化学检测霉菌怎么检测

❶ 霉菌检测ppt豆丁网

1.1 固体和半固体样品：称取10 g 样品至盛有90 mL 灭菌生理盐水的锥形瓶中，充分振摇，即为1:10。（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）

1.2 液体样品：以无菌吸管吸取10 mL 样品至盛有90mL 生理盐水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。

1.3 取1 mL 1:10 稀释液注入含有9 mL 无菌水的试管中, 另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸,此液为1:100 稀释液。

1.4 按1.3 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管。

1.5 根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1 mL 样品匀液于2 个无菌平皿内。同时分别取1 mL 样品稀释液加入2 个无菌平皿作空白对照。

1.6 及时将15 mL～20 mL 冷却至46 ℃的霉菌培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。

❷ 饲料中霉菌毒素怎么检测

霉菌毒素的检测方法很多，但由于霉菌毒素的化学结构和物理化学特性复杂，在样品中分配不均和基质的干扰，使其分析更加复杂。饲料的样品基质对霉菌毒素的影
响最大，因为饲料是由多种物质混合在一起的，不同的物质中的霉菌毒素检测的程序是不同的。通常，首先要对怀疑被污染的物质进行严格的样品处理，从样品中提
取毒素，分析之前再进行洗脱除去杂质的干扰。在实际的分析中，有些方法可直接进行分离和定量，有些方法在分离和定量之前需要对霉菌毒素进行衍生。
有些霉菌毒素具有一个荧光特性的发色基团，如黄曲霉毒素(AF)、赭曲霉毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE)，样品的提取物经常用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)来分离结构相似的化合物和污染物。

通过比较样品和标准品色谱的比移值(Rf)和保留时间来定性霉菌毒素，通过荧光强度和吸光度来定量霉菌毒素。一些霉菌毒素含有单端孢霉烯团，最大吸收值
还不清楚，通常用气相色谱和气质联用色谱进行检测。这些样品在提取后，上样之前通常需要进行柱前衍生。TLC和HPLC的方法对单端孢霉烯团有效，但对黄
曲霉毒素的敏感性和特异性不强。TLC对谷物中的脱氧血腐镰刀菌烯醇的检测限是50～100μg/kg。

❸ 霉菌和酵母菌的测定还有什么方法

霉菌和酵母菌介绍及检测方法
一、霉菌和酵母菌介绍：
霉菌和酵母菌及其检验酵母菌是真菌中的一大类，通常是单细胞，呈圆形,卵圆形、腊肠形或杆状。霉菌也是真菌，能够形成疏松的绒毛状的菌丝体的真菌称为霉菌。
霉菌和酵母广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。长期以来，人们利用某些霉菌和酵母加工一些食品，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美；还可利用霉菌和酵母酿酒、制酱；食品、化学、医药等工业都少不了霉菌和酵母。但在某些情况下，霉菌和酵母也可造成中腐败变质。由于它们生长缓慢和竞争能力不强，故常常在不适于细菌生长的食品中出现，这些食品是pH低、湿度低、含盐和含糖高的食品、低温贮藏的食品，含有抗菌素的食品等。由于霉菌和酵母能抵抗热、冷冻，以及抗菌素和辐照等贮藏及保藏技术，它们能转换某些不利于细菌的物质，而促进致病细菌的生长；有些霉菌能够合成有毒代谢产物－霉菌毒素。霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在新鲜的和加工的食品中繁殖，可使食品发生难闻的异味，它还可以使液体发生混浊，产生气泡，形成薄膜，改变颜色及散发不正常的气味等。因此霉菌和酵母也作为评价食品卫生质量的指示菌，并以霉菌和酵母计数来制定食品被污染的程度。目前已有若干个国家制订了某些食品的霉菌和酵母限量标准。我国已制订了一些食品中霉菌和酵母的限量标准。
二、检验方法：
霉菌和酵母的计数方法，与菌落总数的测定方法基本相似。主要步骤为：将样品制作成10倍梯度的稀释液，选择3个合适的稀释度，吸取1mL于平皿，倾注培养基后，培养观察，计数。对霉菌的计数，还可以采用显微镜直接镜检计数的方法。
具体检测标准参见：
GB4789.15-94，《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验霉菌和酵母计数》
三、说明：
1．样品的处理。为了准确测定霉菌和酵母数，真实反映被检食品的卫生质量，首先应注意样品的代表性。对大的固体食品样品，要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料，再混合磨碎。如样品不太大，最好把全部样品放到灭菌均质器杯内搅拌2min。液体或半固体样品可用迅速颠倒容器25次来混匀。
2．样品的稀释：为了减少榈稀释倍数的误差，在连续递增稀释时，每一稀释度应更换一根吸管。在稀释过程中，为了使霉菌的孢子充分散开，需用灭菌吸管反复吹吸50次。
3．培养基的选择：在霉菌和酵母计数中，主要使用以下几种选择性培养基。
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（PDA）：霉菌和酵母在PDA培养基上生长良好。用PDA作平板计数时，必项加入抗菌素以抑制细菌。
孟加拉红（虎红）培养基：该培养基中的孟加拉红和抗菌素具有抑制细菌的作用。孟加拉红还可抑制霉菌菌落的蔓延生长。在菌落背面由孟加拉红产生的红色有助于霉菌和酵母菌落的计数。
高盐察氏培养基：粮食和食品中常见的曲霉和青霉在该培养基上分离效果良好，它具有抑制细菌和减缓生长速度快的毛霉科菌种的作用。
4．倾注培养。每个样品应选择3个适宜的稀释度，每个稀释度倾注2个平皿。培养基熔化后冷却至45℃，立即倾注并旋转混匀，先向一个方向旋转，再转向相反方向，充分混合均匀。培养基凝固后，把平皿翻过来放温箱培养。大多数霉菌和酵母在25－30℃的情况下生长良好，因此培养温度25~28℃。培养3d后开始观察菌落生长情况，共培养5d观察记录结果。
5．菌落计数及报告：选取菌落数10~150之间的平板进行计数。一个稀释度使用两个平板，取两个平板菌落数的平均值，乘以稀释倍数报告。固体检样以g为单位报告，液体检样以mL 单位报告。关于稀释倍数的选择可参考细菌菌落总数测定。
6．霉菌直接镜检计数法：对霉菌计数，可以采用直接镜检的方法进行计数。
在显微镜下，霉菌菌丝具有如下特征：
平行壁：霉菌菌丝呈管状，多数情况下，整个菌丝的直径是一致的。因此在显微镜下菌丝壁看起来象两条平行的线。这是区别霉菌菌丝和其他纤维时最有用的特征之一。
横隔：许多霉菌的菌丝具有横隔，毛霉、根霉等少数霉菌的菌丝没有横隔。
菌丝内呈粒状：薄壁、呈管状的菌丝含有原生质，在高倍显微镜下透过细胞壁可见其呈粒状或点状。
分枝：如菌丝不太短，则多数呈分枝状，分枝与主干的直径几乎相同，有分枝是鉴定霉功得出可靠的特征之一。
菌丝的顶端：常呈钝圆形。无折射现象。
凡有以上特征之一的丝状均可判定为霉菌菌丝。
观察视野中有无菌丝，凡符合下列情况之一者为阳性视野。
一根菌丝长度超过视野直径1/6；
一根菌丝长度加上分枝的长度超过视野直径1/6；
两根菌丝总长度超过视野直径1/6；
三根菌丝总长度超过视野直径1/6；
一丛菌丝可视为一个菌丝，所有菌丝（包括分枝）总长度超过视野直径1/6。
根据对所有视野的观察结果，计算阳性视野所占比例，并以阳性视野百分数（%）报告结果。计算公式：
每件样品阳性视野（%）=（阳性视野数 / 观察视野数）×100

