❶ 生物素通过噻吩环戊酸侧链上的什么部位与多种大分子偶联
生物素的活化与活化生物素的标记2007-01-12 03:33 1. 生物素的活化 生物素预先活化后,通过噻吩环的戊酸侧链上羧基与抗体、酶等生物大分子以酰胺键偶联。活化生物素的制备是获得高敏感度BAS制剂的关键环节。常用方法有以下几种: 1) 生物素N—羟基丁二酰亚胺酯(biotinyl-N-hydroxy-succinnimide,BNHS)的制备:取生物素1g混悬于12 ml,N,N-二甲基甲酰胺(DMF),加人0.6g N-羟基丁二酰亚胺(HOSU)和0. 8 g二环己基碳二亚胺(DCC),置于密闭容器内,室温下磁力搅拌作用过夜。过滤,滤液经旋转蒸干。加10mL乙醚洗涤,继加200 ml异丙醇使其重结晶,获得白色粉末状晶体。 BNHS酯键中的-C=0基团可与蛋白质分子中赖氨酸的氨基结合,使生物素标记在蛋白分子上,含赖氨酸残基越多,或蛋白质的等电点在pI 6.0以上,其标记效果越好。因此,BNHS适用于标记抗体及中性和偏碱性的抗原。 2)长臂活化生物素(N-hydroxy-succinimido-6-biotinyl amido hexanoate,BCNHS)的制备生物素的分子量仅为244.31,当与抗体或酶结合后应用于免疫试验时,极易受到大分子蛋白空间位阻效应(steric hindrance)的影响。使用长臂生物素可以减少位阻效应,提高试验的灵敏度。长臂生物素是在生...
❷ 标记蛋白质巯基的活化生物素是
正确答案:B
解析:标记蛋白质醛基的活化生物素包括BHZ
和BGHZ,标记蛋白质巯基的活化生物素是MPB,标记核酸的活化生物素包括光敏生物素、BNHS和
BHZ等
。
❸ 生物素是什么意思及作用
一、生物素的定义:生物素又称维生素H、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族,B7。它是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。是一种维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康必要的营养素。
生物素是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。
二、生物素的用途:生物素,即人们所熟知的维生素H,它能使身体将食物转化为自身能量。生物素有利于细胞的健康和再生。糖尿病患者可以通过生物素改善血糖的调节。头发和指甲的健康也需要生物素。
(1)保健用途
糖尿病。补充生物素,生物素通过改善胰岛素和血糖的使用帮助改善血糖的调节。头发和指甲。补充生物素可以修复薄弱爆裂的脚趾甲和手指甲,改善头发的健康。生物素也可以修复那些由于生物素水平偏低引起过早的灰白头发。
(2)美容用途
生物素具有出色的美容作用,可保持皮肤嫩白、指甲光滑等。这个发现也为生物素产品开拓了一大新药业用途。美容化妆品行业是国际大产业之一,美容化妆品的国际市场总销售额远远高于药品的销售额,生物素在美肤、美甲(指甲)及美发上的新应用必将导致药用级生物素销量的上升。
(3)科研用途
生物素可以用作核酸探针的标记物,它能与核酸分子的UTP或dUTP 5‘位上的C相结合,并可与亲和素结合而被检测。在检测的过程中,生物素只用作固定连接,而不用作信号检测。
(3)生物素标记蛋白哪个位置扩展阅读:
生物素的食物来源:
(1)在牛奶、牛肝、蛋黄、动物肾脏、草莓、柚子、葡萄等水果、瘦肉、糙米、啤酒、小麦中都含有生物素。在复合维生素B和多种维生素的制剂中,通常都含有维生素H。
(2)富含该维生素的美食:芥末双脆、 蟹肉西兰花、芥茉菠菜、鱼香腰花、油焖鳝鱼、素炒三丝、蛋黄南瓜、芒果柳橙苹果汁、胡萝卜炖羊肉、松花淡菜粥、清炖萝卜牛肉、银杞明目汤、鸡肝胡萝卜粥、牛肉蔬
(3)菜浓汤、芒果葡萄柚汁、芒果柳橙苹果汁、木瓜生姜汁、芦荟柠檬汁、甜橙柠檬汁、杏猕猴桃汁。
❹ 生物素与细胞表面的膜蛋白是怎样结合的
通过生物素化标记分析细胞膜亚蛋白质组
