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如何测水样微生物

发布时间:2022-05-04 16:53:05

⑴ 如何检验环境水中的微生物

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水质微生物

一、水质微生物及指示菌

在各种水体,特别是污染水体中存在有大量的有机物质,适于各种微生物的生长,因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。水体中的微生物主要来源于土壤,以及人类的动物的排泄物及污染。水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。

一般认为,水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势。与其他水体相比,河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多,这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故。

水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物,大部分是从外界环境污染而来,特别是人和其它温血动物的粪便污染。水中常见的致病性细菌主要包括:志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、小肠结炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌等。

在实际控制中,对水质卫生质量的评价和控制,是无法对各种可能存在的致病微生物一一进行检测,而一般利用对指示菌的检测和控制,来了解水体是否受到过人畜粪便的污染,是否有肠道病原微生物存在的可能,从而评价水的质量,以保证水质的卫生安全。

目前,世界各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪便污染较好的指示菌。

我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌,GB5749-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水卫生标准》规定,生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。

在某些情况下,水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量,除采用大肠菌群等指标外,一般还采用细菌总数这个指标。我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。

二、水质微生物检验方法

GB5750-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。

(一)细菌总数的检测:

国家标准中,细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24h培养后,所生长的细菌菌落的总数。

对生活饮用水,直接吸取1ml水样于平皿中,加入营养琼脂后混匀,37℃培养24h,进行计数。

对水源水,根据情况对样品进行10倍梯度稀释,选择适宜稀释液1ml,加注平皿,营养琼脂混匀,37℃培养24h,进行计数。

按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。

(二)总大肠菌群的检测:

国家标准中,利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的,37℃生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。水样中总大肠菌群数的含量,表明水被粪便污染的程度,而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。

国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。

多管发酵法检测总大肠菌群,分为三步:初发酵试验,平板分离,复发酵证实试验。初发酵试验,采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h,观察产酸产气情况。对阳性管培养物,接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基,观察菌落特征,并进行革兰氏染色和镜检。对典型和可疑菌落,接种于乳糖蛋白胨培养液,进行复发酵证实试验,并根据标准所附检数表报告结果。

其中,对生活饮用水,初发酵试验接种水样总量300ml,即100ml接种2管,10ml接种10管,采用两个稀释度,12支发酵管。对水源水,初发酵试验接种水样总量55.5ml,即10ml接种5管,1ml接种5管,0.1ml接种10管,共采用三个稀释度,15支发酵管。两种接种方法,所用的检数表是不同的。

滤膜法检测总大肠菌群,就是利用微孔滤膜,过滤一定量水样,将水样中含有的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜帖放在选择性培养基上(如品红亚硫酸钠培养基),经培养和证实试验后,直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落,并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

三、说明:

1.菌落总数测定中,应选择合适的稀释度进行。生活饮用水,国家标准规定每毫升不得超过100个,因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养。

2.培养时间。与食品中菌落计数不同,测定水中细菌总数,培养时间采用24h。

3.总大肠菌群的测定方法,由于饮用水和水源水可能的污染程度不同,因此采用不同的接种量,检数表也不相同。

4.当接种量超过1毫升时,一般采用多倍浓度培养液。如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL,加入100mL水样后,总体积为150mL,培养液恢复到正常浓度。

5.滤膜法检测总大肠菌群,一般在检测较大量低浊度水样时采用,大量水样滤过滤膜后,水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。

⑵ 测定水中微生物(包括细菌真菌等)数量的方法

器材及培养

材料和试剂
蒸馏水,自来水,取自儿童公园的湖水,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基.
仪器或其他用具
灭菌三角烧瓶,灭菌带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌量筒.
研究方法
采用平板菌落记数技术测定水中细菌总数.

