显微镜生物染色剂怎么用

1. 给细菌染色的方法都有几种，怎么操作，都用复红染色吗麻烦一一讲来，详细点，本人初学者.

细菌染色分为活菌染色跟死菌染色两种。其中死菌染色分为正染色跟负染色。正染色又包括普通染色与特殊染色两种。普通染色有简单染色法、革兰氏染色法和抗酸染色法；特殊染色分为芽孢染色法、荚膜染色法和细胞壁染色法。一般都只用革兰氏染色法跟抗酸染色法。

革兰氏染色法(Gram's stain)是最常用的细菌染色法。细菌经结晶紫初染染成蓝色。革兰氏染色阳性菌（G+）细胞壁肽聚糖层数多，且肽聚糖为空间网状结构，再经乙醇脱水，网状结构更为致密，染料复合物不易从细胞内漏出，仍为蓝色。而革兰氏染色阴性菌（G-）细胞壁脂类含量多，肽聚糖层数少，且肽聚糖为平面片层结构，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，结合的染料复合物容易泄漏，细菌被脱色为无色，再经石炭酸复红稀释液复染成红色。
①将结晶紫染液加于涂膜上，染色（初染）1min。②水洗后加芦戈氏碘液处理(媒染)1min。③水洗后用95％酒精脱色，脱色时频频摇动玻片，直至流下的液体无色为止(约需0.5min)。④水洗后加石炭酸复红稀释液染色(复染)0.5min。⑤水洗，用滤纸轻轻吸干，待标本充分干燥后进行镜检。染色过程中，水洗要用自来水的细流徐徐冲洗，冲洗涂膜的背面，勿使强水流直接冲到涂膜上。

抗酸染色法（acid-fast stain）对分枝杆菌属等一般染色法不易着色的抗酸性细菌染色。要注意：1）涂片要略厚；2）加温染色或延长染色时间，加温时随时补加染色液；3）分枝杆菌呈红色（+），其他细菌和背景为蓝色。
①石碳酸复红加温染色8~10分钟。②3%的盐酸酒精脱色约1~2分钟，脱色是轻摇玻片，直到涂片颜色脱去为止。③水洗后，用碱性美蓝复染1分钟。④再次水洗，印干。

芽孢染色法是专门给细菌芽孢染色的。要注意：1）芽孢染色用的菌种应控制菌龄，使大部分芽孢仍保留在菌体上为宜；2）染色加热过程要及时补充染液，切勿让涂片干涸。
①孔雀绿加热染色5分钟。②水洗。③番红染色2~3分钟。④水洗，干燥。

荚膜染色法是专门给与染料亲和性弱的细菌荚膜染色。由于荚膜很薄，且含水量高（90%以上），易变形，所以制片和染色时一般不用热固定。这个包括黑素负染色法、Leifson染色法跟Tyler染色法。
黑素负染色法：
1.制菌液：在洁净载破片一端加一滴蒸馏水，按无菌操作要求，用接种环取少量斜面试管培养物于蒸馏水中，轻轻混匀。
2.涂片（推片法）：取另一块边缘光滑的载玻片，使之一端与菌液接触，然后迅速均匀地将菌液推向玻片的另一端，使菌液涂成一薄层。置空气中自然干燥。注意：勿热固定。
3.复红染色：滴加石炭酸复红染色液覆盖涂布面，染色4~5分钟后，除去多余染液（勿用水洗）。干燥时间不要太长，防荚膜脱水。
4.黑素染色：在玻片一端加一滴1%黑素液，再取一块边缘光滑的裁玻片，当边缘与黑素液接触后，迅速均匀地推向玻片另一端，使成一薄层。置空气中自然干燥。
5. 镜检（油镜）：菌体呈红色，背景呈黑色，荚膜无色。
注意事项：滴黑色素要量少；取菌要适量。
Leifson染色法
1.制备涂片同前，自然干燥。
2.滴加Leifson’s染色液覆盖涂布面，染色10分钟，倾去多余染料（勿用水洗）。
3.滴加硼酸钠美蓝染色液，染色5分钟，轻轻用水冲洗，置空气中自然干燥。
4.油镜下镜检，菌体呈蓝色，荚膜呈红色。
Tyler染色法
1.制备涂片同前，自然干燥。
2.滴加结晶紫冰醋酸染色液覆盖涂布面，染色5~7分钟。倾去多余染料（勿用水洗）。
3.用20%CuS04水溶液轻轻冲去染料，用吸水纸印干后，置空气中自然干燥。
4.油镜下检查，菌体呈紫色，荚膜呈浅紫色或浅蓝色。

