药物生物活性如何测定

⑴ 如何进行农药抑菌活性测定

我是做微生物的，我想你问的应该是微生物学中的“抑菌试验”。有几种：纸片法、牛津杯法等，但原理都是一样的，纸片法做起来比较简单，不用特殊的材料，可能比较适合你：

1.把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5cm直径的圆片，装在试管中密封灭菌（121度，20分钟）。
2.将已经培养好的菌制成一定浓度的悬浮液，取1ml该菌悬液至灭过菌的（121度，20分钟）培养皿中，倒入适量（约4毫米厚吧）已灭菌的培养基（温度约45度，用手摸瓶壁不感觉烫手即可），轻轻转动培养皿，使培养基与菌液混匀，静置凝成平板。
3.将用于试验的农药配制成几个所需的浓度，用无菌镊子夹起一片滤纸放入药液中浸透，夹出时在容器边缘停靠片刻，滤掉多余的药液，把滤纸片放在平板中凝好的培养基的中心，用镊子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴。
4.按上述方法，每个浓度做3个重复，以灭菌水浸湿的滤纸片做空白对照。
5.在适当温度下培养一定时间后观察，用直尺或游标卡尺测量抑菌圈的大小，计算抑菌率就OK了！

希望能对你有帮助，有什么问题可以短消息我：）

⑵ 如何进行ALK抑制剂Ceritinib的生物活性实验

药物描述：

LDK378是一种有效的ALK抑制剂，IC50为0.2
nM，作用于IGF-1R和InsR，选择性分别为40和35倍。Phase
3。
体外研究：

LDK378作用于Ba/F3-NPM-ALK和Karpas290细胞，具有显着的抗增殖活性，IC50分别为26.0
nM
和
22.8
nM,作用于Ba/F3-Tel-InsR
和Ba/F3-WT细胞，IC50分别为319.5
nM
和
2477
nM。
体内研究：

LDK378
用于降低形成反应代谢的可能性，在肝微粒体几乎检测不到谷胱甘肽（GSH）加合物的水平（<1％）。LDK378具有相对良好的代谢稳定性，中度抑制CYP3A4（Midazolam底物）和抑制hERG。LDK378处理动物，与肝脏血流量相比，具有低的血浆清除率（小鼠，大鼠，狗和猴），处理小鼠，大鼠，狗和猴的口服生物利用度都在55％以上。

⑶ 药品领域的微生物检测及标准

中国药典微生物限度检查法，为《中国药典》附录收载的关于药品微生物检查的法定方法。药品的不同剂型的微生物检测标准不同，具体如下：

1、制剂通则品种

制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法规定。

2、口服给药制剂

细菌数每1g不得过l000cfu。每lml不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每lg或lml不得过100cfu。

大肠埃希菌每1g或lml不得检出。

3、耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g、lml或l0cm²，不得过10cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、lml或l0cm²不得检出。

大肠埃希菌鼻及呼吸道给药的制剂，每1g、lml或l0cm²，不得检出。

4、阴道、尿道给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。

霉菌数和酵母菌数每1g、lml或l0cm²应小于10cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²，不得检出。

5、直肠给药制剂

细菌数每1g不得过l000cfu。每lml不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g或lml不得过100cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每lg或lml不得检出。

6、其他局部给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g、lml或l0cm²不得过100cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、lml或l0cm²不得检出。

7、含动物组织

含动物组织（包括提取物）的口服给药制剂每10g或10ml还不得检出沙门菌。

8、兼用途径制剂

应符合各给药途径的标准。

(3)药物生物活性如何测定扩展阅读

微生物限度检查法的注意事项：

1、当建立产品的微生物限度检查法时，应进行控制菌检查方法的验证，以确认所采用的方法适合于该产品的控制菌检查。若产品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，检查方法应重新验证。

2、检查项目应当包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。

3、微生物限度检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。

4、检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

5、除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23℃～28℃。

6、检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。

⑷ 简述酶法分析生物药物和基因工程药物的原理，主要有哪些方法

酶分析法在生物药物分析中的应用主要有两个方面：第一，以酶为分析对象，根据需要对生物药物生产过程中所使用的酶和生物药物样品所含的酶进行酶的含量或酶活力的测定，称为酶分析法；第二，利用酶的特点，以酶作为分析工具或分析试剂，用于测定生物药物样品中用一般化学方法难于俭测的物质，如底物、辅酶、抑制剂和激动剂(活化剂)或辅助因子含量的方法称为酶法分析。

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特定及优势

而如果有仅作用于被测物质的酶，利用酶的特异性，不需要分离就能辨别试样中的被测组分，从而对被测物质进行定性和定量分析。所以，酶法分析常用于复杂组分中结构和物理化学性质比较相近的同类物质的分离签定和分析，而且样品一般不需要进行很复杂的预处理。酶法分析具有特异性强，干扰少，操作简便，样品和试剂用量少，测定快速精确，灵敏度高等特点。通过了解酶对底物的特异性。可以预料可能发生的干扰反应并设法纠正。在以酶作分析试剂测定非酶物质时，也可用偶联反应；而且偶联反应的特异性，可以增加反应全过程的持异性。此外，由于酶反应一般在温和的条件下进行，不需使用强酸强碱，它还是一种无污染或污染很少的分析方法。很多需红使用气相色谱仪、高压液相色谱仪等贵重的大型精密分析仪器才能完成的分析检验工作，应用酶法分析方法即可简便快速地进行。酶法分析目前主要广泛应用于医药、临床、食品和生化分析检测中，如尿素、各种糖类、氨基酸类、有机酸类、维生素类、毒素等物质的定性和定量分析。

