㈠ 测量微生物生长的方法有哪些
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2微生物生长量的测定微生物特别是单细胞微生物,体积很小,个体生长很难测定,意义也不大。通常测定微生物的生长是测群体的生长,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。2.1测生长量测定生长量的方法有许多种,适用于一切微生物。2.1.1直接法2.1.1.1测体积它是一种较为粗放的方法,通常用于初步比较用。例如将待测培养液放在刻度离心管中作自然沉降或进行一定时间的离心,然后观察沉降物的体积。2.1.1.2称干重采用离心法或过滤法测定,一般干重为湿重的10%~20%。如用离心法,将待测培养液离心,再用清水洗涤离心1~5次后干燥,可用105℃、100℃或红外线烘干,也可在较低的温度(80℃或40℃)下进行真空干燥,然后称干重。如细菌一个细胞一般重10-12~10-13g。如为丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜进行过滤。过滤后,细胞可用少量水洗涤,再真空干燥(40℃以下),称干重。以乳酸菌为例,在液体培养基中,细胞的浓度大约为2×108个/ml。100ml培养物可得10~70mg干重的细胞。2.1.2间接法2.1.2.1生理指标法与生长量相平行的生理指标很多,它们均可用作生长测定的相对值。1)测定细胞总含氮量来确定细菌浓度大多数细菌的含氮量为干重的12.5%,酵母菌为7.5%,霉菌为6.0%。总氮量与细胞粗蛋白的含量(因其中包括了杂环氮和氧化型氮)的关系可用下式计算:粗蛋白总量=含氮量%×6.25含氮量的测定方法有很多,常用凯氏定氮法。此法适用于细胞浓度较高的样品,同时
㈡ 求MRS培养基上乳酸菌菌落形态
这个形态描述在国家标准GB/T 4789.35-2008里曾有过描述,是这样:
菌落呈圆形,中等大小,凸起,微白色,湿润,边缘整齐,直径为3mm士1mm,菌落背面为黄色。
不过这个标准已经作废了,新的标准不需要观察MRS培养基上乳酸菌菌落形态。
㈢ 微生物在液体培养基中培养怎么看其是否存活
如果是真菌的话,会出现大量菌丝,培养基不浑浊,并且会出现大量的菌球。如果是细菌的话,培养基会出现浑浊现象。最好在24小时内进行镜检。
㈣ 液体培养基中什么现象表示有微生物生长
变色、浑浊、产气:比如说大肠杆菌发酵乳糖胆盐培养基(液体培养基),会由紫变黄,同时浑浊,有气体产生
表面有菌膜:比如说绿脓杆菌在SCDLP液体培养基中增菌时,表面会生成一层蓝绿色或黄绿色的菌膜。
上面单指液体培养基,如果是在其他液体的话就很多了,变色、浑浊、产气、絮凝、变稀、破乳等等,其实很好比较,留一管液体培养基做对照,有异常变化的肯定是有微生物生长了
㈤ 测定微生物的生长曲线有几种方法要配置怎么的培养基。。。求详解!!!谢谢
首先回答你的第二个问题——配制怎样的培养基。这具体要看你培养什么菌种而定。很多微生物有自己的特定培养基,或最适培养基。譬如大肠杆菌可以用LB或TB,酵母可以用YPD,细菌可以用营养肉汤等。
至于生长曲线的测定,一般是用如下方法:取菌种接种到对应培养基中(500ml三角瓶装100ml培养基),合适的温度和转速培养。每隔一定时间取样检测OD值。
每种微生物的生长曲线虽说都是经历四个阶段,趋势一样,但是其各个阶段所处的时间长短是不一样的,所以,在取样时间上应该根据菌种的生长特性来调整。
㈥ 关于MRS培养基
乳酸细菌培养基(MRS)
蛋白胨 10.0 g
牛肉膏 10.0 g
酵母膏 5.0 g
柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7] 2.0 g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g
吐温80 1.0 mL
乙酸钠(CH3COONa·3H2O) 5.0 g
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 2.0 g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.58 g
硫酸锰(MnSO4·H2O) 0.25 g
琼脂 18.0 g
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.2~6.6
当乳酸菌生长代谢出乳酸后,会使pH下降而使颜色由绿变为黄绿,也由于pH值降低再加上抗生素及厌氧培养的作用,所以一般的微生物不容易在此培养基上生长,因此十分容易鉴别乳酸菌。
