1. 血清葡萄糖测定方法与原理
GOD_POD法,葡萄糖氧化酶(GOD)利用氧将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,同时释放过氧化氢,过氧化物酶(POD)催化过氧化氢氧化色素原,并使色素原氧化成色素,即Trinder反应,红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比,利用分光光度技术,即可测得血糖浓度。。。
2. 如何测定葡萄糖含量
可以通过以下方法测量葡萄糖含量:
1、如果糖样中没有别的带醛基的有机物,可以用DNS法测还原糖。
2、如果糖样中有别的带醛基的有机物,可以考虑采用高效液相色谱法(HPLC)。
3、其它也有一些方法,比如碘量法等。
3. 血清葡萄糖浓度测定
血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.资料-实验一 血糖的斐林法测定一,实验目的掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法.二,实验原理1.血糖指的是血液中哪一种糖 葡萄糖是血液主要的糖类,因此测血糖含量就是测血液中葡萄糖的含量.2.用什么方法测定 测定血液中葡萄糖的含量,即测复杂组分中一种物质的量,根据生化实验基本技术的原理,可采用分光光度法(比色法)进行测定.3.葡萄糖可以用比色法直接测定吗 不行,可以用间接的方法.血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色).血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定.三,材料,仪器与试剂(一),材料:动物血液(二),仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定)分光光度计,血糖管,奥氏吸管,水浴锅,表面皿(三),药品(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后并配制)标准葡萄糖溶液,碱性硫酸铜溶液(A,B液),酸性钼酸盐溶液,10%钨酸钠溶液,0.33mol/L硫酸溶液四,实验操作:1.无蛋白血滤液的制备用奥氏吸管吸取已加抗凝剂的全血1ml,缓缓放入20ml锥形瓶中,加水7ml,摇匀,血液变成红色透明时加10%钨酸钠1ml, 摇匀,再加 0.33mol /L 硫酸,随加随摇,加完放置5~15min,至沉淀由鲜红变为暗棕色,滤纸过滤.每毫升无蛋白血滤液相当于0.1ml全血.2.血糖的测定取具25ml刻度的血糖管3只,编号,用奥氏吸管吸取无蛋白血滤液2ml,放入第一只血糖管中,于第二只血糖管中加2ml标准葡萄糖溶液.第三只血糖管中加2ml蒸馏水.然后各加2ml新配置的碱性硫酸铜溶液,同时置沸水浴内煮6min,取出,在流水中迅速冷却,各加入4ml酸性钼酸盐溶液,1min后以蒸馏水稀释至25ml,混匀,倒入比色杯,用722型风光光度计于420~440nm波长比色(先以空白管调节零点,然后测标准管和样品管).五,计算按下式计算100ml全血中所含的血糖质量(mg).m= A1C0A0 / 0.1 x100式中:m:100ml血中所含的糖质量C0:标准葡萄糖溶液浓度A1:样品溶液吸光度A0:标准溶液吸光度六,注意事项1.欲得准确结果,所取血液的量必须准确.如果由吸管中放出血液的速度太快,会有大量血液粘在吸管内壁,容量不准,所以一般放出1ml血液所用的时间不应少于1min.2.沉淀由鲜红变为暗棕色,是因钨酸钠与硫酸作用生成钨酸,在适当酸度时,使血红蛋白变性,沉淀.如血沉淀放置后不变为棕红色或重滤后仍混浊,可在钨酸与血混合液中加入10%硫酸1~2滴,待变为暗棕色后再滤.
4. 葡萄糖测定干化学法测的是指尖血还是静脉血
指尖血
5. 什么是葡萄糖测定(干化学法)
菲林试剂..
6. 求三种葡萄糖的测定方法(除了碘量法)
1、乙酰化法,用过量乙酸酐酯化Glc,用NaHCO3除去多余的乙酸酐,然后用碱处理Glc乙酰化产物,测水解出来的乙酸根的量,n(Glc):n(乙酸根)=1:5
2、高碘酸法:用高碘酸盐处理Glc,Glc一般是吡喃糖,遇高碘酸盐反应产生甲酸,测生成的甲酸的量,n(甲酸):n(Glc)=1:1
3、糠醛-蒽酮法:用热的12%HCl处理Glc,然后用蒽酮处理,形成蓝绿色复合物,然后用分光光度法
4、糠醛-间苯二酚法:用热的12%HCl处理Glc,然后用间苯二酚处理,形成红色复合物,然后用分光光度法
——PS第三、四招都不大好用,Glc作为己醛糖,与12%HCl进行糠醛反应的时间慢,而且如果共热的时间太长,还会形成暗黑色的腐黑物(糠醛反应,一般用来测戊糖或者己酮糖)
另
如果lz测的Glc里面含有别的糖,那必须先预处理掉
7. 葡萄糖测定干化学法
1、干化学分析技术是相对于湿化学技术而言的,是指将液体检测样品直接加到为不同项目特定生产的商业化的干燥试剂条上,以被测样品的水分作为溶剂引起特定的化学反应,从而进行化学分析的方法,是以酶法为基础的一类分析方法,又有干试剂化学或固。
8. 有几种方法测定葡萄糖含量各自的原理是什么
有两种方法来测定。
第一种用菲林试剂来测定,原理为:
CH2OH(CHOH)4CHO+2[Ag(NH3)2OH](水浴加热)→CH2OH(CHOH)4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O
注意事项:⑴ 试管内壁必须洁净
⑵ 银氨溶液随用随配不可久置;
⑶ 水浴加热,不可用酒精灯直接加热;
⑷ 可加入氢氧化钠,以促进反应进行;
⑸ 银镜可用稀HNO3浸泡洗涤除去。
加热还原生成的银附着在试管壁上,形成银镜,所以,这个反应也叫银镜反应。
第二种用新制的氢氧化铜溶液来测定,原理为:
葡萄糖溶液与新制氢氧化铜悬浊液反应生成砖红色沉淀。(浓度高时生成黄色沉淀)
CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O
注意事项:⑴ 新制2Cu(OH)2悬浊液要随用随配、不可久置。
⑵ 配制新制Cu(OH)2悬浊液时,所用NaOH溶液必须过量。
⑶ 反应液必须直接加热至沸腾。
⑷ 葡萄糖分子中虽然含有醛基,但是d-葡萄糖中不含有醛基。
葡萄糖是自然界分布最广且最为重要的一种单糖,它是一种多羟基醛。
纯净的葡萄糖为无色晶体,有甜味但甜味不如蔗糖(一般人无法尝到甜味),易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右,故属于“右旋糖”。
葡萄糖在生物学领域具有重要地位,是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物,即生物的主要供能物质。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应用。
化学性质
它是自然界分布最广泛的单糖。葡萄糖含五个羟基,一个醛基,具有多元醇和醛的性质。
用途:
生物培养基。金属还原剂。滴定硼酸的络合物形成剂。微量分析。测定全血葡萄糖。可直接被人体吸收。
正常人体每分钟利用葡萄糖的能力为每公斤体重6毫克。是一种能直接吸收利用,补充热能的碳水化合物,是人体所需能量的主要来源,在体内被氧化成二氧化碳和水,并同时供给热量,或以糖原形式贮存。能促进肝脏的解毒功能,对肝脏有保护作用。是生物体内最为常见的能源物资。