怎么用多功能酶标仪检测化学发光

1. 多功能酶标仪的介绍

多功能酶标仪又称多功能微孔板检测仪，可对以微孔板为体系的实验提供多种不同模式的检测。通常，多功能酶标仪至少可提供“吸收光”、“荧光”、“发光”三种不同的检测模式。一些中高端多功能酶标仪还可完成“时间分辨荧光”、“荧光偏振”、“荧光共振能量转移”等高级荧光检测实验。

2. 多功能酶标仪的相关参数

1、光密度测读模式：1）波长范围：230~1000nm，精确选择波长1nm。
2）带宽：2 nm (230-285 nm), 4 nm (>285 nm)。
3）波长准确度：±2.0nm。
4）波长重现性：±0.2nm。
5）测读范围：0~4.0 OD。
6）光分辨度：0.0001 OD。
7）测读准确度(微孔板)：<1% @ 2.0 OD <3% @ 3.0 OD
8）(比色杯)：<1% 0-3.0 OD
9）测读精确度：<±0.003 OD±1.0%,0~2.0 OD。
10）杂散光：0.03% @ 230 nm。
11）微孔板测读时间：96: 11 秒384: 22 秒。
12）温度范围：室温+4~65度。
2、时间分辨荧光法（TRF）
1）波长范围 滤光片: 230 - 700 nm (850 nm 可选)，单色器: 250 - 850 nm，单色器递增量1nm。
2）数据采集可调
3）测读次数：1~100flashes，
4）测读延迟：0~600usec。
5）读取数据积分时间：50~1500usec。
6）带宽可调：9nm, 13.5nm, 17nm, 20nm
8）精确度：60fM/孔 铕元素（96孔及384孔顶读模式）。
9）读取速度：96孔板17秒，384孔48秒。
3、荧光偏振（FL）
1）深部阻挡滤光片/二向色镜（顶部）。
2) 波长范围：400 - 700 nm (320-850 nm 可选)。
3）检测灵敏度：3nM荧光素/孔时，<5mp SD。
4）读取速度：96孔板42秒，384孔123秒。
4、化学发光模式（Lum）
1）连续波长范围250~850nm。
2）灵敏度：10 amol ATP（96孔及384孔顶读模式）。
3）读取速度：96孔板120秒，384孔420秒。
4）光交叉<0.5%。

3. SpectraMax 190全自动酶标仪能否检测化学发光（光强）

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4. 如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶

报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响，例如培养细胞的数目和活力的差别、细胞转染和裂解的效率、以及加样操作过程中引起的变异。Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。共转染的“对照”报告基因会作为内对照，减小细胞活性和转染效率对实验的影响。因此双报告系统减少了外部干扰，使得实验数据更可信。Promega提供了一种先进的双报告基因技术（Dual-reporter assays）,结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试，该技术同时使用两个独立的报告基因以提高实验的准确性，Biotek synergy 系列微孔板检测仪作为双报告基因的检测分析平台获得了Promega DLR 认证。
在双报告基因系统中，通常一个报告基因用于检测特定实验条件下待测物的反应，即“实验”reporter，另一个报告基因用来检测实验条件，类似于内部对照，用于校准“实验”reporter的数据。通过这种方法，可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性，例如：转染效率、细胞活性、细胞裂解差异以及加样操作过程中引起的差异。Promega公司的Dual-Luciferase系统利用萤火虫和海肾荧光素酶的活性分别检测实验组和对照组。萤火虫荧光素酶是一种分子量为61KD的单体酶，分两步催化虫荧光素的氧化反应，产生560nm的光，海肾荧光素酶是一种分子量为36KD的单体酶，催化海肾荧光素的氧化反应，产生中心波长为480nm的蓝光。萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶没有种源同源性，对应不同的反应底物，反应中没有任何的交叉干扰。

5. 多功能酶标仪的简介

多功能酶标仪指拥有多种检测模式的单体台式酶标仪。通常具有比色皿插槽，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FP)、和化学发光（Lum)。

6. 多功能酶标仪的操作方法

首先将抗原(或抗体)物质吸附(医学上称“包被”)在样品盘中(国际上通用的样品盘是96 标准微孔反应板)；再将待测样品(如血液、体液等)加入样品盘；于是待测未知的抗体(或抗原)与包被的抗原(或抗体)相结合，成为抗体抗原复合物。
当依次加入酶结合物(即酶标记抗体或酶标记抗原)和酶的底物时便产生呈色反应，呈色程度与被检测样品中待测抗体(或抗原)的量相关，据此就可以得出定性或定量的检测结果。

