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葡萄糖测定干化学法怎么做啊

发布时间:2022-09-02 10:13:51

① 什么是葡萄糖测定(干化学法)

菲林试剂..

② 如何测定葡萄中的葡萄糖含量

葡萄糖氧化酶法。
1.原理
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质,该有色物质在625 nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过侧定蓝色物质的吸光度值可计算样品中葡萄糖的含量。
2.仪器
①实验室常用设备。
②722型分光光度计。
3.试剂
除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
①三氯乙酸(40%):称取4.0 g三氯乙酸,用水溶解并稀释至100 mL。
②无水乙醇。
③2 mol·L-1NaOH溶液:称取8 g NaOH,用水溶解并稀释至100 mL。④1%邻联甲苯胺溶液:称取0.1 g邻联甲苯胺溶解于10 mL无水乙醇中,倒人棕色瓶中,4℃冰箱保存。
⑤乙酸缓冲液(pH5.O):称取14.28 g乙酸钠(CH。COONa.3H20)溶于水中,加入2.7mL冰乙酸,使pH为5.O,用水定容至1L。
⑥葡萄糖氧化酶溶液:称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解,使酶含量为100U/mL。4℃冰箱保存一周。
⑦过氧化物酶溶液:0.010 g辣根过氧化物酶溶于10 mL7J(~,4℃冰箱保存一周。
⑧酶溶液:取100 mL乙酸缓冲液,分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各l mL,混匀。4℃冰箱可保存7周。
⑨酶空白液:取100 mI。乙酸缓冲液,分别加人邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各l mL,混匀。4℃冰箱保存1周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶)
⑩葡萄糖标准液:将葡萄糖标准品(纯度大于99%)于80℃干燥至恒量。精确称取O·050 g,用水移人100 mL容量瓶中,定容至刻度线。此标准液相当于浓度为0.5 mg.mI。_。。
4.操作步骤
①样品处理
a.固体样品:称取0.5~5 g已粉碎的样品于锥形瓶中,加入50 mL水后沸水浴15 min。冷却后,转移至100 mL容量瓶中并用水定容至刻度,反复摇动混匀样品,过滤,弃初始几滴滤液。收集滤液,如果滤液澄清,可直接用于测定或稀释后用于测定。如果滤液浑浊,吸取20mL滤液转移至另一容量瓶中,加人无水乙醇至刻度。混合后静置至少30 min,过滤,滤液用于测定。
b·液体样品或少糖、淀粉等碳水化合物水解液:吸取2~10 mL样品或水解液,加入4倍
量无水乙醇(使乙醇最终浓度为80%,以沉淀不溶性多糖和部分蛋白质),混合。静置至少30
min,过滤后滤液定容备用(如果过滤后滤液仍浑浊,或样液体积过少,可于3 000 r/min离心15
min,上清液备用)。
c.新鲜牛乳等样品:吸取0.5~2 mL样品,用水稀释,加入3 mL 40%三氯乙酸溶液(用于沉淀蛋白质),用水定容至100 mL,过滤。吸取5 mL滤液,用2 m01.L一,NaOH调节pH至中性,用水定容至i0 mL,备用。
②测定
a-标准空白管的制备:在试管中加入0.5 mL水和5 mL酶溶液。
b·标准管的制备:5支试管中先分别加入葡萄糖标准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL,再分别加入水0.4、0.3、0.2、0.1.0.0 mL,最后各加入酶溶液5 mL。
c·样品空白管的制备:在试管中加人0.5 mI。样品提取液和5 mI。酶空白液。
d·样品测定管的制备:在试管中加人0.5 mL样品提取液和5 mL酶溶液。
将上述各试管中溶液混合后于37℃水浴反应15 rain,625nm测定吸光度值。(注意:反应时间应严格控制,因葡萄糖与酶溶液的成色反应与反应时间密切相关,
5.计算
根据吸光度值求出葡萄糖标准曲线的回归方程,采用插入法求出测定管中葡萄糖含量,再根据稀释定容体积和称样量,计算出样品中葡萄糖含量。
6.说明
①此法适用于谷类、乳类、饮料、酒类等食品样品和血液样品。检出量为0.02 mg。
②此方法中的酶溶液只能和葡萄糖反应,特异性强,灵敏度高。
③如果样品提取液为无色,不需做样品空白。有色样品或样品提取液浑浊,则应做样品空白以减少干扰。

③ 初中化学实验(测定某种水果中是否含有葡萄糖) 具体步骤 理化实验操作紧张啊

1、取少量水果萃取液(或者少量果汁),加氢氧化钠至碱性。
2、加少量新制氢氧化铜,加热(煮沸)。
3、观察,如有砖红色沉淀(Cu2O,氧化亚铜)产生,则证明有葡萄糖。

