如何对实验动物进行微生物学控制

1. 肠道微生物对实验动物标准化的影响，以及如何避免和利用肠道微生物进行实验动物实验

环境质量标准化控制主要是通过环境设施来控制，实验动物设施通过严格控制人流、物流和气流，使得动物所在的环境保持温度、湿度、气流、空气颗粒数、噪音等保持恒定。所以说一个好的实验动物设施对实验动物微生物标准的控制起到至关重要的作用。
遗传质量的控制首要是要保证你有质量合格的种子，然后是要通过人为日常操作时要做好动物的繁殖记录，不要造成遗产污染。

2. 医学实验动物学的生物安全涉及哪些主要方面

实验动物学是以实验动物为主要研究对象,并将培育的试验动物应用于生命科学等研究的一门综合性学科。简而言之，它是研究实验动物和动物实验的一门综合性学科。

1、实验动物遗传育种学运用遗传调控原理，控制动物的遗传特性，培育新的实验动物品种、品系和各种动物模型，从而达到实验动物科学的目的。

2、实验动物微生物学和寄生虫学是研究实验动物的分类、生物学特性及其与人和动物关系的科学。

3、主要研究物理化学因素（温度、湿度、空气流量、风速、气压、氨气、有害气体等）、营养因素（饲料、水等）、生活环境（房屋、笼子、床上用品、饮水用具等）、生物因素（个体间关系、饲养密度等）的影响，实验动物身上的微生物、寄生虫、其他动物和人类等。

(2)如何对实验动物进行微生物学控制扩展阅读：

研究方法：动物门类繁多，作为学科也极其复杂，但综合起来，其研究方法不外：

1、描述法：通过观察，用文字和数字记录动物的外形、内部结构、生活习性、经济和学术意义。

2、比较法：通过动物间的系统比较，推断出动物之间的异同，了解它们之间的内在联系，进而得出规律。

3、实验法：在人为条件下，采用物理、化学、生物等方法观察动物的生命和生命活动现象，揭示动物生命和生命活动的本质，实验法和比较法往往同时进行。

3. 1）什么是标准实验动物我们现在通常使用什么标准实验动物，使用标准实验动物有什么现实意义

标准化实验动物是指遗传背景明确或来源清楚的。
现在常用的医学实验动物

1. 小鼠：医学实验中常用的小鼠，属于哺乳纲，啮齿目，鼠科，鼠属，小家鼠种动物。其体型小易捉，操作方便，而且其生长期短、成熟早、繁殖力强。性情温驯，胆小怕惊，对环境反应敏感。小鼠作为成熟的实验动物，具有很多的品系，是医学实验中用途最广泛和最常用的动物。适合作药物和肿瘤学研究。
2. 大鼠：我国医学实验中常用的大鼠为大白鼠，属于脊椎动物门，哺乳纲，啮齿目，鼠科，大鼠属动物。其性情较温顺。
受惊时表现凶狠，易咬人。大白鼠的嗅觉灵敏，对噪音敏感，而且对营养缺乏也非常的敏感。由于大白鼠繁殖力强，易饲养，体型大小合适，给药容易，采样量合适方便，故在医学实验中的用量仅次于小鼠。适合作药物和肿瘤学研究。

3. 豚鼠：豚鼠又名海猪、天竺鼠、荷兰猪。属哺乳纲，啮齿目，豪猪形亚目，豚鼠科，豚鼠鼠动物。其性情温驯，胆小怕惊。很少咬人或抓手。由于豚鼠的迟发性超敏反应与人类相似，所以豚鼠是过敏性休克和变态反应研究的首选动物。而且豚鼠对许多病原微生物和抗生素都十分敏感，也是病理学和药理学研究的首选。
4. 家兔：家兔属于哺乳纲，兔形目，兔科，穴兔属，为草食哺乳动物。家兔品种多，但在实验室中经常用的有四种：
（1）大耳白兔：特点是耳朵大，肤色白，血管透明清晰，但是抵抗力差。
（2）中国本兔（白家兔）：体小力弱，但抵抗力比大耳白兔稍强。
（3）青紫蓝兔：容易饲养，生长期短，体质强壮，抵抗力强。
（4）新西兰白兔：是近年来引进的优良品种，成熟兔体重在4～5.5kg。
家兔性情温顺、胆小、怯懦、惊疑，易饲养、抗病力强、繁殖率高，是常用的实验动物。家兔最大用处是生产抗体，制备高效价和特异性强的免疫血清。也可用于炎症、发热、休克、急性心血管试验等许多实验。