Analysis of Cell Membrane Subproteome by Biotinylation of Proteins添加成功!您可以在“我的服务”中查看您添加的引用通知列表,并且配置获取通知的方式。
关闭细胞膜在许多基本生物学作用过程中扮演着重要角色,比如细胞-细胞相互作用、信号转导和物质运输.分析不同生理或病理状态细胞的膜蛋白的表达变化,有助于了解这些生物学过程以及发现新的诊断、治疗靶位.成功地进行膜蛋白分析最重要的是获得足够浓度与纯度的膜蛋白.这里报告一种分离高纯度膜蛋白的方法,主要包括三个步骤:(1)生物素化活细胞表面的膜蛋白,(2)链亲和素琼脂糖亲和吸附,(3)强烈的清洗条件去除非特异吸附的胞质蛋白.最后用化学方法洗脱生物素标记的膜蛋白进行双向电泳分离分析.用该方法制备了HeLa细胞的膜蛋白.免疫印迹结果表明,生物素标记的膜蛋白基本上都是低丰度蛋白.这样制备得到的膜蛋白双向电泳分离出2 400多个蛋白质点,而且大多数点的亮度相近,分布得相对分散没有聚集成群.这种图谱非常便于比较分析找到差异蛋白.多次重复制备膜蛋白、电泳表明该方法的重复性和稳定性很好.
刊 名: 中国生物化学与分子生物学报 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年,卷(期): 2006 22(3) 分类号: Q78 关键字: 细胞膜 蛋白质组 双向电泳 生物素化 亲和纯化 机标分类号: R39 R81 机标关键字: 生物素化 标记分析 细胞膜 蛋白质 膜蛋白 生物素标记 双向电泳 化学方法 电泳分离 生物学过程 低丰度蛋白 作用过程 治疗靶位 信号转导 细胞表面 亲和吸附 物质运输 免疫印迹 链亲和素 分离分析 基金项目: 科技部科研项目
❺ 生物素与地高辛,有哪些大的不同吗(地高辛,生
您好!生物素和地高辛都是非放射性标记物是。二者都是半抗原。生物素是一种小分子水溶性维生素,对亲和素有独特的亲和力,两者能形成稳定的复合物,通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。地高辛是一种类固醇半抗原分子,可利用其抗体进行免疫检测,原理类似于生物素的检测。
❻ 请教关于I型胶原蛋白的生物素标记问题
胶原蛋白是维持皮肤与肌肉弹性的主要成分。随着年龄增加,胶原蛋白纤维开始变得细小,弹性蛋白的弹性也随之降低,原来真皮层中的胶原蛋白与弹性蛋白交互构成有规则的网目结构会逐渐崩解,最后导致皱纹生成,皮肤开始老化松弛。胶原蛋白被称为“骨中之骨,肤中之肤”.
都是起到抗衰老美容的作用,胎盘素的标准不是很清楚,如果选择胶原的话主要看胶原蛋白分子量的大小来判定,我们平时所以的胶原蛋白严格来说是大分子,是不能被人体吸收的。人体最佳吸收的分子量是在1000道尔顿到1500道尔顿之间,这个分子状态它是以肽链的方式存在。肽链吸收进人体后能够再自主组合成胶原蛋白分子状态,然后根据人体那个部门缺失通过血液流通补充到那个部门。
❼ 生物素是什么东西
是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。
近年大量研究证实,生物素—亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。
原理
生物素(biotin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.31Da.生物素分子有两个环状结构(如图1),其中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素结合的主要部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链。
其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的唯一结构,经化学修饰后,生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联,包括蛋白质,核酸,多糖,脂类等。
❽ 生物素标记是什么
生物素是个蛋白,标记就是把这个蛋白标记到别的上面便于检测