细胞壁染色法是观察细菌细胞壁时采用的染色法。细菌细胞壁很薄，它与染料结合的能力差，不易着色，在细菌的染色过程中，一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞，细胞壁本身并未染色，因此，欲通过染色来观察细胞壁，必须设法使细胞壁能着色，而细胞质则不易着色，常用的方法有单宁酸法和磷钼酸法。单宁酸和磷钼酸都是起媒染作用，它们使细胞壁形成可着色的复合物，而使细胞质不易被着色，经结晶紫或甲基绿染色后，便可在普通光学显微镜下观察到细胞壁。
根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙醚蒸气处理后，会产生质壁分离这一现象，经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。
1．单宁酸法
(1)将培养16—18小时的巨大芽孢杆菌按常法制成涂片。
(2)用5％单宁酸染5分钟后，水洗。
(3)用0．2％结晶紫染3—5分钟，水洗，吹干。用油镜观察，细胞壁呈紫色，细胞质呈淡紫色。
2．磷钼酸法
(1)制备浓厚的涂片，在未干时浸入1％磷钼酸水溶液3—5分钟。
(2)用1％甲基绿水溶液染3—5分钟。
(3)水洗后，吹干，用油镜观察。细胞壁为绿色，细胞质无色。
3．区分细胞壁与细胞质膜
(1)乙醚蒸气法
(a)将巨大芽孢杆菌涂布于盖玻片上，翻转盖玻片使其放在乙醚蒸气瓶的瓶口上蒸3分钟。
(b)取下盖玻片置Bouin氏固定液中30分钟后取出，水洗。
(c)用硫堇染色30秒钟。
(d)水洗，水封，置油镜下观察。
(2)NaCl法
(a)取一滴25％NaCl溶液于洁净的载玻片上。
(b)挑一小环培养6小时的枯草芽孢杆菌，在25％NaCl水滴中涂布均匀，待自然干燥。
(c)滴加0．01％结晶紫于其上，使盖满有菌部分，30秒钟后水洗，干燥，用油镜观察结果。

2. 怎么用染色剂

在我们做生物医学实验或者某些物理化学实验时，为了更好地观察到实验效果，通常会选用合理的染色剂，在选择适当的染色剂后，我们就能够很好地观察到预期的实验现象或结果。染色剂依据来源可分为天然染色剂和人工合成染色剂，各种不同的实验选择不同的染色剂，同一种染色剂也可以用不同的配方进行调配制成

3. 用光学显微镜观察染色体 用什么染色

用光学显微镜观察染色体
，用碱性染料着色，如龙胆紫、醋酸洋红溶液染色。
观察染色体行为一定要保持细胞的活性，用碱性颜料可以在不影响的情况下观察到染色体。酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的，而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说，助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂，反之则为酸性染色剂。

4. 初一生物题，显微镜使用

首先要明白，滴加染料是为了将细胞的细胞核染成深色。而只有滴加碱性染料（如：红墨水，稀碘液）才能够达到染色的目的，这样方便对细胞和细胞核进行观察。其次，滴加清水是为了使植物细胞的细胞壁紧紧的粘在载玻片上。盖上盖玻片之后再在一端滴上墨水，再用吸水纸一吸，就可对整个细胞进行全面染色，就不会发生墨水溢出或染色不均匀的事情了。如果先滴加红墨水再盖上盖玻片的话，就会导致染色不均匀，最后观察失败。
（楼上的不懂就不要乱说，别误导人家）