5． 猫：猫属于哺乳纲，真兽亚目，食肉目，猫科动物。猫用于医学研究已有几百年的历史，因为它的适应性很强，而且其生理学特性及对疾病的反应上与人类相似，所以它在医学上有不可取代的作用，广泛的应用于神经、生理、毒理学、药理学、心血管功能急性实验、血液病等的研究。
6． 狗：狗属于脊椎动物门，哺乳纲，食肉目，犬科，犬属动物。狗的嗅觉很灵敏，对外环境的适应力强，而且喜欢接近人易于驯养。由于狗的神经系统和血液循环系统很发达，广泛用于病理学、生理学、外科学、免疫学、药理学、毒理学、生物化学、营养学等研究。故常用于失血性休克、弥漫性血管凝血、急性心肌梗死、急性肺动脉高血压、条件反射等实验。

7． 猕猴：猕猴属于哺乳纲，灵长目，猴科，猕猴属动物。猕猴作为灵长类动物，在组织结构、生理、代谢机能等方面同人类极为相似，是人类的近属动物，故它是一种极为珍贵的实验动物。用此类动物进行实验，最易解决人类的病害，研究出其发病机制。一般应用于寄生虫病、生殖生理、药理学、毒理学、口腔医学、细菌性疾病、营养代谢、内分泌学等的研究。

8． 小型猪：小型猪和猪都属于哺乳纲，偶蹄目，不反刍亚目，野猪科，猪属动物。由于普通家猪躯体大，不便于用作实验，所以很早就开始着手研究家猪小型化了。猪的心血管、免疫系统、消化器官、眼球、肾脏、皮肤等在组织生理和营养代谢方面与人类有极为相似的地方，所以猪也被列为重要的实验动物。一般应用于肿瘤学、心血管、免疫学、糖尿病、畸形学、遗传学等研究。

9． 蟾蜍：蟾蜍和青蛙都属于两栖纲，无尾目。蟾蜍和青蛙是教学实验中常用的小动物。其心脏在离体情况下仍可有节奏地搏动很久，可用于心功能不全的实验。蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本

实验动物的标准化是指实验动物从微生物质量和遗传学质量进行控制，按微生物学控制标准，即根据微生物的净化程度及携带的寄生虫状况，将实验动物分为四级：一级=普通动物；二级=清洁动物；三级=无特定病原体动物；四级=五菌动物。按遗传学控制标准即基因的纯和度，实验动物分为近交系和远交系。由于实验动物在不同种类，不同品系之间遗传特性存在差异，其实验反应也存在差异，这些差异必然对实验结果产生影响。同时，还要对实验动物的环境，营养进行控制。达到实验动物的标准化，研究者可根据课题研究的目的和要求选择适当等级的动物，在相应等级的实验条件下完成的实验研究，才能证明实验结果是可信的，科学的

