因组(reference genome)高通量测序技术可以非常轻松完成基因组重测序(re-sequence), 2007年van Or-

㈦ 生物秀的简介

生物秀 创建于2003年，是目前国内内容最专业、系统最完善和技术最先进的生物医药门户网站。生物秀以自主创新和勇于开拓的精神，立足于互联网技术在生命科学领域的拓展，通过先进的网络技术为生物医药领域提供各种应用和信息化服务，即让IT技术为BT(Biology Technology)服务，从而助推后IT时代下的生命科学进步和生物产业发展。生物秀所有系统的会员总数超过30万人，其中70%以上具有硕士和博士学历，并且超过八成的会员是来自高校、科研院所和企业研发部门，拥有无可比拟的专一性目标人群。
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㈧ 减数分裂原理

减数分裂（meiosis）是有性生殖生物在生殖细胞成熟过程中发生的特殊分裂方式。在这一过程中，DNA复制一次，细胞连续分裂两次，结果形成4个子细胞的染色体数目只有母细胞的一半，故称为减数分裂，又称成熟分裂（maturation division）。减数分裂的结果是形成单倍体（n）配子。减数分裂的全过程划分为4个阶段：间期Ⅰ、减数分裂Ⅰ、间期Ⅱ和减数分裂Ⅱ。

分裂过程
（一）间期Ⅰ
间期Ⅰ是原始生殖细胞进入减数分裂之前的物质准备阶段，这一阶段完成后由原始生殖细胞成为生殖母细胞。与有丝分裂间期相比，间期Ⅰ同样也包括G1、S和G2期，细胞在这一阶段的代谢活动也同样是进行物质积累和DNA复制。

不同之处：①S期明显延长，一般认为是由于每单位长度DNA复制单位的启动数量减少所致；②此期只完成99.7%的DNA复制，其余0.3%在第一次减数分裂前期的偶线期完成。
（二）减数分裂Ⅰ
减数分裂Ⅰ即第一次减数分裂，包括前期Ⅰ、中期Ⅰ、后期Ⅰ和末期Ⅰ。遗传物质的交换与重组等变化主要发生在这个过程。
1．前期Ⅰ
第一次减数分裂的前期染色体变化比较复杂，经历时间比较长。根据染色体的形态变化可以划分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期5个亚期。
细线期（leptotene stage）：染色质逐渐凝集成光镜下可见的细长染色体丝，DNA虽已复制，但分辨不出染色单体的双线结构。由于小区域浓缩的结果，染色体细丝上有许多粒状结构，称为染色粒（chromomere）。此期染色体端部与核膜紧密相连，这样有利于同源染色体配对。核仁及核均膨大。
偶线期（zygotene stage）：
成对的同源染色体开始配对，这一过程称为联会（synapsis），并形成联会复合体（synaptonemal complex）。联会一般是从靠近核膜的一端开始，或者在染色体全长的若干位点上同时进行。联会复合体是在两条同源染色体间沿长轴形成的一种蛋白质的非永久性复合结构，包括侧体结构和中央结构，介导同源染色体的配对、联会和重组。电镜下显示组成联会复合体的一对同源染色体每一条仅一侧有动粒，另一侧无动粒并产生特殊的侧体结构。侧体通过对同源染色体之间的彼此识别起作用，使随机分布在核中的同源染色体相互配对，两个侧体之间立即形成中央结构，像拉锁一样使同源染色体紧密相连。联会复合体是同源染色体配对过程中产生的临时性结构，在进入第一次减数分裂中期之前消失。
由于同源染色体联会的结果，使每对染色体形成一个紧密相伴的二价体（bivalent）。但此时染色体细长，看不清数目。
粗线期（pachytene stage）：
染色体进一步螺旋化，明显变粗变短。光镜下可见细胞中有n个二价体，每一条染色体都由两条染色单体构成，因此，二价体又称四分体（tetrad）。每条染色体的两条染色单体之间互称为姐妹染色单体，同源染色体的染色单体之间互称为非姐妹染色单体。在粗线期，非姐妹染色单体的相对位置之间可发生片段互换，称交换（crossing over），可使同源染色体之间的基因产生部分重新组合，即重组（recombination）。
双线期（diplotene stage）：
染色体进一步缩短，联会复合体解体。同源染色体开始分离，使交换后的染色体之间出现交叉（chiasma）。一般认为，交叉是非姐妹染色单体之间发生了交换的表现，随着时间的推移，交叉点向末端移动的现象称为交叉端化。人和许多动物的双线期经历时间比较长。如人的卵母细胞在五个月胎儿已达双线期，至12~50岁的排卵年龄期间，卵子的生成一直停留在双线期。
终变期（diakinesis）：
染色体变得更加短粗，交叉渐移至两端，核仁、核膜消失，纺锤体开始形成。
2．中期Ⅰ
二价体排列在赤道面上，形成赤道板。纺锤体形成，纺锤丝微管与着丝粒区的动粒相连，一对同源染色体的动粒朝向两极。此期二价体仍有交叉联系着。
3．后期Ⅰ
二价体中的两条同源染色体彼此分开，在纺锤丝的牵引下，分别向两极移动。后期Ⅰ完成时，每一极只获得每对同源染色体中的一条（n），即二分体（dyad）。因此经过减数分裂Ⅰ，染色体由2n数目减为n，这时的每条染色体是由两条染色单体组成的，所以，从DNA含量来看它们并没有减半。由于粗线期中同源染色体非姐妹染色单体之间发生了交换，所以，每条染色体的姐妹染色单体上的DNA组成并不完全相同。此过程父源或母源的染色体向哪一极移动是随机的。
4．末期Ⅰ
二分体移至两极后，染色体解旋伸展，核仁重新形成，核膜重建，同时进行细胞质分裂形成两个子细胞，每个子细胞各具有几个二分体，即n个复制了的染色体。在大多数生物类型中没有末期Ⅰ，而由后期Ⅰ直接进入第二次减数分裂的前期。
（三）间期Ⅱ
间期Ⅱ为完成第一次减数分裂后与第二次减数分裂细胞前的短暂间期，没有DNA合成。
（四）减数分裂Ⅱ
过程与有丝分裂基本相同，主要是间期Ⅰ复制的姐妹染色单体彼此分离。包括前、中、后、末四个时期。
前期Ⅱ：
每个二分体凝缩，中心体向两极移动，组装纺锤体，核膜消失。
中期Ⅱ：
二分体通过着丝粒与纺锤丝连结，排列形成赤道板。
后期Ⅱ：
着丝粒纵裂，姐妹染色单体分离，并移向两极，每一极各含有n个单分体（monad），即n条染色体。
末期Ⅱ：
各染色体移至两极后解旋伸展，核膜重新组装，核仁重现。纺锤体消失，细胞质分裂
经过上述两次连续分裂，形成4个子细胞，每一子细胞的染色体数目只有母细胞的一半，即形成了单倍体的生殖细胞（n）。雌雄生殖细胞结合（受精），使染色体数目恢复为二倍体（2n），这便是新生命的开始。