5. 若用光学显微镜观察染色体 可用什么进行染色

若用光学显微镜观察染色体
，可用龙胆紫、醋酸洋红溶液等碱性染料染色。
1、染色体染色剂：
醋酸-洋红染液
醋酸-地衣红染液，龙胆紫染液，甲苯胺蓝染液配置方法。
配方一
醋酸-洋红染液
取45毫升冰醋酸，加蒸馏水55毫升，煮沸后徐徐加入洋红1克，搅拌均匀后加入1颗铁锈钉，煮沸10分钟，冷却后过滤，贮存在棕色瓶内。
配方二
醋酸-地衣红染液
取45毫升醋酸，跟55毫升蒸馏水相混，加热，徐徐加入地衣红粉末1～2克，搅拌溶解后，缓缓煮沸2小时。冷却后过滤，贮存在棕色瓶里。
配方三
龙胆紫染液
取1克龙胆紫，用少量蒸馏水溶解后，加蒸馏水，稀释到100毫升，保存在棕色瓶内。
配方四
甲苯胺蓝染液
取0.5克甲苯胺蓝，溶解在100毫升蒸馏水中，即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
2、观察染色体行为一定要保持细胞的活性，用碱性颜料可以在不影响的情况下观察到染色体。酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的，而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说，助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂，反之则为酸性染色剂。

6. 荧光显微镜下观察细胞，用什么染色方法

1. 染色是提高标本显微观察效果的关键措施：：

2. 由于活体的微生物个体的颜色在显微镜下差别很小，同时所观察样本中所含的微生物种类繁多，个体微小，形态千差万别。每一种的组织结构、内含物质复杂多变，相互间交织贯穿在一起。如果不加染色显然是很难在显微镜的视野中把它们相互区别出来。

3. 正是因为这样，由于标本内部的微生物种类、形态、组织结构、物质大分子的成分染色剂的化学反应（着色）各有不同。通过染色，它们之间就会形成各自不同的颜色梯度，从而产生不同的视觉对比度。这样便有利于在显微镜下把它们的个体形态、着色差别、内含物、组织结构区分出来。所以大多数的标本都需要染色才能更好地在显微镜进行下观察。

4. 染色是制作永久标本的必须步骤和措施：

5. 在制作永久保存标本时，必须对标本进行固定和染色，通过固定和染色才能把标本的外部形态和内部结构层次永久固定下来，使之得以长久保存不分解变质。

6. 不是所有的观察标本都需要染色：

7. 染色的标本虽然能够增加标本的色度和色差，但在固定、染色过程中由于化学作用的缘故，也会使一些内部物质的形态和分子结构发生变性而失真，从而影响观察的真实性。再者，一些活体观察是不需要或不能使用染色剂的。

7. 光学显微镜观察染色体用什么染色

光学显微镜观察染色体可以使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂。
龙胆紫，其1～2%溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。龙胆紫为一种碱性阳离子染料，因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。它能抑制革兰氏阳性菌，特别是葡萄球菌、白喉杆菌，对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。它杀菌力强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作用。
染色质(体)容易被碱性染料染成深色。实验中对染色质(体)进行染色，须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂，这些染色剂是以龙胆紫或醋酸洋红溶解于醋酸溶液中制得，配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性)。
酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的，而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说，助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂，反之则为酸性染色剂。

8. 要想在显微镜下看清染色体必须用到的什么染色剂

要想在显微镜下看清染色体必须用到的染色剂是：碱性染料。
解析：可以选择龙胆紫或者醋酸洋红溶液对染色体进行染色，便于观察。

9. 用光学显微镜观察染色体要用什么染色

光学显微镜观察染色体可以用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂进行染色。

解析：

染色体之所以叫染色体，就是易被碱性染料染成深色，高中生物学中曾经学过，实验中观察染色体须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液进行染色：

1. 龙胆紫俗称紫药水，是一种外用药，其阳离子能与细菌蛋白质羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。

2. 洋红是从一种热带昆虫胭脂虫雌虫体内提取的天然染料。醋酸洋红是由1体积冰醋酸、1体积蒸馏水混合煮沸后，加入饱合量的洋红再煮20分钟所得。

实际上两种溶液都显酸性，但却又是碱性染料，这是因为染色剂酸碱性的界定并非由染料溶液的PH值决定的，而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说，助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂，反之则为酸性染色剂。

10. 在显微镜下观察大肠杆菌的形态时用什么着色剂

显微镜下观察大肠杆菌形态时，需要对细胞染色，所用的染色剂是草酸铵结晶紫。碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。在显微镜下更易于识别。常用作简单染色的染料有美蓝(或草酸铵结晶紫染液)、结晶紫、碱性复红等。碘液能够使细胞核着色。