④ 如何测定葡萄糖含量

可以通过以下方法测量葡萄糖含量:
1、如果糖样中没有别的带醛基的有机物,可以用DNS法测还原糖。
2、如果糖样中有别的带醛基的有机物,可以考虑采用高效液相色谱法(HPLC)。
3、其它也有一些方法,比如碘量法等。

⑤ 干化学法测定血糖的方法

干化学葡萄糖氧化酶法:特异强、价廉、方法简单,是目前国内首选的测定血糖方法。其正常值:空腹全血为3.5-5.3毫摩尔/升(55-95毫克/分升),血浆为3.9-5.1毫摩尔/升(70-110毫克/分升)。

干化学邻甲苯胺法:结果较可靠,由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来,因而不易出现假性过高或过低。其正常值:空腹全血为3.3-5.5毫摩尔/升(50-100毫克/分升),血浆为3.9-5.4毫摩尔/升(70-115毫克/分升)。

(5)葡萄糖测定干化学法怎么做啊扩展阅读:

血糖的来源包括:

①食物消化、吸收;

②肝内储存的糖元分解;

③脂肪和蛋白质的转化。血糖的去路包括:

①氧化转变为能量;

②转化为糖原储存于肝脏、肾脏和肌肉中;

③转变为脂肪和蛋白质等其他营养成分加以储存。胰岛是体内调节血糖的血糖浓度的主要器官,肝脏储存肝糖元。此外,血糖浓度还受神经、内分泌激素的调节。

⑥ 葡萄糖和乳酸测定的方法

葡萄糖和乳酸测定的方法:用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色—棕色—砖红色(沉淀)。

斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。

临床意义

乳酸反映组织对氧的需求与血液的供氧能力是否平衡。乳酸增高可见于各种原因引起的乳酸酸中毒、高乳酸血症、正常人做缺血性运动实验等。其中引起乳酸酸中毒的原因主要包括:

心、肺功能障碍、血管阻塞、休克、贫血、心衰、窒息、CO中毒等可引起组织严重缺氧,导致乳酸酸中毒。双胍类药物、某些醇类药物、扑热息痛以及水杨酸盐的应用均可引起体内乳酸堆积,导致乳酸酸中毒。

以上内容参考:网络-乳酸测定

⑦ 求三种葡萄糖的测定方法(除了碘量法)

1、乙酰化法,用过量乙酸酐酯化Glc,用NaHCO3除去多余的乙酸酐,然后用碱处理Glc乙酰化产物,测水解出来的乙酸根的量,n(Glc):n(乙酸根)=1:5

2、高碘酸法:用高碘酸盐处理Glc,Glc一般是吡喃糖,遇高碘酸盐反应产生甲酸,测生成的甲酸的量,n(甲酸):n(Glc)=1:1

3、糠醛-蒽酮法:用热的12%HCl处理Glc,然后用蒽酮处理,形成蓝绿色复合物,然后用分光光度法

4、糠醛-间苯二酚法:用热的12%HCl处理Glc,然后用间苯二酚处理,形成红色复合物,然后用分光光度法

——PS第三、四招都不大好用,Glc作为己醛糖,与12%HCl进行糠醛反应的时间慢,而且如果共热的时间太长,还会形成暗黑色的腐黑物(糠醛反应,一般用来测戊糖或者己酮糖)



如果lz测的Glc里面含有别的糖,那必须先预处理掉

⑧ 葡萄糖测定干化学法

1、干化学分析技术是相对于湿化学技术而言的,是指将液体检测样品直接加到为不同项目特定生产的商业化的干燥试剂条上,以被测样品的水分作为溶剂引起特定的化学反应,从而进行化学分析的方法,是以酶法为基础的一类分析方法,又有干试剂化学或固。

⑨ 检验葡萄糖的方法

(1)在试管中加入几毫升10%NaOH溶液,滴加5%的CuSO4溶液4-5 滴,可看到蓝色沉淀现象.
(2)立即加入适量的待测溶液,在酒精灯上加热至沸,观察到产生红色沉淀现象,即可证明含有葡萄糖.

⑩ 测定葡萄糖含量的方法

 
 