7. 多功能酶标仪的用途

酶标仪是一种用途广泛的生物检验医疗设备，利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理，根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析。这是一种极具生命力的免疫学技术。可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验，以及其它需要进行比色的分析工作中。该仪器适用于临床检验、微生物学、流行病学、免疫学、内分泌学以及农林科学等领域。广泛用于医院、血站、防疫站、生物制品等部门。
我国卫生行政主管部门已明确规定,对多发常见的肝炎病诊断，不能用目测进行，必须用酶标仪判断。没有酶标仪或不用酶标仪的医院不能上等级，也没有判断肝炎的资格和权利。对于有蔓延趋势的艾滋病毒的判断，必须建立专门的艾滋病实验室并采用酶标仪进行判断。
分类
酶标仪是实验室常用的一种仪器，一般可以按照滤光方式的不同和功能的不同进行划分。
一. 按照功能的划分,酶标仪可以分为光吸收酶标仪,荧光酶标仪,化学发光酶标仪和多功能的酶标仪.光吸收酶标仪是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测.特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测.光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单,但是动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强.一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源，而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。
荧光酶标仪是用来进行荧光的检测.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器.荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例.荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测.化学发光是来自生物化学反应中的自发光,可分为辉光型和闪光型两种类型.辉光型发光持久,稳定,能持续一段时间;闪光型发光时间短,变化快,稳定性不强,需要应用自动加样器才可以进行.化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系,化学发光酶标仪灵敏度非常高,动力学范围广.多功能酶标仪是以上三种酶标仪的集合,比如BioTek的Synergy H1/H4,它集成了两种或者三种酶标仪于一体,可以同时进行光吸收,荧光和化学发光的检测,功能强大,使用范围广,可作为研究平台,避免了重复购买,是实验室的首选.
二. 酶标仪基于滤光方式的不同可分为滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪.滤光片式酶标仪采用滤光片来进行波长的选择,酶标仪内置滤光片轮,可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光,光源发出的全波谱光经过滤光片后,大部分被过滤,只剩下滤光片本身允许的波长通过,这样就可就通过滤光片来获得特定的波长.滤光片轮一般包含4-6块滤光片,通过选择不同的滤光片可获得不同的波长,但是获得的波长都是固定的,受到一定的限制,不能获得任意所需的波长,而且更换滤光片价格比较昂贵. 一般波长固定的滤光片有405，450，490，630nm。
光栅式酶标仪虽然才出现短短十余年,但是发展非常迅猛,现在已经是主流的酶标仪.比如BioTek的Synergy Mx/H1m,它采用光栅进行分光,光源发出的全波谱光线经过光栅后,通过光栅上面分布的一系列狭缝的分光,就可以获得任意波长的光，波长连续可调，一般递增量为1nm, 同时具有带宽可选的功能.光栅式酶标仪使用方便灵活,可以通过软件选择任意波长的光,而且可以进行全波长的扫描,通过全波长扫描可以获得未知样品的吸收峰,从而可以达到检测未知样品的目的,在实验室中很受欢迎,可以进行更多实验的检测.因此目前在国内的普及程度很高.另外根据通道的个数，可以将酶标仪分为单通道和多通道两种类型，单通道又有自动和手动两种之分。

8. 单功能酶标仪与多功能酶标仪区别是什么

酶标仪、洗板机以及电脑组件构成了酶免检验工作站，其中的酶标仪根据功能划分，可以分为四种酶标仪医疗器械，分别是光吸收酶标仪，荧光酶标仪，化学发光酶标仪和多功能酶标仪。

种、光吸收酶标仪

光吸收酶标仪是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测，特定波长的光通过微孔板中的样品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系，由此可以用来定性和定量的检测，光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单，但是动态范围窄，灵敏度比较低，特异性不强。一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源，而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。

第二种、荧光酶标仪

荧光酶标仪是用来进行荧光的检测，通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器.荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例.荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测.

第三种、化学发光酶标仪

化学发光酶标仪是来自生物化学反应中的自发光，可分为辉光型和闪光型两种类型。辉光型发光持久，稳定，能持续一段时间;闪光型发光时间短，变化快，稳定性不强，需要应用自动加样器才可以进行。化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系，化学发光酶标仪灵敏度非常高，动力学范围广。

第四种、多功能酶标仪

多功能酶标仪是以上三种酶标仪的集合，它集成了两种或者三种酶标仪于一体，可以同时进行光吸收，荧光和化学发光的检测，功能强大，使用范围广，可作为研究平台，避免了重复购买，是实验室的理想选择。另外根据通道的个数，可以将酶标仪分为单通道和多通道两种类型，单通道又有自动和手动两种之分。

9. 如何用酶标仪检测荧光（荧光，酶标仪，荧光

酶标仪的使用方法可以参考： 1.开启仪器电源开关，预热5分钟，同时启动电脑。 2.启动Magellan.exe程序，加入程序主界面，仪器微孔板架同时自动打开。 3.将待测微孔板在板架上放好。 4.根据不同的测量要求，设置好测定波长和测量模式后，进行检测

10. 什么叫本底活性用多功能酶标仪测定化学发光时要设定本底活性吗如何设定

本底活性就是空白的意思，或者说是对照，不管是做化学发光还是一般紫外，都要做对照的，也就是说要去掉本地活性，具体要看你实验如何做，可查看相关文献。希望对你有用。