水样的采取
自来水
先将自来水水龙头用火焰灼烧3min灭菌,再开放水龙头5min后,以灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析.
公园的湖水
应取距水面10~15cm的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻过来,除去玻璃
塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查,否则需放入冰箱中保存.
细菌总数的测定



菌落记数方法
1)计算相同稀释度的平均菌落数.若有大片菌苔生长时,弃用;以无片菌苔生长的培养皿记数.若片状菌
苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数@2.
2)选择平均菌落数在30~300之间的平板.只有一个符合此范围时,以该平均菌落数@稀释倍数.有两
个在30~300之间时,按两者菌落总数比值决定,比值小于2,取平均;比值大于2,取较小的菌落数.
3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数@稀释倍数.
4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则按稀释度的平均数@倍数.
5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最近30或300的平均菌落数@稀释倍数.

微生物的含量能否反应水的营养化程度?

欢迎采纳希望帮到你

⑶ 如何检测自来水中的微生物

(1)采水样 先将自来水笼头用火焰烧3分钟灭菌,再拧开水
笼头使水流5分钟后,以无菌容器接取水样.
(2)用无菌吸管取水样1ml,注入两个无菌培养皿中,
并分别倾料15ml已溶化并冷却到45℃左右的普通琼脂培养基,
并通过平面旋摇使水样与培养基充分混匀,盖上皿盖.另取一空
的无菌培养皿,倾注入15ml普通琼脂培养基,做空白对照.分别
做好标记,置37℃培养箱中培养24h,观察是否有微生物生长.
计算菌落数,并观察菌落特征.

⑷ 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细

1检测前的准备
1.1仪器:微生物限度检验仪
微生物限度培养器
1.2培养基:TGYA琼脂培养基、R2A琼脂培养基
上述培养基均须做培养基的促生长试验,TGYA琼脂培养基的促生长试验参见微生物计数操作检查法SOP07-QC-3-017,R2A琼脂培养基促生长试验中选择的菌种是铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄糖球菌,操作方法同微生物计数操作检查法SOP07-QC-3-017中培养基的促生长试验。
75%的酒精
1.3开启净化工作台,把微生物限度检验仪连接电源。

2检测
2.1薄膜过滤法
使用孔径大小不超过0.45μm的薄膜过滤器。
2.2在净化工作台下,用火焰喷枪对泵头端面和过滤片进行消毒。把微生物限度培养器固定在微生物限度检验仪上,打开微生物限度培养器盖子。
2.3取50ml的纯化水,倒入微生物限度培养器中,打开微生物限度检验仪开关,立即过滤。过滤完成后,取下过滤器,在过滤器膜的另一面中,倾注TGYA琼脂培养基,盖上盖子。
2.4取50ml的纯化水,倒入微生物限度培养器中,打开微生物限度检验仪开关,立即过滤。过滤完成后,取下过滤器,在过滤器膜的另一面中,倾注R2A琼脂培养基,盖上盖子。
2.5每个样品过滤后均做2单个培养,检测完毕,取一微生物限度培养器固定在微生物限度检验仪上,注入100ml的75%酒精过滤,关闭仪器、电源。

3培养
倾注TGYA琼脂培养基的,在30℃-35℃培养48h-72h,并计数。倾注R2A琼脂培养基的,在20℃-25℃培养5d-7d,并计数。
分别计算和报告两种培养基每1ml纯化水中的cfu值。

⑸ 如何用显微镜观察水样中微生物 就是有采集回来的水样需要用显微镜进行观察其中的微生物,怎样观察准确

我教你
要看微生物就弄点海水,河水,自来水就不用了,海水的微生物特别多,你在找一块玻璃,用手粘一滴海水,滴在玻璃上,在放到显微镜里去看,你就会看到非常多的微生物,但是,你要看清它们是很不容易的,因为他们各个都是游泳健将,你看到它们,它们一下子就游走了.
知道了吗?

⑹ 纯净水微生物检测方法

电导率越低,水越纯。电导率很低是不是说明水中的微生物也不存在了呢?微生物检测等很长时间才出结果,要是能够通过这样的方法检测纯净水的话,那就可以省了很多微生物检测步骤.

