A. 微生物实验室需要哪些常用的仪器
微生物实验室主要用于无菌环境下微生物提纯、分离、增殖及鉴定等工作,对无菌环境的要求很高。那么微生物实验室中则需要用到以下仪器设备。
一、无菌室
无菌室是实验室的核心部分,主要为样品提供保护,保证实验结果的准确和人员的安全。
二、超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。
三、高压蒸汽灭菌锅
高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的、可以耐受一定压力的双层金属锅。一般在进行无菌操作前需要将操作器皿、培养基等在高压灭菌锅里进行灭绝后才能使用。
四、培养箱
培养箱主要用于实验室微生物的培养,为微生物的生长提供一个适宜的环境。培养箱有以下几种:
1、普通培养箱
2、生化培养箱
3、恒温恒湿箱
4、厌氧培养箱
五、天平
天平是用于精确称量各类试剂及药品的设备。实验室常用的是电子天平。
六、微波炉/电炉
其主要作用是用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化等。
七、摇床
摇床又称摇瓶机,它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为种子扩大培养之用。
八、冰箱
冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。
九、显微镜
微生物个体微小,必须借助显微镜才能观察清楚它们的个体形态和细胞结构。因此,在微生物学的各项研究中,显微镜就成为不可缺少的工具。
十、生物安全柜
微生物实验中所涉及到的部分试剂和样品微生物有些是有毒的,对于操作人员来说伤害比较大。为了防止有害德悬
十一、菌落计数器
菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式来准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可直接连接电脑来完成自动计数的操作,方便快捷的计数。
十二、分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度,可以正确选取合适的培养时间。
十三、离心机
离心机是用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。有冷冻离心机和常温离心机之分。
十四、液氮罐
液氮罐里装有液氮,可用于微生物实验室中各菌种的长期保存。
B. 微生物实验室常用试剂有那些往XDJM指点一二
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 酵母粉 配置LB培养基用
薯仔 葡萄糖 配置薯仔培养基用
琼脂 琼脂糖 配置固体培养基
硫酸 盐酸 乙醇 乙酸(75% 95% 无水乙醇)氢氧化钠 调节PH 配置缓冲液用
氯化钙 磷酸一氢钾 磷酸二氢钾
品红 美兰 草酸铵结晶紫 碘液 硫酸铜 等 染色用
各种实验室通用以上这些
常做分子实验的还要准备各种限制性内切酶 如Hind III EoR I Kpn I 以及相应的缓冲液 buffer K buffer M 等
建微生物实验室还要根据你的需要准备可中相应的菌株。
欢迎补充提问
C. 微生物实验室常用试剂有那些往XDJM指点一二
微生物学实验室常用试剂与培养基
第一节 常用试剂及其使用方法
一、诊断用纸片
⑴ 杆菌肽纸片(0.04U/片):抑菌圈>10mm为敏感。质控菌株: D群链球菌阴性, A群链球菌阳性。
⑵ SMZ纸片(1.25μg/片、23.75μg/片):出现抑菌圈即为敏感。质控菌株:D群链球菌阳性, A群链球菌阴性。
⑶ 新生霉素纸片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm为敏感。质控菌株:表皮葡萄球菌阳性,腐生葡萄球菌阴性。
⑷ O129纸片、奥普托欣(Optochin)纸片:参见第五节《生化试验培养基》。
二、诊断用血清
1.沙门菌属诊断血清
⑴ A-F群O多价诊断血清。
⑵ 特异O群因子诊断血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10诊断血清。
⑶ 特异H因子诊断血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子诊断血清。
2.志贺菌属诊断血清
