生物指示剂如何使用

Ⅰ 生物指示剂的基本信息

生物指示剂是一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能，灭菌程序的验证，生产过程灭菌效果的监控等。
生物指示剂的定义：
对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。用于确认灭菌设备的性能，灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。
生物指示剂分类：
1）按结构分可分为片状生物指示剂(strip biological indicator)和自含式生物指示剂(self-contained biological indicator)；片状生物指示剂需要使用阳性对照和阴性对照，而自含式生物指示剂只需要阳性对照即可 。
2）根据ISO 11138 -1(2006)的分类，目前的生物指示剂有环氧乙烷灭菌用生物指示物、湿热灭菌用生物指示物、干热灭菌用生物指示物、过氧化氢低温等离子灭菌生物指示物和甲醛灭菌用生物指示物 。
3）按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH值改变，通过酸碱指示剂变色来进行判读，时间一般在24或48小时以上；而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应，通过荧光进行判读，时间一般为3-4小时。同时国外正在研发更加快速的生物指示剂，有望在1小时之内得出结果。
生物指示剂重量质量特性：
1）芽孢含量
2）D值（生存曲线法测定）
生物指示剂生产商：
1）国外专业生产商：有美国强生，3M，Raven，Steris，Namsa，SGM，ACE等；
2）国内专业生产商：有杭州富捷，北京四环等。

Ⅱ 脉动真空灭菌器生物指示剂挑战时指示剂能否放在液体内

压力蒸汽灭菌生物指示剂是由嗜热指肪杆菌（ATCC 7953）芽孢菌片、恢复培养基和外管组成。菌片含菌量为5.0×105 ～5.0×106 cfu/片。生物指示剂的抗力符合国际标准和国家标准的规定：既在121℃饱和蒸汽作用下，存活时间≥3.9min，杀灭时间≤19min，D 10 值1.3～1.9min。
【适用范围】
适用于 121℃下排气式压力蒸汽灭菌器、132℃～134℃预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌器、134℃～136℃台式或卡式压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测和制药工业、医院制剂生产等各行业使用的压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。
【使用方法】
1 使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。
2 灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果，按规定每月至少用生物指示剂进行一次灭菌效果监测。
【结果判定】
培养后生物指示剂中的溴甲酚紫培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长，判定为灭菌不合格；培养液仍为紫色澄清液体为无菌生长，同时阳性对照管中的嗜热脂肪杆菌生长正常即培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体，判定为灭菌合格。
【注意事项】
1将生物指示剂管从灭菌器内取出或从冰箱内取出后，需在室温下放10min左右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。
2液体培养基的pH值低于7.0或高于7.5，均可使嗜热脂肪杆菌不能生长；
3 培养温度须在56℃～65℃之间，否则可导致嗜热脂肪杆菌生长不良，或不能生长。
4 灭菌处理后，生物指示剂中的液体培养基颜色与压力蒸汽灭菌前比较会变浅，呈显浅紫色，这种变化属正常现象。
5 用恢复培养液在56℃培养时间过长（72小时以上），阳性对照管中培养液的黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录培养结果。

Ⅲ 指示剂选择的依据

在多种指示剂中，选择指示剂的依据是：要选择一种变色范围恰好在滴定曲线的突跃范围之内，或者至少要占滴定曲线突跃范围一部分的指示剂。

这样当滴定正好在滴定曲线突跃范围之内结束时，其最大误差不过0.1%，这是容量分析容许的。

指示剂选择不当，加之肉眼对变色点辨认困难，都会给测定结果带来误差。

在各类滴定过程中，随着滴定剂的加入，被滴定物质和滴定剂的浓度都在不断变化，在等当点附近，离子浓度会发生较大变化，能够对这种离子浓度变化作出显示（如改变溶液颜色，生成沉淀等）的试剂就叫指示剂。如果滴

定剂或被滴定物质是有色的，它们本身就具有指示剂的作用，如高锰酸钾。

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双色指示剂的变色范围不受其用量的影响，但因指示剂本身就是酸或碱，指示剂的变色要消耗一定的滴定剂，从而增大测定的误差。

对于单色指示剂而言，用量过多，会使用变色范围向pH值减小的方向发生移动，也会增大滴定的误差。

例如：用0.1mol/LnaOH滴定0.1mol/LHAc,pHsp=8.5,突跃范围为pH8.70-9.00,滴定体积若为50ml,滴入2-3滴酚酞，大约在pH=9时出现红色；若滴入10-15滴酚酞，则在pH=8时出现红色。

显然后者的滴定误差要大得多。指示剂用量过多，还会影响变色的敏锐性。例如：以甲基橙为指示剂，用HCl滴定NaOH溶液，终点为橙色，若甲基橙用量过多则终点敏锐性就较差。

Ⅳ 嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂怎么用

在灭菌时将指示剂同时加入，一并进行灭菌。灭菌完成后将该指示剂进行培养，灭菌合格那么培养将无菌生长，指示剂不变色。

Ⅳ 如何进行 生物指示剂 微生物数量的确认

所谓的稀释就是加水稀释
所谓的计数就是倒平板
然后数出菌落数
可以先进行浓度梯度稀释，在不同的稀释度下进行倒平板操作
然后进行计数
根据
真菌和细菌的繁殖速度不同
真菌常温下培养3到4天
而细菌
最好在35°条件下培养18
到20个小数
所谓的培养基
由于你的菌种原因可能需要在普通的牛肉膏培养基里面加入少许脂肪
培养温度可以稍稍提高~~望采纳~