实验动物科学发展的较终目的，就是要通过对动物本身生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类的生命奥秘，控制人类的疾病和衰老，延长人类的寿命。随着医学生物科学的突飞猛进发展，认识到公害问题不仅已成为粮食、人口、老年人等的重大社会问题，而且还涉及到地球上生活着的动物生存问题，例如产业公害、食品公害、药品毒性等，均直接影响人体健康，对这些问题的研究，较终必然要通过动物实验（包括动物疾病模型的开发等）来阐明解决。因此，实验动物科学，特别是实验动物的重要性愈来愈被人们所认识，它已被认为是人类追求幸福生活的支柱，故实验动物科学亦被称之为生命科学；为此，先进国家对实验动物科学的发展，均给给予高度的重视，其投入的经济物资和技术力量，几乎可同发展原子能科学相提并论，其重要意义可想而知。实验动物科学，现在已经成为现代科学技术不可分割的一个组成部分，已形成一门独立的综合性基础科学门类。这门科学的重要性在于，一方面它作为科学研究的重要手段，直接影响着许多领域研究课题成果的确立和水平的高低；另一方面，作为一门科学，它的提高和发展，又会把许多领域课题的研究引入新的境地。因此，实验动物科学技术的重要性可概括为下面三句话：它是现代科学技术的重要组成部分，是生命科学的基础和条件，是衡量一个国家或一个科研单位科学研究水平的重要标志。实验动物科学是伴随着生物医学科学，通过漫长的动物实验过程形成的。但是，实验动物科学的迅速发展，使得实验动物的研究价值已经不仅限于生物科学方面，而且广泛地与许多领域科学实验研究紧紧地联系在一起，成为确保现代科学实验研究的一个必不可少的条件。在很多领域的科学研究中，实验动物充当着非常重要的安全试验，成效试验、标准试验的角色。当前我们正处于世界范围内新技术革命的非常时期，生物工程、微电子技术，新材料和新能源正在突飞猛进地发展，廿十一世纪人类将步入生命科学的新时代，作为生命科学研究的基础和条件――实验动物科学，已受到世界各国的普遍重视，投入了巨大的人力物力，这是因为在生物科学领域内，不能用人去做实验，我们必须借助实验动物去探索生物的起源，揭开遗传的奥秘，攻克癌症的堡垒，研究各种疾病与衰老的机理，监测公害、污染，保护人类生存的环境，生产更多更好的农畜产品为人类生活造福，在药品、生物制品、农药、食品、添加剂、化工产品、化妆品、航天、放射性和军工产品的研究，试验与生产中，在进出口商品检验中，实验动物是不可缺少的材料，并且总是作为人类的替身，去承担安全评价和成效试验，在生命科学领域内一切研究课题的确立，成果水平的高低，都决定于实验动物的质量，没有它，我们的科学实验就不能在时间、空间和研究者之间进行比较，我们的科研成果、论文就不能在国际上进行交流，得不到国际的公认，将被国际同行们看为科学水平不高甚至是一堆废纸。我们的生命科学怎能走向世界？因此，迅速发展中国实验动物科学事业，是加快祖国“四化”建设，把中国建设成为社会主义现代化强国的需要。在生命科学研究领域内，进行实验研究所需要的基本条件可以总括为：实验动物（Animal）、设备（Equipment）、信息（Information）和试剂（Reagent）。我们可以把它们看作是生命科学实验研究中的基本要素，可简称为AEIR要素。这四个基本要素，在整个生命科学研究实验中，具有同等重要的地位，不能忽略或偏废。由于科学技术的发展，获得高、精、尖的仪器设备、化学试剂和必要的情报信息已不是困难的事情了。但是，我们在实际工作中，往往把设备、信息和试剂这三要素看得比较重，也比较重视，舍得花钱，而对实验动物这一要素一般不太重视，所造成的沉痛教训是不少的。如在兽医生物药品制造上，由于猪瘟疫苗生产和检定上没有适当合格的动物，近年来的内蒙、陕西、四川、河南、河北、湖北、广东等地，不断发生因接种疫苗后猪大量死亡及疫病扩散的事故，造成很大的损失和不良的政治影响。生物制品工作中，由于没有SPF（无特定病原体）鸡，鸡胚污染白血病毒，所生产的麻疹疫苗等人用疫苗和鸡马立克氏病弱毒疫苗等禽兽用疫苗，出口受到影响。某医大某教授1980年去日本交流经验时，宣读了“克山病的研究论文”引起了日本医学界的重视，但当对方了解到他所使用的动物是来源历史不清的一般动物时，则认为其“实验结果的科学性不强”。这类例子并不少见。因此，急待把实验动物科学搞上去，为各学科研究提供各种标准化的实验动物。但由于实验动物品种品系复杂，保持质量标准困难，规格要求严格，可使用的时间短促，无法控制的繁殖规律，对于生活环境依赖性高等特点，决定了它比其它工业产品更难生产，常可造成在生产和流通程中的特殊困难。在中国普遍采用国际上公认的标准实验动物，进行实验研究，还需要经过难苦努力才能办到。
实验动物科学发展的最终目的，就是要通过对动物本身生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类的生命奥秘，控制人类的疾病和衰老，处长人类的寿命。随着医学生物科学的突飞猛进发展，认识到公害问题不仅已成为粮食、人口、老年人等的重大社会问题，而且还涉及到地球上生活着的动物生存问题，例如产业公害、食品公害、药品毒性等，均直接影响人体健康，对这些问题的研究，最终必然要通过动物实验（包括动物疾病模型的开发等）来阐明解决。因此，实验动物科学，特别是实验动物的重要性愈来愈被人们所认识，它已被认为是人类追求幸福生活的支柱，故实验动物科学亦被称之为生命科学。为此，先进国家对实验动物科学的发展，均给给予高度的重视，其投入的经济物资和技术力量，几乎可同发展原子能科学相提并论，其重要意义可想而知。