志贺菌属4种多价血清:痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志贺菌多价血清及分型血清(1~6型),宋内志贺菌诊断血清,鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。
3.致病性大肠埃希菌诊断血清
肠致病性大肠埃希菌(EPEC)诊断血清,产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)诊断血清,肠出血性大肠埃希菌(EHEC)诊断血清O157: H 7。
4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清
5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清
6.链球菌分类诊断血清
7.肺炎链球菌诊断血清
8.耶尔森菌诊断血清
三、常用染色液
1.革兰染色液
⑴ 结晶紫溶液 A液:结晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸铵 0.8g, 蒸馏水80 ml。
染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。
⑵ 碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。
将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。最后补足水量。也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。
⑶ 脱色液:95%乙醇
⑷ 复染液:沙黄2.5g,95%乙醇100ml为贮存液,取贮存液10ml,加蒸馏水90ml为应用液。
2.抗酸染色液
⑴ 碱性复红染色液: ①萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脱色液:浓盐酸3ml,95%乙醇97ml。③复染液(吕弗勒美蓝液):美蓝乙醇饱和溶液30ml,100g/L氢氧化钾溶液0.1ml,蒸馏水100ml。
⑵ 金胺O-罗丹明B染色液: ①罗丹明B液:罗丹明B 0.1g加蒸馏水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸馏水95ml,再加入纯石炭酸 5ml,混匀。③3%盐酸乙醇。④稀释美蓝液:吕弗勒美蓝液100ml,加蒸馏水90ml,混匀。
3.鞭毛染色液(改良Ryu法)
A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,饱和硫酸铝钾溶液 10ml; B液:结晶紫乙醇饱和液。应用液A液10份,B液1份,混合,室温存放备用。
4.异染颗粒染色液
甲液:甲苯胺蓝 0.15g,孔雀绿 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸馏水100ml。乙液:碘 2g,碘化钾3g,蒸馏水300ml。
先将碘化钾加入少许蒸馏水(约2ml),充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后, 加蒸馏水至300ml。
5.荚膜染色液
⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液
⑵ 5g/L苯胺蓝水溶液。
第二节 基础培养基
一、液体基础培养基
1.蛋白胨水
[用途]
用于细菌靛基质试验;一般细菌培养和传代。
[配法]
蛋白胨(或胰蛋白胨)10g,氯化钠 5g,蒸馏水1L。
将上述成分溶于水中,校正pH 至7.2,分装试管,每管2~3ml,置121℃灭菌15min备用。
[质量控制]
大肠埃希菌生长良好,靛基质阳性;伤寒沙门菌生长良好,靛基质阴性。
2.营养肉汤
[用途]
一般细菌的增菌培养,加入1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。
[配法]
蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1L。
将上述成分称量混合溶解于水中,校正pH至7.4,按用途不同分装于烧瓶或试管内。经121℃灭菌15min,作无菌试验后冷藏备用。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌生长良好。