 
 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 
摘要  运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握Na2S2O3及I2标准溶液的配制和标定方法,巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法和原理,进一步掌握返滴定法技能。其中,葡萄糖分子中含有醛基,能被IO-定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的I2在碱性条件下加入葡萄糖溶液中,使醛基完全转化为羧基。再将其酸化,用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2。所用指示剂为淀粉。根据所加I2标准溶液的量及滴定所耗Na2S2O3标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系,便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高,基本符合实验要求。 
关键词  葡萄糖注射液  间接碘量法  返滴定法 
1引言 
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定目前有以下几种方法 方案一:旋光测定法 
根据葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子,具有旋光性,可采用旋光法测定含量。取出旋光计的测定管,先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液体(5%葡萄糖注射液)冲洗数次,缓缓注入供试液体适量(注意勿使发生气泡)。置于旋光计内,读取旋光度,连续测定3次,取平均值。 方案二:间接碘量法。 
碘与NaOH作用能生成NaIO,而C6H12O6能定量地被NaIO氧化。在酸性条件下,未与C6H12O6作用的NaIO可转变为I2析出,只要用标准Na2S2O3溶液滴定析出的I2,便可计算C6H12O6的含量。 
本实验采用第二种方案进行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。 
2实验原理 
    在碱性溶液中,碘与氢氧化钠作用可生成次碘酸钠(NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸钠氧化成葡萄糖酸(C6H12O7)。过量的NaIO可以转化为NaIO3和NaI。在酸性条件下,NaIO3和NaI作用析出I2,然后用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2,便可计算出葡萄糖的含量。其反应如下: 
1、I2与NaOH作用:      I2+2NaOH=NaIO+NaI+H2O 
2、C6H12O6和NaIO定量作用:  C6H12O6+ NaIO=C6H12O7+NaI     3、总反应式:       I2+C6H12O6+2NaOH=C6H12O7+2NaI+H2O 

 
4、C6H12O6作用完后,过量的NaIO发生歧化反应:   3NaIO=NaIO3+2NaI 5、在酸性条件下NaIO3和NaI作用:   NaIO3+5NaI+6HCl=3I2+6NaCl+3H2O 6、析出过量的碘用Na2S2O3标准溶液滴定:  I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI 实验还涉及到Na2S2O3和 I2溶液的标定 
1、Na2S2O3的标定    Cr2O72-+6I-+14H+=2Cr3++3I2+7H2O                          I2+2S2O32-=S4O62-+2I
-      
                                     
Cr2O72-~3I2~6S2O32-    
             3
223
227
223
2200.256)(6OSNaOSNaOCrKOSNa
VcVcVc

   
      
2、碘的标定        I2+2S2O32-
=S4O62-+2I

              
        V
Vc3
22322OSNaOSNac2/1
 
3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量  
   
计算式:
%10050
6
126
L
gOHCW标示量
葡萄糖含量 
3实验仪器及材料 
3.1 仪器 
    称量瓶、电子台秤、分析天平、容量瓶(250ml)、移液管(25ml)、量筒(10ml)、锥形瓶(25ml,3个)、酸式滴定管(50ml)、烧杯(50ml)、玻璃棒、碘量瓶 3.2 药品 
    K2Cr2O7(S)、盐酸(6mol/L)、KI溶液(100g/L)、淀粉(5g/L)、Na2S2O3溶液(0.1mol/L)、I2溶液(0.05mol/L)、NaOH溶液(1mol/L)、葡萄糖注射液(5%) 
4 实验方法 
4.1 0.1mol/L Na2S2O3标准溶液的标定 4.1.1 K2Cr2O7标准溶液的配制 
    准确称取1.2~1.3g分析纯K2Cr2O7固体于小烧杯中,加少量的水溶解并转入到250mL的容量瓶中,用水稀释到刻线,摇匀。并计算其准确浓度 

)
(100000
.25100021101612632232222

LgOHCMOSNavOSNacIvIc葡萄糖含量=

 
4.1.2  Na2S2O3溶液的标定 
    准确移取25mlK2Cr2O7标准溶液于碘量瓶中,加5mL 6mol/L HCl溶液和10mL 100g/LKI,立即密塞摇匀,置暗处5min,然后冲洗瓶盖并用蒸馏水稀释至100 mL左右,用待标定Na2S2O3溶液滴定至K2Cr2O7标准溶液呈浅黄绿色时,加2mL 5g/L淀粉,继续滴定至蓝色刚好褪去,记录所需体积,平行测定3次,计算Na2S2O3溶液的准确浓度。 4.2  0.05mol/L I2溶液的标定 
    准确移取25mLI2标准溶液于锥形瓶中,加50ml蒸馏水,用Na2S2O3标准溶液滴定至溶液呈浅黄绿色,加2ml 5g/L淀粉,继续滴定至蓝色刚好褪去,溶液呈无色即为终点。 4.3  葡萄糖含量的测定 
    用移液管移取5%葡萄糖注射液25.00ml于250ml容量瓶中,加水稀释至刻线,摇匀。然后移取25.00ml上述溶液于碘量瓶中,准确加入I2标准溶液25ml,慢慢滴加NaOH边加边摇,直至溶液呈浅黄色,将碘量瓶加塞摇匀,于暗处放置10~15min,加2ml 6mol/L HCl酸化,立即用Na2S2O3标准溶液滴定,至溶液呈浅黄色,加2ml 5g/L淀粉,继续滴定至蓝色消失即达到滴定终点,记录数据,平行滴定3次,计算其含量。

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