4. 动物学实验的实验动物常见的处理方法

一、编号
实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多，根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。
(一)挂牌法：将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上，将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。
(二)打号法：用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵，用耳号钳刺上号码，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。
(三)针刺法：用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下，在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下，也可用于兔、狗等动物。
(四)化学药品涂染动物被毛法：经常应用的涂染化学药品有
涂染红色：0.5%中性红或品红溶液
涂染黄色：3-5%苦味酸溶液
涂染黑色：煤焦油的酒精溶液
根据实验分组编号的需要，可用一种化学药品涂染实验动物动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多，则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适，时间长了染料易退掉；对于哺乳期的子畜也不适合，因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法：该法适用于大、中型动物，如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码，此法编号清楚可靠，但只适于短期观察。
(六)打孔或剪缺口法：可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1～ 9999号，此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。
二、分组
(一)分组的原则：进行动物实验时，经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。动物分组应按随机分配的原则，使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去，以避免各组之间的差别,影响实验结果，特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验，就要求选较多的动物，以补足动物自然死亡和认为处死所丧失的数量，确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组：分组时应建立对照组。1.自身对照组：是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果，此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组：有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理，而给正对照组用同样方法进行处理，但并不采用实验所要求的药物或手段，负对照组则不给任何处理。3.具体分组时，应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号，然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时，应该用随机数字表示进行完全随机分组。 一、实验动物的除毛
在动物实验中，被毛有时会影响实验操作与观察，因此必须除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛等。
(一)剪毛法：剪毛法是将动物固定后，先用蘸有水的纱布把被毛浸湿，再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛。不可用手提起被毛，以免剪破皮肤。剪下的毛应集中放在一容器内，防止到处飞扬。给狗、羊等动物采血或新生乳牛放血制备血清常用此法。
(二)拔毛法：拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳缘静脉注射或尾静脉注射时常用此法。
(三)剃毛法：剃毛法是用剃毛刀剃去动物被毛的方法。如动物被毛较长，先要用剪刀将其剪短，再用刷子蘸温肥皂水将剃毛部位浸透，然后再用剃毛刀除毛。本法适用于暴露外科手术区。
(四)脱毛法：脱毛法是用化学药品脱去动物被毛的方法。首先将被毛剪短，然后用棉球蘸取脱毛剂，在所需部位涂一薄层，2～3分钟后用温水洗去脱落的被毛，用纱布擦干，再涂一层油脂即可。
适用于狗等大动物的脱毛剂配方为：硫化钠10g，生石灰15g，溶于100ml水中。
适用于兔、鼠等动物的脱毛剂的配方为：1. 硫化钠3g,肥皂粉1g,淀粉7g,加适量水调成糊状；2. 硫化钠8g,淀粉7g，糖4g，甘油5g，硼砂1g,加水75ml；3. 硫化钠8g溶于100ml水中。
二、实验动物的给药
在动物实验中，为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化，常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法多种多样，可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。
(一)注射给药法
1. 皮下注射注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；兔在背部或耳根部注射；蛙可在脊背部淋巴囊注射；狗多在大腿外侧注射，拔针时，轻按针孔片刻，防药液逸出。
2. 皮内注射此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的放射性同位素溶液、颜料或致炎物质、药物等注入皮内，观察其消失速度和局部血液循环变化，作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是：将动物注射部位的毛剪去，消毒后，用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内，然后使针头向上挑起并再稍刺入，即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时,常采用肌肉注射。肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位，多选臀部。注射时针头要垂直快速刺入肌肉，如无回血现象即可注射。给大、小鼠作肌肉注射时，选大腿外侧肌肉进行注射。
4. 腹腔注射先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒，然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进约0.5厘米，再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注射是将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。
6. 淋巴囊注射蛙类常采用此法,其皮下有数个淋巴囊，注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头部淋巴囊常作为蛙类给药途径。一般多选用腹部淋巴囊给药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入，经大腿肌层入腹壁肌层，再进入腹壁皮下，即进入淋巴囊，然后注入药液。
(二)经口给药法
1. 口服法：把药物放入饲料或溶于饮水中让动物自动摄取。此法优点在于简单方便，缺点是不能保证剂量准确。一般适用于对动物疾病的防治或某些药物的毒性实验，制造某些与食物有关的人类疾病动物模型。
2. 灌胃法：在急性实验中,多采用灌胃法。此法剂量准确。灌胃法是用灌胃器将所应投给动物的药灌到动物胃内。灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。小鼠的灌胃针长约4～5cm，直径为1mm，大鼠的灌胃针长约6～8cm，直径约1.2mm。灌胃针的尖端焊有一小圆金属球，金属球为中空的。焊金属球的目的是防止针头刺入气管或损伤消化道。针头金属球端弯曲成20°左右的角度，以适应口腔、食道的生理弯曲度走向。
(三)其它途径给药方法
1. 呼吸道给药：呈粉尘、气体及蒸气或雾等状态的药物或毒气,均需要通过动物呼吸道给药。如实验时给动物乙醚作吸入麻醉、用锯末烟雾制作慢性气管炎动物模型等，特别在毒理学实验中应用更为广泛。
2. 皮肤给药：为了鉴定药物或毒物经皮肤的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等，均需采用经皮肤给药方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面积的皮肤脱毛后，将一定的药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。
3. 脊髓腔内给药：此法主要用于锥管麻醉或抽取脑脊液。
4. 脑内给药：此法常用于微生物学动物实验,将病原体等接种于被检动物脑内，然后观察接种后的各种变化。
5. 直肠内给药：此种方法常用于动物麻醉。兔直肠内给药时,常采用灌肠的胶皮管或用14号导尿管代替。
6. 关节腔内给药：此法常用于关节炎的动物模型复制。

