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直接化学发光标记物有哪些

发布时间:2022-09-27 19:17:56

⑴ 电化学发光免疫分析采用什么物质标记抗体(抗原)

正确答案:A
解析:直接化学发光免疫分析是用化学发光剂(如吖啶酯)直接标记抗体(抗原)
。化学发光酶免疫分析采用辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)标记抗体(抗原),在辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析系统中加入鲁米诺发光剂、H[XB2
.gif]O[XB2
.gif]和化学发光增强剂使其产生化学发光
。电化学发光免疫分析与一般化学发光分析不同,是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)微电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程

⑵ 直接化学发光免疫分析使用的发光底物为

正确答案:E
解析:吖啶酯常用于直接标记发光;HRP标记的化学发光免疫分析的发光底物为鲁米诺;碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析的发光底物为AMPPD;三联吡啶钌用于电化学发光免疫分析

⑶ 核酸的标记物有哪些

核酸标记物有以下几类
1.核素标记物
放射性核素是目前应用最多的一类探针标记物。放射性核素的灵敏度极高,可以检测到10-14~10-18克的物质,在最适条件下可以测出样品中少于1000个分子的核酸含量。常用标记核酸探针的核素有32P、3H、35S,在Southern印迹杂交中以“P最常用。还应根据标记方法的不同选择相应标记方位的核素,一般情况下,大多数标记方法需要的是a—32P,而5,末端标记必须是r-32P。
2.非放射性标记物
多年来,科学家们致力于寻找一些安全、可靠、灵敏度高的物质代替放射性核素用于核酸分子杂交,并取得了一定的进展,部分非放射性标记物已在国内外逐步推广使用。其优点是无放射性污染,可以较长时间存放,从而更便于临床诊断等方面的应用。但此类非放射性标记物的缺点是灵敏度及特异性都不太高。根据其检测方法,非核素标记物可分为以下4类。
(1)半抗原:生物素(biotin)和地高辛(DIG)都是半抗原,可以利用这些半抗原的抗体进行免疫学检测,根据显色反应检测杂交信号。这两种物质是目前使用较普遍的非核素标记物。
(2)配体:生物素不仅是半抗原,故可用生物素与亲和素反应进行杂交信号的检测。
(3)荧光素:如FITC、罗丹明类等,可以发出紫荧光进行观察,主要适用于细胞原位杂交。
(4)化学发光探针:一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象,通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。化学发光探针可能是今后非核素标记物研究的主要方向。

⑷ 化学发光酶免疫测定中常用来标记抗原或抗体的物质是

化学发光一般用鲁米诺作为底物,双氧水做氧化剂,用过氧化物酶催化。所以应用过氧化物酶来标记。

⑸ 化学发光有什么试剂

您好!

原理:
化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。

间接发光又称能量转移化学发光,它主要由三个步骤组成:首先反应物A和B反应生成激发态中间体C*(能量给予体);当C*分解时释放出能量转移给F(能量接受体),使F被激发而跃迁至激发态F*;最后,当F*跃迁回基态时,产生发光。

化学发光分析测定的物质可以分为三类:第一类物质是化学发光反应中的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂;第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质,进一步扩大化学发光分析的应用范围。

物质:
萤火虫、蜡蝉等昆虫体内化学组分(如腺苷酰萤光素等)的发光作用。

⑹ 化学发光剂的常用发光剂

酶促反应的发光底物
酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物,目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-(2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基伞形酮磷酸盐(4-MUP,荧光底物)。
(1).鲁米诺或其衍生物。 鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,通常以0.1mol/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光,而在最后光强度测定中造成空白干扰,因而宜分别配制成2瓶试剂溶液,只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂(如邻-碘酚)或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间,提高发光敏感度。
(2).对-羟基苯乙酸(HPA)。 对-羟基苯乙酸(HPA)在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体(荧光物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长的荧光,可用荧光光度计测量。
(3).AMPPD。 AMPPD在碱性条件下,被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有2-30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度达到高峰,15-60min内光强度保持相对稳定。
(4)4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮,在360nm的激发光的作用下,发出448nm的荧光,用荧光光度计进行测量。
直接化学发光剂
直接化学发光剂不需酶的催化作用,只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质,如吖啶酯(acridinium, AE)在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。
电化学发光剂
电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+(图16-7)和电子供体三丙胺(TPA)在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价,成为强氧化剂,TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+,它很不稳定,可自发地失去一个质子(H+),形成自由基TPA.,成为一种很强的还原剂,可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+.。激发态的三联吡啶钌不稳定,很快发射出一个波长为620nm的光子,回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,使光信号增强。

⑺ 点化学发光分析技术中,最常使用的标记物是选哪个选项

化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统.化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额.免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上,或酶作用于发光底物. 化学发光免疫分析根据其所采用的标记物的不同可分为发光物标记、酶标记和元素标记化学发光免疫分析三大类.发光物标记的CLIA是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物(如吖啶酯),在反应体系中发光物质在碱性介质中氧化时释放大量自由能,产生激发态的中问体,该激发态的中间体由最低振动能级回到稳定的基态,各个振动能级产生辐射时,同时产生能量,多余的能量即为发射光子,从而产生发光现象.利用发光信号的测量仪器,分析接收的光量子产额,通过计算机系统转换成被测物质的浓度单位.在此系统中包含两个部分,化学发光反应系统和免疫反应系统,即在抗原一抗体特异性反应过程中,伴随有化学反应过程而产生光的发射现象.化学反应系统中以化学反应为基础,化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发,当这种分子回到基态时释放出光子. 化学发光与荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同.荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光;化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光.因此,化学发光反应过程必须产生足够的激发能是产生发光效应的重要条件.化学发光反应可在气相、液相或固相反应体系中发生,以液相发光在免疫学检测中最常应用.

⑻ 化学发光免疫分析法的原理

1、直接化学发光,标记物为吖啶酯(雅培)或者abei(新产业)
2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)
3、电化学发光,标记物为三联吡啶钌(罗氏)
括号内为代表厂家

⑼ 什么是化学发光免疫分析

1、直接化学发光,标记物为吖啶酯(雅培)或者ABEI(新产业)2、酶促化学发光,标记物为碱性磷酸酶(厦门波生)或者辣根过氧化物酶(强生)3、电化学发光,标记物为三联吡啶钌(罗氏)括号内为代表厂家

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