❹ 食物中的霉菌可以用什么方法检测出来

一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法
一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法是利用单克隆抗体而设计的固相免疫分析法。由此产生的一步式黄曲霉毒素快速检测试纸可在5—10分钟完成对样品中黄曲霉毒素的定性测定.借助黄曲霉毒素标准样品这种方法能估算黄曲霉毒素的含量，非常适用于现场测试和进行大量样品的初选。

❺ 怎么用最简单最快捷的方法检测水中霉菌

这个我是听同学说的，德国拜发公司的RIDA® Count系列微生物测试片，可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、大肠杆菌计数、霉菌和酵母计数、肠杆菌等。

采用霉菌和酵母菌快速检验纸片检测样品中霉菌和酵母菌，仅需25℃恒温培养，在48小时内即可完全对样品中的霉菌和酵母菌进行计数。

其他方法比如PCR等。

❻ 霉菌试验是什么

霉菌试验就是检测产品抗霉菌的能力和在有利于霉菌生长的条件下（即高湿温暖的环境中和有无机盐存在的条件下），设备是否受到霉菌的有害影响。
GJB150A-2009《军设备环境试验方法-霉菌试验方法》中两组不同试验菌种对主要非金属材料影响的研究。分析、论证同一种材料在相同涂覆工艺与加工工艺的试验件在长霉程度、长霉等级上的差异。

菌种包含：
一组：
黑曲霉（Aspergillus niger）AS3.3928
绳状青霉(Penicillium funiculosum)AS3.3875
土曲霉（Asp.terreus）AS 3.3935
宛氏拟青霉（Paecilomyces varioti）AS3.4253
绿色木霉(Trichoderma viride)AS 3.2942
赭色青霉(Penicillium ochrochloron)AS3.4302，
短柄帚霉（Scipulariopsis breuicaulis） AS3.3985

二组：
黄曲霉Aspergillus Flavus AS3.3950
杂色曲霉Aspergullus versicolor AS3.3885
绳状青霉Penicillium funiculosumAS3.3875
球毛壳霉Chaetomium globosum AS3.4254
黑曲霉（Aspergillus niger）AS3.3928

霉菌试验的标准有：
GJB 150.10A-2009军设备环境试验方法霉菌试验
HB 6167.11-1989民用飞机机载设备环境条件和试验方法 霉菌试验.
GJB4.10舰船电子设备环境试验 霉菌试验
GB T 2423.16-1999电工电子产品环境试验 第2部分 试验方法 试验J和导则长霉
GB/T10588-2002 GB 10588-89

