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免疫组织化学染色结果怎么看

发布时间:2022-11-05 11:03:15

‘壹’ 免疫组化结果如何判读

(1)首先要确定免疫组化技术是否合格,合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色,而阳性标志物清晰和定位明确。

(2)不仅要判断所检组织中有或无阳性标记物,还要注意阳性信号的分布部位和形态特征。一般说来,阳性信号应与被测抗原所在的部位一致。此处所说的部位包括组织和细胞的不同区域。

(3)阴性染色结果是组织内预期特定区域中未见抗原表达,但阴性结果不能立即认为是否定意义。

‘贰’ 免疫组化结果怎么看

如果是胃肠道,则是间质瘤,。如核分裂数目多及肿瘤直径>5cm,则可能为恶性间质瘤或具有恶性潜能的间质瘤。

‘叁’ 哪位高手帮我看看免疫组化数据结果依次什么意思。

这个病理报告写的很好。
从上可知,该报告应用的是WHO2010年版的诊断依据。
以前的MALT相关性边缘带B是一种相对惰性的淋巴瘤,局部疑有大细胞转化提示淋巴瘤肿瘤细胞的形态学变异,可能正在向非滤泡中心活化的B细胞起源的弥漫大B细胞淋巴瘤转化(这个可通过FISH检测最终确诊有无转化,但对治疗而言,按目前的诊疗流程无此必要,经济条件好可考虑)。
至于免疫组化的数据相对专业,需要有临床病理学基础和免疫学基础方能理解,在此不解释。它应用的目的是为确诊淋巴瘤的诊断作为参考依据。

‘肆’ 免疫组化原理、流程及结果分析

免疫组化原理
免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合,然后用HRP等标记的二抗与一抗进行结合,最后通过与DAB显色剂反应,进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的。
免疫组化更多的意义在于查看目的蛋白的定位。定量一般用western来实现。

免疫组化染色和HE染色的不同之处可能是HE染色比较粗略地辨认不同细胞形态学改变;而后者能够针对特异性细胞标志物来检测特异性细胞的改变(数量)、也可检测细胞内细胞因子的转位,组织中一些特异性蛋白的表达的量改变(通过图像分析系统分析颜色深浅、分布的面积等综合分析)。
通俗的讲,HE仅仅是看大体病理改变,比如组织坏死,比如炎性渗出。免疫组化,看你的目的蛋白的表达情况。

免疫组化和****HE****染色的对比
DAB和HE一样也是一种染色剂,HE染色相对简单,能分辨出细胞中的嗜酸嗜碱性物质;DAB染色全称应该叫做免疫组化DAB染色,经过一系列复杂的生化反应后,DAB(二氨基联苯胺)染色剂能将辣根过氧化物酶染成棕色。

常用的免疫组化染色方法:
组化用HRP的话,信号不够强。通常用生物素标记HRP来增强信号。
1、 ABC法(卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法)
ABC法是利用卵白素与生物素特有的高度亲和力特性,与生物素化二抗结合,形成抗原+特异性抗体+生物素化二抗+卵白素+生物素+HRP复合物,最后DAB显色。
复合物配制:先将生物素与酶结合,形成生物素化HRP,以生物素化HRP与卵白素按一定比例混合,形成卵白素-生物素-过氧化物酶复合物。
2、 SP法(抗生物素蛋白链酶素-过氧化物酶复合物)
本身没有连接生物素,但有两个生物素亲和力极高的结合位点,可以与二抗上的生物素结合,敏感性高,复合物不需要使用前混合,更为简便。
3、 PAP法
4、 直接法

样本制备

免疫组化结果分析
免疫组化结果的判断原则:
1 、必须设阳性对照和阴性对照。
2 、 抗原表达必须在特定部位。
3 、 阴性结果不能视为抗原不表达。

免疫组化染色实验组与对照组结果分析表

从表可以看出只有6、7实验结果有意义。1-5均因对照组的结果已否定Ab的特异性或IHC技术操作存在错误等而使实验结果失去意义,必须重复实验或换用Ab。

染色失败的几种情况及原因:
1、 所染的全部切片均为阴性结果,包括阳性对照在内。
2、 所有切片均呈阳性反应。
3、 所有切片背景过深。
4、 阳性对照染色良好,检测的阳性标本呈阴性反应。