5. 5.列表比较实验动物、在微生物学控制+上+和遗传学控制方面

摘要 常用实验动物：

6. 如何对实验动物进行微生物学控制

按微生物学质量控制的程度或根据微生物净化程度分类,可分为五类：
（1）普通动物（conventional animals）：亦称一级动物,在微生物学控制上要求最低的动物,它要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病的病原.因价格低,故教学实验中常用之.
（2）清洁动物（clean animals）：亦称二级动物,除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原.
（3）无特殊病原体动物（specific pathogen free animals）：亦称三级动物,是指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在,但带有非特定的微生物和寄生虫的动物.此类动物应排除一、二级动物所排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科研实验干扰大的病原.
（4）无菌动物（germ free animals）：是指在动物体内外的任何部位都检不出一切生命体的动物.这类动物系在无菌条件下剖宫产出,又饲养在无菌、恒温、恒湿的条件下,食品饮料等全部无菌.
（5）悉生动物 （gnotobiotes animals）：是指机体内带着已知微生物的动物.此种动物原是无菌动物,系人为将指定微生物丛投给其体内,例如使大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时仅能检出大肠杆菌.
依据GB14922-2001《实验动物微生物学等级及监测》划分的实验动物等级,并与寄生虫学等级对应,将实验小鼠和大鼠的微生物等级分为清洁级、无特定病原体级（SPF）和无菌级三个级别,普通级的实验小鼠和大鼠原则上不再使用；豚鼠、地鼠和兔分为普通级、清洁级、SPF级和无菌级四个级别.犬和猴分为普通级和SPF级二个级别.
…………更多内容参见on http://doc.bio1000.com/list-16.html 微生物学技术,病毒分离,病毒图片,真菌培养,真菌繁殖,酵母培养,培养基配制方法

7. [急]举例说明生产和加工中控制微生物的手段

在饲养动物的环境中及动物的体表、粘膜和消化道内容物中，均存在着大量种类繁多的微生物和寄生虫，如何控制微生物是特别重要的。一个优良品系的“模型动物”的生产群或实验群，往往由于感染了致病性微生物或寄生虫而全部覆灭并使实验失败的例子是屡见不鲜的。目前,通过微生物学的监察手段,按对微生物控制的净化程度,把实验动物区分为无菌动物、悉生动物和特殊病原体动物和清洁动物四类。

1．无菌动物（Germ free animals）是指机体内外均无任何寄生物（微生物和寄生虫）的动物。此种动物在自然界中并不存在，必须用人为的方法培育出来。其法：一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后，立即浸泡在37℃灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子宫内首先应无菌），将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中，切开子宫取胎，经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐（电刀切断）后，放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。象小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦，故采用保姆代养较为方便。而象豚鼠因在一定程度上能自力饮乳，故人工哺乳较容易。另外，象禽类、鱼类、昆虫类，因是在卵中无菌的前提下进行的，故用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化即可，而且，这些动物一般在在出生后能自力采食，故较易育成。

2．悉生动物（Cnotobiotes animals）是指机体内带着已知微生物（动物或植物）的动物。此种动物原是无菌动物，系人为的将指定微生物丛投给其体内，例如使大肠杆菌定居在无菌小鼠体内，在进行微生物检查时，仅能检出大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌（Monoxenie）、双菌（Dixenie）、三菌（Trixenie），或多菌（Polyxenie）动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的，但因其带有已知的微生物，故隔离器内有微生物及其代谢产物的污染。例如，人工投给的微生物，除可在饮水中增殖外，还能在隔离器内放出大量的氨气。

3．无特定病原体动物（Specefic pathogen-free animals）是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，简称SPF动物。但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的，故其实际上就是指无传染病的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗，或用淘汰带菌动物来作出SPF动物的方法并不实用（既浪费时间，又难保确实除去病原）。故一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后，再把其转移到有封闭系统（Barrier System）的设施中饲育繁殖。原则上SPF动物室内是不允许存在病原菌的，但在封闭系统环境中，难免有很多非病原性微生物会逐渐进入动物机体内，故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。SPF动物的祖先是无菌动物，按理来说，无菌动物的子宫内和卵中应该是无菌的，然而，有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的，因此，在作出无菌动物和SPF动物之前，必须充分考虑这个问题。