❼ 饲料中霉菌毒素怎么检测

霉菌毒素的检测方法很多，但由于霉菌毒素的化学结构和物理化学特性复杂，在样品中分配不均和基质的干扰，使其分析更加复杂。饲料的样品基质对霉菌毒素的影响最大，因为饲料是由多种物质混合在一起的，不同的物质中的霉菌毒素检测的程序是不同的。

通常，首先要对怀疑被污染的物质进行严格的样品处理，从样品中提取毒素，分析之前再进行洗脱除去杂质的干扰。在实际的分析中，有些方法可直接进行分离和定量，有些方法在分离和定量之前需要对霉菌毒素进行衍生。

有些霉菌毒素具有一个荧光特性的发色基团，如黄曲霉毒素(AF)、赭曲霉毒素(OT)、玉米赤霉烯酮(ZE)，样品的提取物经常用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)来分离结构相似的化合物和污染物。

通过比较样品和标准品色谱的比移值(Rf)和保留时间来定性霉菌毒素，通过荧光强度和吸光度来定量霉菌毒素。一些霉菌毒素含有单端孢霉烯团，最大吸收值还不清楚，通常用气相色谱和气质联用色谱进行检测。这些样品在提取后，上样之前通常需要进行柱前衍生。

TLC和HPLC的方法对单端孢霉烯团有效，但对黄曲霉毒素的敏感性和特异性不强。TLC对谷物中的脱氧血腐镰刀菌烯醇的检测限是50～100μg/kg。

❽ 黄曲霉菌的检验

黄曲霉菌菌落生长较快，10～14天直径3～4或6—7cm。菌落正面色泽也随其生长由白色变为黄色及黄绿色，呈半绒毛状。孢子成熟后颜色变为褐色。表面平坦或有放射状沟纹，反面无色或带褐色。
在低倍显微镜下观察可见分生孢子头呈疏松放射状，继而为疏松柱状。
制片镜检观察，可见分生孢子梗很粗糙。顶囊呈烧瓶形或近球形。
分生孢子在小梗上呈链状着生，分生孢子的周围有小突起、球形、粗糙。 可归纳为化学方法、生物学方法和免疫学方法三大类。
1、生物学方法
1）抑菌试验
黄曲霉菌有抑制某些微生物生长的作用，故用其抑菌作用来测定黄曲霉菌的存在和含量。已经发现巨大芽胞杆菌和短芽胞杆菌对AFT最敏感。通过平皿中抑菌圈大小来衡量黄曲霉菌含量。
2 ）荧光测定法
根据黄曲霉菌在紫外光照射下可发出荧光的原理，将待检菌株接种于培养基中，28—30~C培养48～72小时，产生的毒素便浸入培养基中，在紫外灯光下照射培养基会呈现出特异的荧光。此法操作简便。对AFT最低检出量为5pg/ml。·
3）大白鼠试验法
黄曲霉菌对大白鼠毒性最早出现损害的是肝脏，其受损范围广，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100－150g大白鼠作急性中毒试验，一般3—4天死亡。
4）鸡胚试验
5）鸭雏试验
鸭雏对黄曲霉菌非常敏感，致死性强，一般用一次剂量后72小时内死亡。
6）斑点试验
本法用于检测真菌毒素致突变试验的一种有意义的方法。主要利用沙门氏菌/微粒体突变性来检测某些样品种AFT的存在与含量。
A先将鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型变种的菌悬液，与一定量肝组织匀浆混合作倾注平板。
B待凝固后，再将一定量被检物(含AFT)加在平板中央待黄曲霉菌往外围琼脂中扩散时，围绕中心点将出现密布的回复突变的菌落。
本法作为一种生物学检验法广泛应用于开发安全、有用的化学物质和检测食品或农产品中黄曲霉菌。
2．免疫学方法
黄曲霉菌是分子量为312～346的二氢呋喃香豆素的衍生物，无免疫原性，不能引起抗体的产生，故必须与大分子化学基团或蛋白质偶联，成为完全抗原，方能引起免疫动物的抗体形成，然后利用血清学方法检测AFT。
由于黄曲霉菌的量一般都较低，因此，检测方法主要是敏感性较高的放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。近几年来，国外已成功制备了测定B1的酶联免疫测定盒及检测乳中Ml含量的RIA检测盒。这两种检测盒都十分方便，而且快速准确。

❾ 微生物限度检查的细菌,霉菌方法

霉菌检测方法：称25g样品,加入生理盐水或PBS缓冲液225mL.选择适宜的稀释倍数,吸取1ml加入无菌平板,然后加入孟加拉红培养基,29摄氏度培养5-7天.从第三天开始计数.

❿ 检测食物中霉菌微生物可以用什么方法

食品中霉菌可引起食物霉变，还会刺激人体消化道、胃部等，严重的还可损伤肝脏，造成食物中毒。
一般检测可以用孟加拉红培养基检测，或者用霉菌总数检测纸片都可以的。