[保存]
置冰箱3周内用完。
3.牛肉浸液培养基
[用途]
细菌培养最基础的培养基,除用于一般细菌的培养外,又可以作营养琼脂及其它培养基的基础。
[配法]
新鲜除脂牛肉 500g,氯化钠5g
蛋白胨10g,蒸馏水1L。
先将牛肉清洗,除脂肪、肌腱,并切块绞碎。称取500g置容器加入蒸馏水1L,搅匀后置冰箱过夜,次日煮沸加热30min,并用玻棒不时搅拌用绒布或麻布进行粗过滤,再用脱脂棉过滤即成。在过滤中加入蛋白胨10g、氯化钠5g溶解后,用氢氧化钠溶液校正pH至7.6~7.8,并加热煮沸10min,补充蒸馏水至1L,最后用滤纸过滤,呈清晰透明、淡黄色液体,经121℃15min灭菌备用。
[用法]
根据用途不同可以制成营养肉汤,以此为基础制成其它培养基。如制作固体培养基,加入琼脂15 ~20g/L即可。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌等均生长良好。
[保存]
置4℃冰箱内可以使用较长时间。
注:商品牛肉浸膏粉,一般使用量为3~5g/L。
二、固体基础培养基
1.营养琼脂
[用途]
一般细菌和菌株的纯化及传种。 [配法]
蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂粉(优质)12g,蒸馏水1L。
将上述成分(除琼脂外)溶于水中,校正pH 7.2~7.4后加入琼脂,煮沸溶解,根据用途不同进行分装,经121℃灭菌15min,倾注平板或制成斜面,冷藏备用。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌菌落呈浅黄色; 痢疾志贺菌菌落无色;铜绿假单胞菌 菌落无色或浅绿色。
[保存]
置4℃冰箱保存,2周内用完。
2.血琼脂培养基
[用途]
一般病原菌的分离培养和溶血性鉴别及保存菌种。
[配法]
pH 7.4~7.6牛肉浸液琼脂 100ml,脱纤维羊血(或兔血) 5~10ml。
将血琼脂基础经121℃灭菌15min,待冷却至50℃左右以无菌手续加入羊血,摇匀后立即倾注灭菌平皿内,待凝固后,经无菌实验冷藏备用。
[质量控制]
化脓性链球菌ATCC 19615生长良好,β-溶血;肺炎链球菌ATCC 6303生长良好,α-溶血;表皮葡萄球菌ATCC 12228 生长良好,不溶血。
[保存]
置4℃冰箱,1周内用完。
3.巧克力琼脂培养基
[用途]
主要用于嗜血杆菌的分离培养,亦可用于奈瑟菌的增殖培养。
[配法]
鲜牛肉浸出液1L, 蛋白胨10g,
氯化钠5g,琼脂粉12g,无菌脱纤维
羊血或兔血100ml。
将上述成分(除兔血外)加热溶解,调pH至7.2,置121℃15min高压灭菌,待冷至约85℃,以无菌方式加入兔血,摇匀后置85℃水浴中,维持该温度10min,使之成巧克力色。取出置室温冷至约50℃,倾注平板或制成斜面备用。
[质量控制]
流感嗜血杆菌ATCC 10211、肺炎链球菌ATCC 6305生长良好,菌落典型。
[保存]
置4℃冰箱,1周内用完。
4.胱氨酸胰化酪蛋白琼脂
[用途]
常用于测定脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌以及营养要求较高细菌的糖发酵试验。
[配法]
胱氨酸0.5g, 胰化酪蛋白20g,氯化钠5g,亚硫酸钠0.3g,琼脂3.5g,酚红0.0175g,蒸馏水1L。
将上述成分(酚红除外)混合溶解,调pH至7.2,加入酚红指示剂。分装试管,115℃灭菌15min。
[用法]
用于测定糖发酵时,按需要加入各种糖溶液,将待检标本直接种于培养基管内,置35℃孵箱,18~24h观察结果。培养基由红色变为黄色为阳性,不变色为阴性。
第三节 保存和增菌培养基
一、菌种保存培养基
[配法]
蛋白胨10g,牛肉膏5g,氯化钠3g,磷酸氢二钠2g,琼脂粉4.5g,蒸馏水1L 。
将上述成分混合于水中,加热溶解,调pH至7.4~7.6,分装试管2/3左右高度,121℃高压灭菌15min,成为半固体培养基,备用。
[质量控制]
培养基呈淡黄色半固体状。大肠埃希菌(ATCC 25922)生长良好,动力阳性;福氏志贺菌(ATCC 12022)生长良好,动力阴性;金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)生长良好,动力阴性。
二、增菌培养基
1.葡萄糖肉汤
[用途]
用于血液增菌。
[配法]
蛋白胨(或月示 胨)10g,氯化钠5g,肉浸液(或心浸液)1L,葡萄糖3g,枸橼酸钠3g,5g/L对氨基苯甲酸水溶液10ml,1mol/L硫酸镁溶液20ml,青霉素酶1000 U。