在现代食品安全速测技术中确实有利用电导变化原理来测量微生物含量的方法,叫做:Bactometer系统,是一种用于估计微生物数量的新方法
比较快速的方法是有的,设备也比较先进,可能用的并不多
例如:直接外荧光滤过技术(DEFT)
即用胶系统(SimPlate)
Bactometer系统
Malthus微生物快速测试仪
ATP生物发光技术(BL)
微量量热法
接触酶测定仪
放射测量法

奥地利Sy-Lab公司的BacTrac4300和BioTrac4200自动微生物快速检测系统可以根据微生物在生长过程中利用低电导率的大分子物质(如蛋白质,多肽及碳水化合物等)进行新陈代谢,生成低分子带电荷的分解物,使电导率发生变化,电信号经放大后显示并记录,检测系统每10分钟检测一次电导率的变化,由计算机实时监控并自动给出结果。因此,只要先用标准方法对比做出标准曲线,就可以达到快速定量检测菌数的目的。对于致病菌或某些特殊应用场合,则不需要做标准曲线,如有电导率显着突变,则可以判断为初筛阳性,用标准方法进一步确认。

其特点是:
1。采用独创的测量培养基电导(M值)和电极电导(E值)结合的方法,测量相对电导率变化,使灵敏度大大提高,E值测量法尤其适用于一些高盐分(高电导率)的选择性增菌培养基,使电导率法用于致病菌快速初筛成为可能。
2。对于难以测量电导变化的微生物,如酵母和霉菌,直接电导测量经常会出现假阴性。Sylab公司采用测间接电导率的方法,通过测量KOH吸收微生物代谢产生CO2后电导率的变化反映微生物的生长情况,检测灵敏度大大提高,杜绝假阴性可能。
3。灵敏度高。最低可检测出0.2-1个/mL(克)样品。
4。可检测样品种类广。可检测常见的各种食品、化妆品、药品、环境拭子等,还可用于微生物代谢、防腐及消毒效果研究等。
5。检测的微生物项目多。可检测常规微生物项目(菌落总数、大肠菌群、酵母和霉菌总数)及致病微生物(沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌等)。
6。检测速度快。样品含菌量越高,出结果越快,只需4-24小时即给出结果。大肠菌群最长12小时出结果。
7。检测步骤简单。厂家提供特殊配方的培养基,您只需制备好培养基,将样品加入培养基中,放入仪器,然后启动程序即可自动出结果。对于液体样品无需复杂前处理,固体样品只需进行必要的均质和稀释即可。不需要将样品进行梯度稀释,不需要人工计数,轻松完成每天繁琐的微生物检测工作,省时省力。
8。针对中国市场,厂家可以只提供干燥培养基,单次检测成本低廉,特别适合中国国情。
9。基于Windows系统的智能化软件,可对单个检测瓶进行控制,特别适合HACCP企业进行风险评估分析。
10。与标准方法相比,符合率达到90-97%,完全能满足检测机构和企业对快速检测的需要。
11。该方法通过欧洲各国的认证。

⑺ 如何检测水中的细菌

如果水中细菌密度较小,就该应用无菌技术将待测水样通过专门过滤细菌的滤纸,这样细菌就都留在滤纸上了,再将滤纸铺到倒好平板的培养基中培养,长出菌落后数菌落数,数量除以过滤水的体积,就得出单位水样里的细菌数

⑻ 生产用水的微生物检测标准与采水样的方法是什么

我做过用固体培养基测水样中微生物含量,菌落数要求在30~300个才可以计数。你的培养基中菌落数太少,你检查一下你的取样方法和操作步骤有没有规范,不行就减小稀释倍数试试。而且一般每一个稀释浓度下要做三组平行试验。
计算时,先计算每一稀释浓度下三组平行试验的平均数,把不同浓度下的平均数进行比较,首先选择平均菌落数在30—300之间的,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数。

⑼ 怎样测量生活饮用水中的微生物

取一定量水,按比例稀释(十倍稀释法),然后涂布到培养基上,培养一天,观察菌落形态数量,乘以稀释倍数,得出单位体积水中微生物含量。---大概操作过程。
操做要在无菌环境下操作。

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