一个化学式如何标记荧光

‘壹’ 单链DNA上怎么标记上荧光染料分子

1.DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀 这是最简单的方法. 2.利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA.吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记.观察死亡细胞荧光...

‘贰’ 生物荧光标记法是什么

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简便等优点，使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。

荧光标记物质在蛋白的功能研究、药物筛选等领域也有着广泛的应用。人们利用利用荧光标记的多肽来检测目标蛋白的活性，并将其发展的高通量活性筛选方法应用于疾病治疗靶点蛋白的药物筛选和药物开发（例如，各种激酶、磷酸酶、肽酶等）。因此，多肽的荧光修饰，同样是多肽合成领域的重要内容。

下面是一些常用的多肽修饰荧光物质：

‘叁’ 如何用FITC荧光素标记细菌（细菌，荧光素标记

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在，根据已 知的抗体（或抗原）即可推知另一个未知抗原（或抗体）的存在。直接免疫荧光法直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合，以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点，但也 存在缺点如不能检查抗体，敏感性较差。（1）在标本上滴加荧光素标记抗体，放入湿盒中。37℃温育30min。 （2）PBS 冲洗后，再用PBS分三缸浸泡，每缸3min。（3）PBS浸泡1～2min，风干。（4）缓冲甘油封片。在荧光显微镜下观察。进行直接免疫荧光法时应注意：①温育时一定要将玻片放在湿盒中，以防液体蒸发。②用PBS浸泡时应不断振荡。 2. 间接免疫荧光法间接免疫荧光法以荧光素标记抗球蛋白抗体，抗体与相应抗原结合后，荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用，从而推知抗原或抗体的 存在。间接荧光技术可以用已知的抗原检测未知的抗体，也可用已知的抗体测出未知抗原。现以检测流行性热病毒抗体（IgM）为例介绍如下：（1）将待测病人血清加至抗原片（流行性热病毒感染的Vero-E6细胞片）上，每个稀释 度加2孔，最后2孔加PBS做对照。将玻片放置湿盒中，37℃温育 60min。取出玻片，弃去反应液，用PBS洗涤5min，风干。（2）加入1∶40稀释的FITC标记的羊抗人IgM，37℃温育60min。取出玻片，按步骤2洗涤，风干。（3）PBS甘油封片，荧光显微镜下观察。阳性结果：在细胞膜及细胞质中可见颗粒状荧光颗粒，细胞核 呈红色。注意事项：温育时将玻片放在湿盒中，以防液体蒸发。选择低温、干燥、洁净的环境风干。

‘肆’ 荧光标记法是什么

荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。

例如：Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

相关信息：

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。

荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简便等优点，使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。

‘伍’ 荧光标记用的是什么东西标记的它与被标记物如何结合在一起适用于哪些反应

同位素标记法，就是用某个放射性元素代替它的同位素，比如说用氧18代替原来的氧元素，放射性元素可以通过一定的一起检测到，在紫外线等的照射下显出荧光，可以用于光合作用和呼吸作用的产物研究，或者标记等位基因

‘陆’ 如何测定一种有机化合物是否具有荧光性质

如果化合物有紫外吸收，应该有荧光性质。
常温物质经紫外线或X射线照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光即荧光。。
荧光光谱有两个主要优点:第一是灵敏度高.由于荧光辐射的波长比激发光波长长,因此测量到的荧光频率与入射光的频率不同.另外,由于荧光光谱是发射光谱,可以在与入射光成直角的方向上检测,这样,荧光不受来自激发光的本底的干扰,灵敏度大大高于紫外-可见吸收光谱,测量用的样品量很少,且测量方法简便.第二,荧光光谱能提供较多的信息,例如激发谱,发射谱,峰位,峰强度,荧光寿命。

‘柒’ 什么是荧光标记法

荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

目前用于神经元标定的荧光物质有十多种。可以根据实验的要求进行单荧光物、双标定和三标定。后者可以用来做神经元轴突侧枝投射的追踪。

(7)一个化学式如何标记荧光扩展阅读

1. SYBR green I染料

反应体系中，加入过量SYBR

荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的扩增完全同步。

其优点是对模板没有选择性，使用方便，非常方便，但也易与非特异性双链DNA结合，产生假阳性，可以通过溶解曲线的分析，优化反应条件。

2. Taqman 探针

目前在Real-time

Q-PCR中最广泛使用的Tagman系统就是运用了这个原理。它能被DNA合成酶（例如Taq酶）的5'-3'活性所降解，探针的5'端有一荧光报告基团，3'端有一荧光淬灭基团。

当两个基团相互先靠近的时候，由于发生能量传递作用，报告基团不能发出荧光，但随着扩增反应的进行，5'端得报告基团随着探针的水解而脱落下来，不再与淬灭发生能量传递作用，从而能发出荧光，被信号探测器所捕获。

3. Scorpions

它由两个寡核苷酸分子组成，一个是引物，另一个是带荧光分子的探针，但是此探针也具有引物的功能。引物与形成发夹结构的探针相连，在探针上由于荧光报告基团与淬灭基团相互靠近，不发荧光。

变性阶段，探针的发夹结构会解开，在退火时则与模板相结合，形成线性分子，报告基团同淬灭基团分离而发射荧光。在探针的设计上，要求绝对保守，长度为25-32bp，Tm在68-70度之间，探针的5'端不能为G，避免多个碱基同时出现，尤其要避免4个G同时出现，另外，探针应靠近上游引物。

4. 分子信标

分子信标是（Molecular

beacon）是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。

荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭，由荧光基团产生的能量以红外光而不是可见光形式释放出来。在复性温度下，因为模板不存在时形成茎环结构。

当加热变性会互补配对的茎环双链解开，如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后，分子信标将成链状而非发夹装，使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，淬灭作用被解除，发出激光分子。

‘捌’ 求教如何给细菌标记荧光

1、买一个GFP原核表达质粒，如pEGFP。当然，找别人要也可以（自己要不出来就让导师去要），这个东西很多的~自己搜索一下找个方便的即可。
2、GFP质粒转化大肠杆菌，看一下是否发光，同时保种和保存质粒。
将GFP质粒转化到你的目的菌株中，观察GFP是否正常表达，如果可以正常表达，标记成功~
只要你的目标菌株可以正常进行遗传转化操作，整个实验周期不会超过一周，当然，如果目标菌株有问题，那就难了~~
建议找一个有分子生物学操作经验的实验室，去那里做一下吧，自己摸索会很吃力的。不行就甩给公司做。

‘玖’ 荧光怎么样才能够被标记上

1、 荧光标记是将荧光基团共价连接到蛋白、核酸等分子上的过程.通常使用能够选择性地与目标分子上存在的功能基团反应的荧光素基团衍生物来完成这样的过程.
最常见的标记过的分子是抗体,经常使用标记过的抗体来检测特定的目标分子.可在多种检测系统中使用荧光标记来实现灵敏和定量的检测.
荧光标记用的荧光染料会和特定的蛋白或者核酸连接,使其具有荧光反应.因此只要这种物质存在,就会被标记.所以基因复制生成的另一个基因也会被标记.
2、同位素示踪所利用的放射性核素（或稳定性核素）及它们的化合物,与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的,只是具有不同的核物理性质.因此,就可以用同位素作为一种标记,制成含有同位素的标记化合物（如标记食物,药物和代谢物质等）代替相应的非标记化合物.利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质,就可以用核探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等.
使用同位素标记的核苷酸合成的DNA都具有放射性,然后给具有放射性的DNA只提供正常的没有放射性的核苷酸,则新合成的DNA序列均不带有放射性.