将蛋白胨、氯化钠混合于肉浸液中加热溶解,再加入葡萄糖、枸橼酸钠、对氨苯甲酸及硫酸镁,继续煮沸5min,并补足失水,调整pH至7.8。
过滤分装,每瓶50ml,高压灭菌115℃20min后,每瓶加入青霉素酶50 U,经无菌试验合格后,冷却备用。
[用法]
将采取的血液标本,以无菌手续注入培养瓶中(血液1ml,培养液10ml),置35℃培养箱内,每天1次取出观察结果。如有细菌生长,可出现数种不同的表现,应随时作分离培养,可选用血琼脂、伊红美蓝琼脂及巧克力琼脂平板等。无细菌生长表现的培养瓶,需连续观察7d,仍无细菌生长方可弃去。在观察的过程中,至少应作两次分离培养。
注:
⑴ 枸橼酸钠为抗凝剂,可使血液加入培养基中不凝固。
⑵ 对氨基苯甲酸主要中和血液中磺胺类药物的抑菌作用。
⑶ 硫酸镁主要抑制血液中存在的四环素、金霉素、新霉素、多粘菌素及链霉素的抑菌作用。
⑷ 本培养基近年来有许多改良配方,如加入0.3%~0.5%酵母浸膏以增加营养;加0.2%核酸刺激细菌生长;加0.1%粘液素能被覆于细菌的表面,保护细菌免受抗体破坏;加入聚茴香脑磺酸钠(SPS)能中和补体的抗药作用从而提高检出率。
2.血液增菌培养基
[用途]
血液和骨髓液病原菌的增菌培养。
[配法]
蛋白胨10g,氯化钠5g,牛肉膏3g,葡萄糖1g,酵母膏粉3g,枸橼酸钠3g,磷酸氢二钾2g,5g/L对氨基苯甲酸溶液5ml,1mol/L硫酸镁溶液20ml, 4g/L酚红溶液6ml,青霉素酶50 U,聚茴香脑磺酸钠(SPS) 0.3g,蒸馏水1L。
将上述成分(除酚红指示剂、青霉素酶外)混合加热溶解,校正pH至7.4,再加酚红,过滤分装每瓶30~50ml,经121℃灭菌15min和35℃24h无菌试验备用。临用时每瓶加入1.5~2.5 U青霉素酶。
[质量控制]
伤寒沙门菌ATCC 50096、白色念珠菌ATCC 10231、化脓性链球菌ATCC 19615、肺炎链球菌ATCC 6305、金黄色葡萄菌ATCC 25923、铜绿假单胞菌ATCC 27853均生长良好。
3.亚硒酸盐增菌培养基
[用途]
沙门菌增菌培养。
[配法]
蛋白胨5g,乳糖4g,磷酸氢二钠4.5g,磷酸二氢钠5.5g,亚硒酸氢钠4g,蒸馏水1L。
先将亚硒酸盐加到200ml蒸馏水中,充分摇匀溶解。其它成分称量混合,加入蒸馏水800ml,加热溶解,待冷却后两液混合,充分摇匀,校正pH 7.0~7.1(通过调整磷酸盐缓冲对的比例来校正pH值)。最后分装于15×150mm的试管内,每管10ml。置水浴隔水煮沸10~15min,立即冷却,置4℃冰箱保存备用。
[用法]
取新鲜标本1g或棉拭子采样直接种于该培养管内。摇动后置35℃培养过夜。如发现均匀混浊,管底有红色沉淀物,表示细菌生长。然后取培养物分离在选择性培养基上,如SS琼脂、麦康凯琼脂平板等,进行培养。
[质量控制]
培养基应呈淡黄色或无色,透明无沉淀物。增菌灵敏度:伤寒沙门菌1×10-5,鼠伤寒及副伤寒沙门菌1×10-7。
[保存]
4℃保存,1周内用完。
注:
⑴ 亚硒酸盐,包括亚硒酸钠、亚硒酸氢钠均可使用,但以亚硒酸氢钠效果为好。
⑵ 磷酸盐缓冲对中,两者的用量比例与亚硒酸盐及蛋白胨的品种有关。制备前应进行调试,其总量为10g/L。
⑶ 在制备过程中,亚硒酸盐不能直接加热。隔水煮沸时间亦不能超过规定时间,否则亚硒酸盐会变质,生成红色沉淀物。
⑷ 培养基应呈淡黄色,有红色沉淀物出现时不可再用。
4.SS增菌液
[用途]
用于沙门、志贺菌的增菌。
[配法]
月示 胨 2g,蛋白胨8g,牛肉膏3.5g,酵母膏2g,葡萄糖2g,枸橼酸铁10g,硫代硫酸钠10g,亚硫酸钠0.7g,胆盐5.5g,磷酸氢二钠4g,磷酸二氢钾0.1g,去氧胆酸钠(进口) 1.5g,煌绿0.005g,蒸馏水1L。
将上述成分加热溶于水中,调pH至7.1,分装试管(15×150mm),每管5~7ml,隔水煮沸5min备用。
[用法]
取粪便标本1g直接种于增菌液内,35℃16~18h培养,取出转种于分离培养基即可。
[质量控制]
培养基应呈淡黄色或略呈淡绿色。伤寒沙门菌ATCC 50096、福氏志贺菌ATCC 12022 生长良好;大肠埃希菌ATCC 25922 生长抑制。
注:
⑴ 切勿高压,隔水煮沸时间不超过5min。
⑵ 煌绿用量应根据不同产品批号酌情增减。
5.碱性蛋白胨水
[用途]
霍乱弧菌增菌培养。
[配法]
蛋白胨 20g,氯化钠5g,蒸馏水100ml。
将上述成分溶解于水中,校正pH 至8.6,分装于试管8~10ml,经121℃灭菌15min备用。