㈨ 如何成功做好DNA酶切如生物秀论坛这样的论坛还有哪些

你是做单切还是双切？我一般用的是NEB公司的快切酶，就是酶后面带HF的（高保真），说是切10多分钟就行，但是有些酶会不怎么好用，我一般会切1h以上，如果没做过可以通过个预实验判断下，Takara公司的酶贵些，浓度也高些；如果是双切，两个酶切位点靠的比较近的话我一般会分布切，DNA酶切我觉得最主要两点：1。酶切的时间；2.酶切位点的选择，比如会不会甲基化等。其他的也没什么了。。。。

㈩ 谁知道生物秀的这个网站怎么样

那位朋友说生物秀是后起之秀不太准确，据我所知生物秀2003年就建立了，只是一直比较低调，但是一直很踏实的做内容，而不是像某些网站天天吹着自己是第一，这个你去这几个网站的论坛看看每天的发帖量就知道了。生物秀旗下拥有生物秀论坛、生物秀知道、生物网络、生物部落、生物人才网、易生物等多个系统，目前应该是生物医药行业系统最完善的。我是2004年就在生物秀和其他网站都注册了的，所以对这些网站算是比较熟悉。生物秀基本没怎么宣传过，一直很踏实的做内容，终于在2009年逐年显现出强大的实力，现在被大家认为在纯生物领域是最好的。楼上说的明显拼不过，只能说他还停留在2009年之前的旧石器时代。他说的那两个其中一个以医学为主，另外一个吹牛第一，不信你可以去了生物秀论坛然后再去他的论坛试试，保证你就只想说一个词“shit”！
其实好不好别人说的都不免主观和偏颇，你可以自己看看对比一下就行了。另外如果是搞研究的话，也不用管到底哪个更好，那个对自己更有用就用那个，我就是这么做的。不过生物秀论坛的资料确实足够丰富足够好，而且下载容易，这一点我倒是可以用人格保证。
希望我的回答对你有帮助。