㈦ 设计实验,判断微生物处于哪一生长阶段急~~~
1.菌体大小观察
2.培养过程中需氧量、糖类等的消耗量以及PH变化情况。
3.不同阶段产生的代谢产物是不同的,如果你比较了解目标菌,应该可以根据代谢产物来判断。
拙见,见笑,见笑。
㈧ 如何判断以培养基用来培养何种微生物
知道了培养基的物质组成以及其中一些物质的特殊作用,再结合微生物对营养的需求以及特殊需求或特性就可判断培养基能培养何种微生物了。
㈨ 微生物的培养基
培养基:按照微生物生长繁殖或产生代谢产物所需要的各种营养物质,人工配制而成的营养基质。
1.1培养基的设计原则
1)目标明确(微生物类型、种子、发酵、分离、保藏)
明确培养基的用途,如用于培养何种微生物,培养的目的如何,是培养菌种还是用于发酵生产,发酵生产的目的是获得大量菌体还是获得次级代谢产物等,根据不同的菌种及其不同的培养目的确定搭配的营养成分及营养比例。
营养的要求主要是对碳素和氮素的性质,如果是自养型的微生物则主要考虑无机碳源,如果是异样型的微生物,主要提供有机碳源物质;除碳源物质外,还要考虑加入适量的无机矿物质元素;有些微生物菌种在培养时还要求加入一定的生长因子,如很多乳酸菌在培养时,要求在培养基中加入一些氨基酸和维生素等才能很好地生长。
2)营养协调
--6大营养要素的适合比例
--尤其C/N比 (分离:细菌约4/1;酵母约6/1;霉菌约8/1)
除营养物质要求外,还要考虑营养成分的比例适当,其中碳素营养与氮素营养的比例很重要。C/N 比是指培养基中所含 C 原子的摩尔浓度与 N 原子的摩尔浓度之比,不同的微生物菌种要求不同的 C/N 比,同一菌种,在不同的生长时期也有不同的要求,一般 C/N 比在配制发酵生产用培养基时,要求比较严格, C/N 比例对发酵产物的积累影响很大;一般在发酵工业上,发酵用种子的培养,培养基的营养越丰富越好,尤其是 N 源要丰富,而对以积累次级代谢产物为发酵目的的发酵培养基,则要求提高 C/N 比值,提高 C 素营养物质的含量。
3)合适的理化条件
除营养成分外,培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
◆ pH(内源调节、外源调节)
微生物一般都有它们适宜的生长pH 范围,细菌的最适pH 一般在pH 7~8范围,放线菌要求pH 7.5~8.5范围,酵母菌要求pH 3.8~6.0, 霉菌的适宜pH 为4.0~5.8。
由于微生物在代谢过程中,不断地向培养基中分泌代谢产物,影响培养基的pH变化,对大多数微生物来说,主要产生酸性产物,所以在培养过程中常引起pH的下降,影响微生物的生长繁殖速度。为了尽可能地减缓在培养过程中pH的变化,在配制培养基时,要加入一定的缓冲物质,通过培养基中的这些成分发挥调节作用,常用的缓冲物质主要有以下两类:
3)合适的理化条件
除营养成分外,培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
----pH(内源调节、外源调节)
----渗透压
----水活度(相对湿度)
----氧化还原电位(V, mV)
好氧菌:>0.3 V; 厌氧菌<0.1V
4)成本
1.2培养基的设计方法
1)生态模拟
2)参照文献进行适当修改
3)试验比较
----单因子比较选择出主要C、N源、
无机 盐等
----正交试验确定适宜的浓度
2 培养基的种类
根据培养基的成分:天然培养基 组合培养基 半组合培养基
根据培养基的功能分:加富性选择培养基 抑制性选择培养基
(根据某些微生物的营养要求或对某些化学物质敏感性不同设计而成、有利于所分离微生物的生长或抑制它种微生物,从而达到选择分离目的的培养基。)
(1)加富性选择培养基
----纤维素培养基:富集纤维素分解菌
----阿什贝培养基:富集好氧性自生固氮菌
----Martin培养基:富集土壤真菌
(2)抑制性选择培养基
在培养基中加入抑制性物质
细菌:庆大霉素、青霉素、链霉素、四环素
G+:胆盐
真菌:制霉菌素、放线菌酮
2 鉴别性培养基
一类在培养基中加入能与目的菌无色代谢物发生显色反应的指示剂,从而达到用肉眼辨别颜色就能方便地鉴别某种微生物的培养基。
---- 伊红美蓝乳糖培养基(EMB)
1)伊红、美蓝两种苯胺染料对G+和部分G-抑制作用
2) 伊红、美蓝在低酸度下结合并形成沉淀起产酸指示作用
3)大肠杆菌发酵乳糖产酸
菌落区别于不利用乳糖的其它肠杆菌,菌落呈深紫色,并有金属光泽。
4)大肠杆菌产酸强
菌落区别于利用乳糖产酸弱的其它肠道菌,产酸力弱的肠道菌的菌落呈棕色。