[用法]
将待检标本接种到碱性胨水中,置35℃培养6~8h,霍乱弧菌呈均匀混浊生长,表面有菌膜出现。取表面菌液一白金环移种到碱性琼脂、庆大琼脂或TCBS琼脂平板上。必要时做第二次增菌。
[质量控制]
有条件的实验室可用标准菌株,一般临床实验室可用非01群弧菌,培养后生长良好者方可使用。霍乱弧菌E1-Tor生物型和副溶血弧菌生长良好(6h);大肠埃希菌ATCC 25922不生长(6h)。
[保存]
置4℃冰箱,2周内用完。
注:若在每升碱性胨水中加入1%亚碲酸钾溶液0.5~1.0 ml,则成为亚碲酸钾碱性胨水,其增菌效果更为理想。
第四节 分离培养基
一、革兰阳性杆菌分离培养基
1.罗-琴改良培养基
[用途]
用于结核分枝杆菌培养。
[配法]
磷酸二氢钾2.4g,硫酸镁0.24g,枸橼酸镁(或枸橼酸钠) 0.6g,天门冬素3.6g,甘油12ml,蒸馏水600ml,马铃薯淀粉30g,新鲜鸡卵液1L,2%孔雀绿水溶液20ml。
先将磷酸盐、硫酸镁、枸橼酸镁、天门冬素及甘油,加热溶解于600ml蒸馏水中。再添放马铃薯粉,边放边搅,并继续置沸水中加热30min,待冷却至60℃左右时,加入鸡卵液1L及孔雀绿溶液20ml,充分混匀后,用无菌操作分装于灭菌试管,每支5~6ml,塞紧橡皮塞(最好是翻口塞),置于血清凝固器内制成斜面,经85℃1h间歇灭菌2次(或高压灭菌115℃20min),待凝固后经无菌试验,4℃冷藏备用。
[用法]
取晨咳痰或其它体液标本,经消化处理和离心沉淀的浓缩液0.1ml(约2滴)滴种于培养基的斜面上,尽量摇晃,置35℃5%~10%二氧化碳温箱内培养1~4周,观察结果。凡在1周内发现生长的菌落,一般不可能是结核分枝杆菌;在2周后生长的菌落,奶油状,略呈黄色,粗糙突起,不透明,即取菌进行涂片染色镜检及鉴定。
[质量控制]
用结核分枝杆菌菌株作阳性培养试验。
[保存]
置4℃冰箱内2~4周有效。
注:
⑴ 本培养基由Lowenstein-Jenden设计的基础上改良。
(2)本培养基pH约为6.0左右,一般无须校正。
(3)间歇灭菌的温度不宜超过90℃。
2.血清斜面培养基(吕氏血清斜面)
[用途]
用于白喉棒状杆菌培养。
[配法]
1%葡萄糖肉汤(pH 7.6)100ml,无菌动物血清(牛、羊、猪、兔) 300ml。
将上述成分混合后,分装于试管内,每管约4~5ml。斜插在血清凝固器内(或蒸笼)加热80~85℃30min,使血清凝固成斜面,冷却后放4℃冰箱内。取出后采用间歇灭菌法,85℃灭菌30min,连续3天,经无菌试验证明无杂菌生长即可应用。
微生物学实验室常用试剂与培养基 第一节 常用试剂及其使用方法 分类:默认栏目2006.2.21 20:54 作者:hbmzhsh | 评论:2 | 阅读:1037
微生物学实验室常用试剂与培养基
第一节 常用试剂及其使用方法
一、诊断用纸片
⑴ 杆菌肽纸片(0.04U/片):抑菌圈>10mm为敏感。质控菌株: D群链球菌阴性, A群链球菌阳性。
⑵ SMZ纸片(1.25μg/片、23.75μg/片):出现抑菌圈即为敏感。质控菌株:D群链球菌阳性, A群链球菌阴性。
⑶ 新生霉素纸片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm为敏感。质控菌株:表皮葡萄球菌阳性,腐生葡萄球菌阴性。
⑷ O129纸片、奥普托欣(Optochin)纸片:参见第五节《生化试验培养基》。
二、诊断用血清
1.沙门菌属诊断血清
⑴ A-F群O多价诊断血清。
⑵ 特异O群因子诊断血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10诊断血清。
⑶ 特异H因子诊断血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子诊断血清。
2.志贺菌属诊断血清
志贺菌属4种多价血清:痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志贺菌多价血清及分型血清(1~6型),宋内志贺菌诊断血清,鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。
3.致病性大肠埃希菌诊断血清
肠致病性大肠埃希菌(EPEC)诊断血清,产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)诊断血清,肠出血性大肠埃希菌(EHEC)诊断血清O157: H 7。
