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微生物加标实验怎么做

发布时间:2022-06-15 09:27:45

1. 有哪些容易做的微生物实验

做革兰氏染色吧!比较简单又有一定的技术含量。
一、实验步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)自来水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红梁色液(稀)染2分钟后,自来水冲洗。干燥,镜检。

二、实验原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
三、染色结果
革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。

2. 微生物试验中,菌种的传代实验怎么做微生物的酶活怎么测

微生物传代最常用的就是斜面接种法,大致意思就是你从原代菌种里挑一点划线法保存到小试管里的斜面培养基上,进而让菌种不断增殖保存下来。 其方法步骤如下:首先,点燃酒精灯。将菌种和斜面培养基的两只试管平行放在左手上,用拇指与其它四指夹住,并使中指位于两试管之间,两试管的管口齐平(图9-5①)。其次,用右手先将棉塞拧转松动,并稍拉出一些,以利又质卑纬觯ㄍ?9-5②)。第三,右手持接种针,在酒精灯将针头部分烧红灭菌(图9-5③)。针头以上凡是接种时可能进入试管的部分,均应用火灼烧。以下操作都要使试管口靠近火旁。第四,用右手的小指与掌间拔掉左手上两只试管上的棉塞,同时迅速将试管口在酒精灯上烧灼3秒钟左右,使管口上可能沾染的少量杂菌得以烧死。第五,将烧过的接种针伸入菌种管内,先将针头接触培养基上没有菌的部位(如斜面的顶端),使其冷却,以免烫死被接种的菌体。然后轻轻接触菌体,取出少许,慢慢将接种针抽出试管,接种针抽出时不要使针头部分碰到管壁和管口,取出后,不可使针头通过火焰,更不可触及其它无关物品或桌面。第六,迅速将接种针伸进另一试管,在培养基上轻轻划线,接种菌体于其上。划线时,要由底部起划较密的平行线,一直划到顶部,以充分利用斜面面积,但不要将培养基划破。第七,烧灼试管口,将棉塞塞上。塞棉塞时,不要移动试管迎接棉塞,以免试管在移动中纳入可能含菌的空气。第八,将针头在火焰上烧灼灭菌。放回原处后,腾出手将棉塞塞紧。二、关于微生物酶活性测定,比较复杂,网上比较多,不同酶测定方法也不一样,同学你自己慢慢查吧,O(∩_∩)O哈哈~

3. 微生物实验

一片白?全是菌落吗?如果是的话就是你涂平板时用的菌液太浓导致菌落和菌落之间无法分开,连成一片。另外,涂布时用的涂布棒或是接种环在灼烧后应接触培养皿上盖内侧一会儿,在降温后在去接触菌液,不然容易烫死细菌。
服了你,我敢肯定你取样后肯定就直接将样品全倒到培养基上了,这是不正确的,样品必须进过稀释,否则菌落密度很高,连成一片。
1.首先,你得根据你所要的细菌设计一培养基,尽可能使得只有你要的这一细菌能在培养基上生存,如果不考虑细菌的种类,只考虑他们的数量的话,则可以用全营养培养基。
2.然后算样品液的总体积,从中取1ml出来放进一灭菌试管中,加液体培养基9ml,摇匀,此时菌液被稀释10倍。再从这一试管中取1ml液体加入另一无菌试管中,在往这新的试管中加入液体培养基9ml,此时新试管中的菌液被稀释了100倍,重复,下去,直到被稀释100000倍后为止。
3.接着将上述试管中的菌液各取1ml注入到固体培养基上(此时又相当于在各试管稀释的基础上又稀释了10倍),用灭菌涂布棒涂布均匀,进行培养。
最后,找出菌落分散较好的培养基,计数菌落,然后乘以稀释倍数(要包括步骤3中的那10倍)再乘以你得样品的总体积数,从而得出细菌总数。
注意:以上操作必须在无菌条件下进行。