4．清洁普通动物（Clean conventional animal,CCV）（亦称最低限度疾病动物MOA）或称清洁动物（Clean animal,CL）

来自屏障系统的SPF动物，饲养在设有两条走廊的，温湿度恒定的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水pH为2.5～2.8，鼠盒上带过滤帽，空气亦应经过一定的过滤，工作人员穿干净服装操作，此类动物的微生物控制标准基本与SPF相同，不同之处为血清病毒抗体检查（脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒……）经常可检出一定滴度的抗体，但不允许出现临床症状和脏器的病理变化和自然死亡。

普通动物（Conventioal animals）是未经积极的微生物学控制，普遍地饲养在开放卫生环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒，饮水为自来水，不喂青饲料。鼠应排除肺炎病毒，沙门氏菌和链球菌，地鼠不应有蛲虫。普遍动物只能供教养和一般性实验，不适用于研究实验。

鲜切蔬菜褐变及微生物的控制
一、褐变的控制：
在鲜切蔬菜加工中，热处理会对组织产生伤害，从而加速产品的败坏。而采用亚硫酸盐处理，又会造成二氧化硫的残留，对人体产生一些不良的影响。因此，在鲜切蔬菜加工中，必须采用其他的方法来抑制酶褐变的发生。
1.化学方法。有望取代亚硫酸盐抑制酶褐变的化学药剂，主要有柠檬酸、抗坏血酸、半胱氨酸、4-已基间苯二酚等。如对去皮切片马铃薯，用0.5%半胱氨酸加2%柠檬酸浸泡3分钟，可爱效控制褐变的发生。采用PH值为5.5的抗坏血酸钠、半胱氨酸及乙二胺四乙酸（EDTA）混合液处理，可有效控制蘑菇的褐变。鲜切茎用莴苣圆片，用1%-5%醋酸溶液或用醋酸含量为6%的食醋处理，都可有效地抑制产品在冷藏和流通期间褐变的发生。
一般防褐变的化学处理，都要包装前进行，并且以几种药剂混合浸渍处理的效果比较好。用防褐变药剂结合可食性涂膜处理，则能取得更好的效果，如鲜蘑菇切片用含1%抗坏血酸和0.2%EDTA的可食膜处理，比单独使用化学防褐变剂或可食性膜包装，都能更有效控制酶褐变的发生。
2.物理方法。鲜切蔬菜采用低氧和高二氧化碳气调包装，可有效控制产品贮藏期间酶褐变的发生。一般适宜的氧气浓度为2%-10%，二氧化碳浓度为10%-20%。如切片马铃薯用20%的二氧化碳加80%的氮气进行气调包装，可有效地控制贮藏期间褐变的发生。
3.酶法。这种方法，是利用蛋白酶对多酚氧化酶的水解作用，从而抑制其活性和酶褐变的发生。目前已分别从无花果、番木瓜和菠萝占提取得到三种蛋白酶，即ficin、papain和bromelain，它们都能有效控制酶褐变的发生。如用ficin抑制马铃薯的褐变，其作用与亚硫酸盐相当。因为菠萝中含有蛋白酶，故使用菠萝汁处理鲜切苹果片，也可有效抑制产品的褐变。
二、微生物生长的控制：
生产上控制微生物的生长的方法主要有以下几种：
1.创造低温条件。造成低温环境，可有效抑制微生物的生长，从而达到保持品质，延长货架期的目的。因此，在鲜切蔬菜的加工、贮存和流通过程中，应尽可能创造适宜的低温条件，一般为0-5℃。
2.使用化学防腐剂。醋酸、苯甲酸、山梨酸及其盐类，可有铲地抑制微生物的生长繁殖。这对那些在低温下仍能生长的腐败菌和致病菌，是一个很有效的控制措施。
3.实行气调包装：采用适当的低氧和高二氧化碳气调包装，能抑制好气性微生物的生长。但是，必须注意避免缺氧环境，防止厌氧微生物的生长和产品本身的无氧酵解而产生异鼓掌。
4.降低PH值。鲜切蔬菜组织的PH值一般为4.5-7.0，正适合于各种腐败菌和致病菌的生长。在鲜切蔬菜中加入适当的醋酸、柠檬酸和乳酸等，可降低蔬菜组织的PH值，抑制微生物的生长繁殖。但一定要掌握好用量。否则，过多的酸会破坏新鲜蔬菜本身的风味。
5.应用生物防腐剂。生物防腐剂，是指来自植物、动物及微生物中的一类抗菌物质。由于鲜发蔬菜为即食产品，化学防腐剂的应用受到一定限制，因此来自生物的天然防腐剂的研究和应用，便日益受到重视。现已发现，乳酸菌的代谢物细菌素或类细菌素，能有效地抑制鲜切蔬菜中嗜水气单胞菌和单核李氏杆菌等有害微生物的生长。