Ⅵ 如何选择压力蒸汽灭菌生物指示剂

按照压力蒸汽灭菌生物指示剂的分类原则进行选择，具体选择依据如下：

1、按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH值改变，通过酸碱指示剂变色来进行判读，时间一般在24或48小时以上。

而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应，通过荧光进行判读，时间一般为3-4小时。同时国外正在研发更加快速的生物指示剂，有望在1小时之内得出结果。

2、按结构分可分为片状生物指示剂和自含式生物指示剂；片状生物指示剂需要使用阳性对照和阴性对照，而自含式生物指示剂只需要阳性对照即可。

注：3M压力蒸汽灭菌的生物指示剂1262与生物PCD1276测试包的48小时内出检测结果，指示剂1292与生物PCD1296测试包的检测时间为3小时内。环氧乙烷灭菌的生物指示剂1264与生物PCD1278的最终结果48小时得出，指示剂1294与生物PCD1298的最终结果4小时得出。

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压力蒸汽灭菌生物指示剂的使用注意事项：

1、灭菌完毕，含生物指示剂的包裹很热并有一定压力；需至少冷却10分钟以上，否则可能引起塑料管内的安瓿破裂，飞溅的碎片导致损伤。

2、只有对照管为阳性，其生物监测结果才算有效。

3、贮存于室温：15-30℃，相对湿度为35-60%；避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

4、检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，检查灭菌过程。

Ⅶ 高中生物指示剂有哪些

1.斐林试剂（由甲液0.1g/ml
NaOH和乙液0.05g/ml
CuSO4组成，混匀后现配现用），用于检测还原性糖，沸水浴加热呈砖红色沉淀。
2.双缩脲试剂（由A液0.1g/ml
NaOH和B液0.01g/ml
CuSO4组成，使用时先加A液后加B液），用于检测具有二个以上肽键的化合物,蛋白质，在碱性条件下呈紫色（络合物）。
3.甲基绿，用于检测细胞中的DNA的分布，呈绿色。（一般与吡罗红混合使用，现用现配）
4.吡罗红，用于检测细胞中的RNA的分布，呈红色。（一般与甲基绿混合使用，现用现配）
5.健那绿，用于检测细胞中线粒体的分布，呈鲜绿色。
6.碘液，用于检测淀粉，呈蓝色。
7.酸性橙色重铬酸钾溶液，用于检测乙醇，在酸性条件下变为灰绿色。
8.溴麝香草酚蓝水溶液，遇二氧化碳后，由蓝变绿再变黄。
9.澄清石灰水（Ca(OH)2水溶液），遇二氧化碳即产生浑浊。
10.龙胆紫，使染色体被染成深色。
11.醋酸洋红液，功用同10，使染色体颜色変深。
12.测定亚硝酸盐标准显色液，对氨基苯磺酸(0.4%和0.5%)
对氨基苯磺酸(1%)
盐酸萘乙二胺溶液(0.2%和1%)
N-1-萘基乙二胺溶液(0.1%)
盐酸(5mol/L)
乙酸(60%)，设置比色梯度，观察玫瑰红色的深浅。
13.刚果红，可以与纤维素此类多糖形成红色复合物。

Ⅷ 什么是生物指示剂,作用是什么

生物指示剂常用于制药工艺中灭菌设备的性能确认以及气体灭菌法、过滤除菌法的灭菌程序的验证。

Ⅸ 医用高压锅生物指示剂监测方法

每周监测一次，可以用自含式的压力蒸汽灭菌生物指示剂，随同待灭菌物品一起放到里面进行灭菌，灭菌后56℃培养48小时，观察颜色变化，如颜色依然为淡紫色，说明灭菌合格；注意，要有一支没经过灭菌的作阳性对照试验。

Ⅹ 生物指示剂的生物指示剂的应用

在灭菌程序验证中，尽管可通过灭菌过程某些参数的监控来评估灭菌效果，但生物指示剂的被灭杀程度，则是评价一个灭菌程序有效性最直观的的指标。可使用市售的标准生物指示剂，也可使用有日常生产污染菌监控中分离的耐受性最强的微生物制备的孢子。在生物指示剂验证试验中，需确定孢子在实际灭菌条件下的D值，并测定孢子的纯度和数量。验证时，生物指示剂的微生物用量应比日常检出的微生物污染量大，耐受性强，以保证灭菌程序有更大的安全性。在最终灭菌法中，生物指示剂应放在灭菌柜的不同部位。并避免指示剂直接接触到被灭菌物品。生物指示剂按设定的条件灭菌后取出，分别置培养基中培养，确定生物指示剂中的孢子是否被完全杀灭。
过度杀灭产品灭菌验证一般不考虑微生物污染水平，可采用市售的生物指示剂。对灭菌手段耐受性差的产品，设计灭菌程序时，根据经验预计在该生产工艺中产品微生物污染的水平，选择生物指示剂的菌种和孢子书数量。这类产品的无菌保证应通过监控每批灭菌前的微生物污染的数量、耐受性和灭菌程序验证所获得的数据进行评估。
在医疗机构的灭菌生物监测中，WS310国家标准已明确规定：1、压力蒸汽灭菌过程为每周一次，使用压力蒸汽灭菌生物指示剂；2、环氧乙烷气体灭菌为每批次都要监测，使用环氧乙烷灭菌生物指示剂；3、低温等离子体灭菌为每日监测一次，使用低温等离子体灭菌生物指示剂。以上三种灭菌方式，。也是2012年医疗机构的主要灭菌方式，其中，压力蒸汽灭菌使用最为广泛。