4. 微生物检测实验中怎么做10倍液,50倍液,百倍液,还有千倍液

这个叫“微生物菌液的稀释”。
吸取1ml原菌液,放入9ml无菌生理盐水中,混合均匀,就是10倍稀释液。
吸取2ml10倍稀释菌液,放入8ml无菌生理盐水中,混合均匀,就是50倍稀释液。
吸取1ml10倍稀释菌液,放入9ml无菌生理盐水中,混合均匀,就是100倍稀释液。
吸取1ml100倍稀释菌液,放入9ml无菌生理盐水中,混合均匀,就是1000倍稀释液。

5. 怎样设计一个微生物实验

主要是要控制变量,注意引入菌种前高温杀菌以保证实验准确。

6. 常见微生物实验步骤怎么写

1、药敏试验:主要是通过测定抑菌圈的范围来确定药物的疗效。
2、血凝实验:通过测定病毒与红细胞反应的浓度测定其抗体效价。
3、PCR:细菌主要通过16srRNA确定其细菌的种类。
4、中和实验:主要测定病毒的稀释浓度。
5、革兰氏染色:确定是革兰氏阳性还是阴性
6、瑞氏染色:主要是对细菌染色。

7. 微生物实验设计

2、对目标菌在生化特性、培养特性、生物安全性等方面进行研究,并对其代谢产物进行分析,为进一步完善产物获取提供实验依据。
3、对于工业应用的预实验。
以上是比较传统的利用培养基法进行细菌筛选。不过随着分子生物学等相关学科的发展,在菌种筛选中可以利用的技术也越来越多,往往可以利用特定的高效基因片段的筛选来找到特定要求的菌种。
同时利用分子杂交等技术,在现有生产菌或者目标菌的基础上进行基因改良,插入高效片段,获得稳定纯培养物后,在按照菌种培养物传统鉴定(生化、培养、安全性等)最后完成一个工业菌种的筛选过程。

8. 做微生物实验的步骤

操作步骤
1.涂片将培养14—16小时的枯草芽孢杆菌和培养24小时的大肠杆菌分别作涂片(注意涂片切不可过于浓厚),干燥、固定。固定时通过火焰1—2次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
2.染色
(1)初染
加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
(2)媒染
滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
(3)脱色
将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒钟,立即用水冲净酒精。
(4)复染
用番红液染1—2分钟,水洗。
(5)镜检
干燥后,置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈假阳性。
(6)同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片,作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如脱色过度,则阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解了,都常呈阴性反应。

9. 微生物学实验设计

没有什么时间,我简单解释一下,语言你可以自己组织,意思对了丰富一下以下内容就可以了哈:
1、取材。指材料选择,微生物分离一般来源是自然界的土壤及其他生物体内。你最好选择在常年高温的环境中采样。譬如火山口,热泉口,常年高温的戈壁沙漠土壤等。
2、分离。指分离野生菌株。在实验室,分离微生物的传统途径是选择合适的培养基选择性分离土壤中的微生物,这个题目的要求说明实验中需要在高温条件培养,最好选用多种培养基,以便于分离到种类较多的各类微生物。相关实验技术请自行查阅书籍。
3、纯化。微生物分离过程中重要一步,目的是需要得到菌株的纯培养,即多次纯化过程中需挑取单菌落接种扩培,同时可以起到活化菌株生命力的作用。当然此过程中合适的培养基相当重要。否则菌株可能反而退化失活。
4、筛选。获得适合高温生长的菌株库之后,依据要求筛选菌株。即指提供单因子培养条件筛选,譬如选择能产高温蛋白酶的,需要在培养基中单一添加高级蛋白(即未降解过的或未胨化过的)作为氮源,以葡萄糖或其他易利用糖类作单一碳源。又如选择产高温淀粉酶的,以淀粉作为单一碳源,补充其他无碳利用的氮源。能在选择条件下生长的为目的菌株。
5、确证。得到目的菌株后即可通过相应的酶提取方法确证。提取总酶在高温条件下进行体外蛋白消化或者淀粉消化实验来确证。

10. 微生物阳性实验怎么做

阳性和阴性,描述的是某一具体实验的实验结果,而不是该实验。一般我们认为某一受试物参与具体实验后,发生某种反应,并产生了与实验指标相符的且可被检出的效应时,即认为是实验结果阳性。

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