在孵化生产过程中加强对病原微生物的控制
各种病原微生物遇到适宜的环境条件就会迅速而大量地繁殖， 孵化场适宜的孵化温度和湿度为微生物的繁殖提供了良好的条件， 而病原微生物一旦感染了胚胎或雏鸡，就会造成胚胎的早期死亡及雏鸡产品质量的低劣， 轻者造成经济效益的下降，重者威胁孵化场的生存。 可见加强孵化生产过程中的病原微生物控制，已成为孵化场管理工作中最重要的内容。
一、严格控制病原微生物的来源
1.种蛋种蛋要求来自无疫情的健康鸡群所提供， 但在种蛋产出过程中仍有可能被病原微生物污染，除了要求种蛋在种鸡场经过消毒外， 运至孵化场后必须以3倍量的甲醛、高锰酸钾熏蒸消毒1次，经化验总菌数小于20个， 其中主要致病菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌含量为0，方可放入蛋库贮存。种蛋入孵后，每周对种蛋进行1倍量的甲醛、高锰酸钾熏蒸消毒，以控制细菌的生长。
2.人体人体是病原微生物的主要载体之一， 要求外来人员一律拒绝进入孵化场生产区，本场工人每天入车间要求消毒、淋浴，更换清洗消毒后的工作服、帽子、口罩、拖鞋，出车间也要求淋浴。车间的脏、净区不能串岗， 特殊情况由脏区到洁净区需要淋浴更衣。在接触种蛋、雏鸡前，要先洗手消毒才能操作，无论工作或休息时，严禁对种蛋、雏鸡咳嗽、打喷嚏、吐痰， 以减免细菌的传
播。
3.车辆严禁外来车辆进入场区，本场运蛋车入场要求喷洒消毒， 司机下车通过消毒通道方可进入场区，在卸种蛋过程中，司机不许下车。 运蛋车不准许运输除种蛋之外的其他物品，车厢要求每周至少熏蒸消毒1次。
4.用具孵化场所有用具，如蛋筐、蛋盘、拖布、扫帚等物品， 一经外界进入场区都要消毒后方可使用，以控制由于用具不洁造成病原微生物的传播。
5.包装材料孵化场所用的主要包装材料为雏鸡盒，入场区后要先放入距生产区50米远的库房中先进行薰蒸消毒后才可使用， 严禁任何未经消毒的包装物品进入生产区域。
6.空气空气携带病原微生物更有其随意性， 所检测的大部分病原微生物都是由空气带入的，由于蛋库、孵化厅特定的环境要求有大量的空气流通， 此环节的控制往往成为难点。在管理中，要求对进气孔、过滤网每周不少于3次的卫生清理，尤其对孵化、出雏器的进、出风口要时常保持清洁， 以防细菌循环传播。
二、控制病原微生物的繁殖
由于孵化场特定的温室、湿度等条件， 为细菌繁殖提供了较理想的场所，这就要求管理者从孵化过程的各个环节入手，及时检测细菌的生存状态， 采取各种有效措施切断病原微生物的传播渠道。除了以上所述， 从种蛋入场区严格控制开始，还要注意保持孵化器的清洁卫生，每周不少于2次进行彻底擦拭，尤其进、出风口处，不允许有灰尘。孵化、出雏厅的四周墙壁、地面， 每周不少于3次彻底用消毒液清理，要求所检测的细菌总数不超过32个。出雏后要认真冲洗出雏器，不允许留有异物，消毒要完全彻底，出雏盘要冲洗干净，消毒彻底，以防病原微生物污染下批鸡雏。每次出雏后，要对出雏场地进行彻底清洗、 消毒。由于孵化生产过程有其循环性，因此，要求鸡蛋、入孵、冲洗、 出雏任何一个环节的卫生消毒工作都要做得全面、彻底， 才能从整体上切断病原微生物的传播途径，降低其生存数量，最终达到提高雏鸡质量、增加经济效益的目的。

其他信息参考
http://www..com/s?wd=%CE%A2%C9%FA%CE%EF%B5%C4%BF%D8%D6%C6&lm=0&si=&rn=10&ie=gb2312&ct=0&cl=3&f=1&rsp=1

