A. 哪位高手指点一下植物RNA提取试剂什么样的最好啊
北京艾德莱的植物RNA提取试剂盒非常好用!他们有好几款植物RNA提取的试剂盒。
现在给您好提供一些资料,希望能帮助到您;
(1) 首先有两种选择:第一是用他们的RN01 TRIpure reagent,这个就是Invitrogen的TRIzol,他们的质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。 第二是用RN33 PLANTpure 通用植物总RNA快速提取试剂盒 (普通植物组织细胞),这个试剂盒的原理,是TRIzol加离心柱子,在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。等于是TRIpure(RN01)加离心柱子。
(2) 然后根据特殊具体需求比如想速度更快,操作更简单,还不想用TRIzol这种苯酚,氯仿毒性物质还有两种选择:一种选择是RN09 EASYspin植物RNA提取试剂盒,这个盒子和Qiagen的74904完全一样,不用苯酚,氯仿,速度最快,操作最简单。但是对部分植物样品来说,可能残留基因组DNA稍多,只有做了试验才知道客户的样品是不是残留DNA稍多,就是Qiagen也不能确保100%的样品没有残留DNA。北京艾德莱能确保的就是和Qiagen的效果一致。实在有DNA残留的,就可能还要用DNA酶消化。具体只能自己权衡选择或者和艾德莱技术人员沟通了再选择。另一种就是RN38 EASYspin Plus植物RNA提取试剂盒这个试剂盒是RN09的改进版本(Qiagen也没有这款,是艾德莱在Qiagen基础上改进世界首创的),它使用基因组清除柱子的技术和配方在保持RN09不用苯酚,氯仿毒性物质,最简单,最快速的基础上消除了基因组DNA残留,一般肉眼不可见DNA残留。注意:目前北京艾德莱测试的几种植物样品中均已经获得成功,使用RN09提取有残留DNA的样品种类使用这款后,均无DNA残留。
希望我的回答能帮助到您好。
B. 我们院里要进质粒提取试剂盒求助
常规的使用小提试剂盒提取得到的质粒,并不适合用来转染细胞,其原因在于:
1.小提质粒浓度较低,一般仅为0.1~0.2ug/ul。而用质粒转染细胞,一般至少需要2~5ug左右,如果使用小提质粒,只能加大上样量,这样对转染操作会有一定影响。
2.小提质粒纯度不够,且内毒素含量较高,会对目的细胞有一定毒性,影响转染效率。
基于以上原因,如果提取的质粒在用质粒转染目的细胞时,可以选择长沙赢润生物技术有限公司的质粒大量提取试剂盒。
C. pGEMX -T Easy 载体连接试剂盒我想问选择谁家的好
赢润生物现有全国最大最全的基因库、载体库,价格比进口的便宜很多。可以去官方首页搜索相应载体。
D. 最近公司要采购组织细胞rna提取试剂盒哪家好推荐下
目前EASYspin 组织/细胞RNA提取试剂盒我觉得还是博凌科为的好,我们院里一直用的都是他家的,很有信赖度的
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界着名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
不需要使用有毒的苯酚,,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
E. 气体检测仪GDS系统是什么系统
一、GDS系统含义
gds系统的全称是可燃气体和有毒气体检测报警系统,是英文Gas Detection System的缩写。在企业生产、储运过程中,经常会涉及到各类可燃、有毒气体。gds系统的功能就是就是实时监测各泄漏源状况,当出现泄漏危险时主动提醒,以达到消除隐患保证安全生产的作用。
二、GDS系统演变
在2014年的原安监总局《国家安全监管总局关于加强化工安全仪表系统管理的指导意见》(安监总管三 [2014] 116号)(以下简称116号文),文中规定“化工安全仪表系统(SIS)包括安全联锁系统、紧急停车系统和有毒有害、可燃气体及火灾检测保护系统等”。因此当时上的很多GDS项目都是包含在SIS系统中的,这也是GDS系统需要SIL认证的原因。
由于气体检测报警系统受管辖比较乱,有的要消防认证,有的要SIL认证,很多时候会互相冲突。因此,为了更好的规范GDS系统,在2020年实施的最新GBT50493标准中,明确了GDS系统独立的要求,即不属于SIS系统(不再需要SIL认证)、DCS(不能直接进DCS)系统等,单独一套系统。
AEGDS2000系统框架
F. 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS
如果293T本身不表达这个蛋白的话,最大的可能是一抗质量不过关
你可以做一下免疫印迹看看。免疫组化假阳性多正常(非特异性吸附)。
免疫印迹Western blotting用分子量大小来判断,很难出假的。
G. RT -PCR的操作步骤
1. 总RNA的提取:见相关内容。
2. cDNA第一链的合成:目前试剂公司有多种cDNA第一链试剂盒出售,其原理基本相同,但操作步骤不一。现以长沙赢润生物技术有限公司提供的操作手册为例:
(1)在0.5ml微量离心管中,加入总RNA 1-5μg,补充适量的DEPC H2O使总体积达11μl。在管中加10μM Oligo(dT)12-18 1μl,轻轻混匀、离心。
(2)70℃加热10min,立即将微量离心管插入冰浴中至少1min。
然后加入下列试剂的混合物:
10×PCR buffer 2μl
25mM MgCl2 2μl
10mM dNTPmix 1μl
0.1M DTT 2μl
轻轻混匀,离心。42℃孵育2-5min。
(3)加入SuperscriptⅡ1μl ,在42℃水浴中孵育50min。
(4)于70℃加热15min以终止反应。
(5)将管插入冰中,加入RNase H 1μl ,37℃孵育20min,降解残留的RNA。-20℃保存备用。
3.PCR:
(1)取0.5ml PCR管,依次加入下列试剂:
第一链cDNA 2μl
上游引物(10pM) 2μl
下游引物(10pM) 2μl
dNTP(2mM) 4μl
10×PCR buffer 5μl
Taq 酶(2u/μl) 1μl
(2) 加入适量的ddH2O,使总体积达50μl。轻轻混匀,离心。
(3) 设定PCR程序。在适当的温度参数下扩增28-32个循环。为了保证实验结果的可靠与准确,可在PCR扩增目的基因时,加入一对内参(如G3PD)的特异性引物,同时扩增内参DNA,作为对照。
(4) 电泳鉴定:行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果。
(5) 密度扫描、结果分析:采用凝胶图像分析系统,对电泳条带进行密度扫描。