⑸ 生物活性的种类有哪些评价这些活性的参数有哪些呢

喹诺酮类药物的药效学研究
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来源：中国医学论坛报 时间：2003.10.15

药效学作为一门科学受到广泛关注。抗生素杀菌作用分为浓度依赖性和时间依赖性两种不同方式。浓度依赖性杀菌抗生素（包括氨基糖甙类、喹诺酮类，甲硝唑）的活体试验中的数据，可用24小时曲线下面积（AUC）／最小抑菌浓度（MIC）比值和峰值／MIC比值来描述。而与时间依赖性杀菌的抗生素（如β－内酰胺酶类、大环内酯类等）的治疗效果最相关的参数是t＞MIC。

喹诺酮类药物的峰值／MIC和24小时AUC／MIC比值与治疗结果密切相关。能使临床结果有所改善的峰值／MIC比值约为10～12。也推荐峰值／MIC比值作为出现耐药菌株时的药物选择参数。对于该类中的许多药物而言，增加其剂量使之超过常规值时其发生不良事件的可能性也随之升高。所以，这个比值并不能常作为最佳的优化参数，除非该病原体相对敏感。

最佳的药效学目标值是与特定病原体相关的，可以用24小时AUC／MIC比值预测临床治疗结果。治疗革兰阴性肠杆菌和假单胞菌感染时，24小时AUC／MIC比值≥125与最佳临床治愈率相关；而对于革兰阳性菌， 24小时AUC／MIC比值要低，但需要同时考虑到游离药物浓度。

由于喹诺酮类药物的高生物利用度，无论静脉给药还是口服给药均可获得相似的药效学关系，在新一代喹诺酮类药物中同样如此。蛋白结合率的程度不仅影响药物对组织的渗透能力，也决定了在感染部位可以对细菌起作用的药物剂量。在药效学分析中应用到的药代动力学参数应是反映游离药物（活性药物）的浓度，而不是总体药物浓度（表1）。

表1． 主要喹喏酮类药物的药代动力学参数

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参数 诺氟
沙星 环丙
沙星 左氧
氟沙星 斯帕
沙星 加替沙星
(天坤) 莫西
沙星 曲伐
沙星 吉米
沙星

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剂量(mg) 400 750 500 200 400 400 200 320
生物利用度(%) 50 70 99 92 96 90 88 80
蛋白结合率(%) 15 25 30 40 20 55 75 59
峰浓度(μg/ml) 1.2 3.5 6 1.3 4.3 4.5 2.3 1.48
游离峰浓度(μg/ml) 1.3 2.6 4.2 0.8 3.4 2.0 0.6 0.6
AUC(0～24)(μg/h/ml) 13.6 64 47.5 17.7 51.3 48 31.2 9.3
游离AUC(0～24)(μg/h/ml) 11.6 48 33.3 10.6 41 21.6 7.8 3.8
T1/2 3.3 4 6 20 9 12 12 7.4
%肾清除率（活性药物） 40 60 95 10 85 20 6 30

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肺炎链球菌体外感染模型显示：左氧氟沙星和环丙沙星的24小时AUC／MIC比值范围在大约30左右与4倍log杀菌作用（即杀灭99．99％的细菌）相关，而24小时AUC／MIC比值范围小于30时杀菌作用显着下降，并在某些情况下细菌出现重新生长。非粒细胞减少感染动物模型研究数据支持了以上这些观察结果，并提示抗生素24小时AUC／MIC比值为25时，治疗肺炎链球菌感染可获最高生存率。临床上发现环丙沙星治疗的病例中，有相当部分治疗失败和出现与肺炎链球菌脑膜种植相关的多重感染，而其24小时AUC／MIC比值大约为12左右。相反，并未在24小时AUC／MIC比值超过30～40的喹诺酮类药物治疗患者中发现相似的治疗失败或多重感染。

目前，肺炎链球菌已对多种抗菌药物产生广泛的耐药，包括β－内酰胺类、大环内酯类、磺胺类和四环素类，而新一代喹诺酮类药物正可弥补这一不断扩大的耐药情况。尽管喹诺酮类药物对多数肺炎链球菌菌株有高度的抗菌活性，但是活性较低的种类如环丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星则显示出耐药发生率的增高。合理使用喹诺酮类药物并选择有最佳药效学特点的种类，将可降低由于肺炎链球菌耐药而引起的药物选择压力。新一代喹诺酮类药物之间的这种耐药性菌株选择性趋势并不相同，就肺炎链球菌产生耐药的选择性趋势而言，从最可能到最不可能的顺序依次为环丙沙星＞左氧氟沙星＞加替沙星�天坤＝莫西沙星。

总之，目前已有不同的药效学目标参数可以预测对患者应用抗生素治疗成功的几率大小。对于应用喹诺酮类药物治疗革兰阴性肠杆菌和假单胞菌感染而言，24小时AUC／MIC比值应达到125。为了防止出现耐药，主要针对非Bush1类的产β－内酰胺酶革兰阴性杆菌，建议药物的24小时AUC／MIC比值至少达到100。对于革兰阳性病原体如肺炎链球菌，AUC／MIC比值至少应达到30，才可使清除细菌的成功率较高。显然需要更多的数据资料，来评价这些药效学参数对新出现的细菌耐药机制和厌氧性病原体的作用。

⑹ 生物检测技术是什么

是利用生物体（整体组织 ，离体组织微生物和细胞等）来测定药物的生物活性的一种方法。它以药物的药理为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的运算，从而测得供试品的效价。