8. 如何保证实验动物出现的变化只能用于实验要探究的因素引起的

环境因素对实验动物机体具有“有利”和“有害”两个方面的作用。一方面环境因素是实验动物生存的必要条件，动物通过新陈代谢同周围环境不断地进行物质和能量交换，同时动物经常接受外界环境刺激产生免疫反应增强体质，促进生长；另一方面环境因素也存在对动物机体有害的各种因素，动物处于有害因素作用下，虽然有一定适应环境变化的能力或产生免疫反应来消除或减轻这些有害因素的作用，但是有害因素作用超过一定水平，就会对动物机体产生直接或间接危害，动物各种功能就会失调，引起各种疾病甚至死亡。环境条件不仅影响实验动物的质量,而且还直接影响动物实验的科学性、动物反应的敏感性和实验结果的可重复性，所以必须严格控制实验动物的环境条件。
实验动物设施是作为饲养和管理实验动物场所中较大的居住因素。因此，在充分考虑到动物的同时，也要注意到从事实验的研究人员及实际操作的饲养技术人员的安全。还应当考虑到设施周围的公共卫生。在建筑施工时，不仅应有防震、防火的安全措施，还应有空调的自动控制和报警等设备。由于存在选址条件和建筑方面的法令制度以及经济方面等种种原因的牵制因素，所以作为从设计阶段作出综合性判断的总设计者，应该反复与有关实验动物方面的技术人员、实验人员、设计人员等进行充分的商讨。
1. 隔离系统(Insulation system) 是以隔离器(Isolator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。工作人员通过隔离器上组装的无菌手套进行操作,不直接接触动物。送入隔离器的空气需经超高效过滤，洁净度达到100级，饲料、饮水、垫料、笼具等都应高压高温灭菌。一切物品的移入均需通过灭菌渡舱，并事先包装消毒。

2. 屏障系统(Barrier system) 这是饲养SPF动物的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格的微生物控制。送入的空气需经初、中、高效三级过滤，洁净度达到10000级，饲料、饮水、垫料经灭菌后方可使用。饲养人员进入屏障系统需经充分淋浴，然后穿上无菌工作服、戴口罩和手套。要利用空气压力差防止污染,即清洁区域（如清洁走廊、SPF动物饲养室、清洁消毒用品贮存室等）空气压力要大于污染区域。在屏障设施内一切操作要实行严格的微生物控制，因为屏障系统内要长期饲养SPF动物,保持不被污染，而人员、物品要经常出入,其中人员又不能彻底灭菌,所以人是最大可能的污染源，因此，对人员的要求要特别严格，要有严密的操作细则。

3. 亚屏障系统(Semi-barrier system) 这是饲养目前我国正在推行的清洁级动物的设施。其送入饲养室的空气也必须经过净化处理，经初、中、亚高效过滤，空气洁净度要求达到100000级。对人、动物、物品等出入的管理与屏障系统大致相同。

近年来空气净化技术发展迅速，种种类型的水平或垂直超净层流架及屏障单元，可以代替净化、屏障的饲养室。工作人员不须淋浴只需要消毒手臂,戴灭菌手套即可操作,这样就大大地简化了进入屏障和亚屏障系统建筑内的复杂程序。此外，由于屏障只维持于笼架的小范围，局部空气净化可以达到很高的要求，在这样小范围内饲养SPF 级或清洁级动物是有一定保证的。

4. 开放系统(Open system) 只能饲养普通级实验动物。它是无空气净化装置的饲养系统，但并非不需要进行严格的环境控制和积极的微生物控制，仍需维持对环境条件的基本要求。饲料、饮水和垫料要求不被污染，饲养室内要有防鼠、防昆虫等措施。

开放系统的各动物室的笼具可以集中洗刷和消毒。经过消毒处理的物品与污染的物品的进出要通过不同路线，并要分开堆放，杜绝交叉。

9. 实验动物遗传学和微生物质量的标准化在实验动物设计有什么意义

实现实验动物标准化（质量控制）应从控制实验动物的遗传、微生物和寄生虫、营养、环境等四方面着手。
实验动物按遗传学控制分类可分为近交系动物、杂交群动物、封闭群动物。实验动物具有明确遗传背景并严格遗传控制的动物，遗传因素会对实验结果进行干扰，甚至通过改变实验动物的遗传结构，使某些特定实验能顺利开展。很多生命科学的研究，要求实验动物的遗传结构有较高的同一性、稳定性和纯合度。
实验动物按微生物控制可分为无菌动物（悉生动物）、无特定病原体（SPF）动物、清洁动物和普通动物。微生物感染对人、动物和实验的影响：（1）引起人畜共患病，影响工作人员的身体健康。（2）引起动物传染病，影响均衡生产，影响动物健康和质量。（3）严重干扰实验结果的可靠性、准确性、重复性。（4）污染环境
实验动物在实验设计的过程中，要对实验动物的遗传学和微生物学进行严格控制，清楚所采用的实验动物遗传学和微生物学特性，有针对性的进行实验设计，保证实验结果的准确性、精确性、可重复性。

10. 对实验动物进行微生物学控制的意义何在

防止外来生物和杂菌的干扰，保证实验的可靠性/准确性。另外，更为重要的是保护自己乃至他人，使人乃至环境免受病原微生物的影响。