所有切片呈阳性反应,其原因:
1、 切片在染色过程中抗体过浓,或干片了。
2、 缓冲液配置中未加氯化纳和PH值不准确, 洗涤不彻底。
3、 使用已变色的呈色底物溶液,或呈色反 应时间过长。
4、 抗体温育的时间过长。
5、 H 2 O 2 浓度过高,呈色速度过快且粘附剂太厚。

所有切片背景过深,其原因:
1、 内源性过氧化酶没有完全阻断。
2、 切片或涂片过厚。
3、 漂洗不够。
4、 底物呈色反应过久。
5、 蛋白质封闭不够或所用血清溶血。
6 、使用全血清抗体稀释不够。

阳性对照染色良好,检测的阳性标本呈阴性反应。
最常见的原因:标本固定和处理不当。

注意事项:
1、 苏木素复染时间需要摸索,尤其要考虑阳性染色的位置。
2、 切片脱蜡和水化要充分;加反应液时要覆盖组织充分;每次加液前甩干洗涤液,但又防止干片。
3、 以下原因可能导致片子着色不均匀:
①脱蜡不充分。可以60℃烤20min,立即放入新鲜的二甲苯中。
②水化不全。应经常配制新鲜的梯度乙醇。
③抗体没混匀。用移液器充分混匀一抗/二抗等试剂。④抗体孵育时,切片放倾斜。
⑤抗体孵育后PBS冲洗不充分。
⑥制片厚薄不均匀等问题。
⑦染片盒不平,切片倾斜。
4、 一抗的清洗:
1、单独冲洗,防止交叉反应造成污染。
2、温柔冲洗,防止切片的脱落,推荐用浸洗方式。
3、冲洗的时间要足够,才能彻底洗去 结合的物质。
5、 PBS的PH和离子强度的使用:
1、建议PH在7.4-7.6浓度是0.01 M。
2、中性及弱硷性条件(PH7-8)有利 于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利 于分解。
6、 拍照:
1、有条件的话应该立即拍照,若不能及时拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和湿度。

‘伍’ 免疫组化染色结果怎么看,谁帮忙看下谢谢

nhibin(-) CD99(-) CD56(

‘陆’ 免疫组化结果分析

不是淋巴瘤,但转移性低分化癌是明确的,但可能因为肿瘤分化程度低,无法判断是腺还是鳞 来源。上面后面的免疫组化是鉴别诊断用的,你不用去理解,病理科医师懂就行。
CK7是腺上皮标志,CK5/6是鳞状上皮标记。EMA是细胞膜蛋白标记,CK是广谱角蛋白标记,S100是神经分化及组织细胞的标记,这里用于标记组织细胞,CD3 T淋巴细胞的广谱标记,CD20B淋巴细胞的广谱标记,LCA人类白细胞共同抗原标记,CD68组织细胞共同标记,和S100用于排除组织细胞增生性疾病,Ki67为中等增殖指数。我的建议是再做个P63染色,如果阳性,则可以提示为鳞状上皮起源,如为阴性,则无临床意义。
治疗上》先判断原发肿瘤位置,如P63阳性,则可能来源于鼻咽部、扁桃体周围区域,肺 ,中下段食管,宫颈 。 如P63阴性,则无法判断,全身有各大器官都有可能。
如家庭条件还可以,建议做个petct检查,可以明确可能存在的病灶包括还有没有其他地方转移的位置。明白原发地后再次取活检证实,然后能区分病理亚型的最好区分,根据病理亚型采用针对的化疗、放疗或单克隆抗体治疗等

‘柒’ 怎么看免疫组化结果检查单

1、CK-P(-)—不是癌。

2、LCA(-)、CD3(肿瘤细胞一)、CD2(肿瘤细胞一)—不是淋巴瘤(恶性肿瘤)。

3、Syn(-)、CgA(-)、CD56(-)—不是神经内分泌来源的肿瘤。

4、Ki67(+)>80%—增殖指数很高,提示是恶性肿瘤。

‘捌’ 如何看懂免疫组化结果

看懂免疫组化结果方法如下:

对照染色——定位——半定位——图像分析仪

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