4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清
5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清
6.链球菌分类诊断血清
7.肺炎链球菌诊断血清
8.耶尔森菌诊断血清
三、常用染色液
1.革兰染色液
⑴ 结晶紫溶液 A液:结晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸铵 0.8g, 蒸馏水80 ml。
染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。
⑵ 碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。
将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。最后补足水量。也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。
⑶ 脱色液:95%乙醇
⑷ 复染液:沙黄2.5g,95%乙醇100ml为贮存液,取贮存液10ml,加蒸馏水90ml为应用液。
2.抗酸染色液
⑴ 碱性复红染色液: ①萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脱色液:浓盐酸3ml,95%乙醇97ml。③复染液(吕弗勒美蓝液):美蓝乙醇饱和溶液30ml,100g/L氢氧化钾溶液0.1ml,蒸馏水100ml。
⑵ 金胺O-罗丹明B染色液: ①罗丹明B液:罗丹明B 0.1g加蒸馏水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸馏水95ml,再加入纯石炭酸 5ml,混匀。③3%盐酸乙醇。④稀释美蓝液:吕弗勒美蓝液100ml,加蒸馏水90ml,混匀。
3.鞭毛染色液(改良Ryu法)
A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,饱和硫酸铝钾溶液 10ml; B液:结晶紫乙醇饱和液。应用液A液10份,B液1份,混合,室温存放备用。
4.异染颗粒染色液
甲液:甲苯胺蓝 0.15g,孔雀绿 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸馏水100ml。乙液:碘 2g,碘化钾3g,蒸馏水300ml。
先将碘化钾加入少许蒸馏水(约2ml),充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后, 加蒸馏水至300ml。
5.荚膜染色液
⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液
⑵ 5g/L苯胺蓝水溶液。
D. 通常微生物实验室需要什么试剂 急用 平常用的
一般有微生物培养基,菌种,感受态细胞,抗生素等。看具体实验方案确定。
厚百holdbio提供生物试剂、耗材等全面实验室用品及实验技术服务,科研整体服务(课
题设计-实验-SCI)。
E. 微生物检验需要的实验室耗材都是有哪些谢谢!
各种型号的离心瓶和离心管
各种型号一次性枪头
各种型号的玻璃培养皿、量筒、烧杯、三角瓶、试管、试剂瓶
滤纸、吸水纸(白色无味卷纸),玻璃棒,涂布棒,灯用酒精,接种针接种环、常用培养基配方所需化学试剂,或常用商业化培养基成品。
医用纱布,脱脂棉,牛皮纸(灭菌用的)、橡皮筋。
擦镜纸,载玻片盖玻片,香柏油 乙醚酒精。
耗材类大致就这么多了。
F. 通常微生物实验室需要用到哪些耗材
各种培养基、试管、平皿、移液管等
G. 做微生物实验需要哪些设备和化学试剂
常规微生物实验室配置:1,培养箱:3台(细菌、霉菌、致病菌)
2,电子秤:1台
3,均质器:1台
4,菌落计数器:1台
5,微波炉:1台
6,高压灭菌锅:2台
7,加样器:2个
8,冰箱:2台
9,酒精灯:10个
10,试管架:20~30个
11,500ml三角瓶:50~100个
12,量筒:(250ml 2个,500ml 2个,1000ml 2个)
13,玻璃试管:500~1000支
14,灭菌吸管:1ml,10ml各根据日用量而定
15,凉干架:2个
16,剪刀,镊子:各40~60个
17,脱脂棉,纱布
18,试管筐:10~20个
19,无菌采样及称样袋:根据日用量而定
H. 化学实验必备药品有哪些
以下是高中阶段用到的所有化学药品,由本人精心总结,非复制粘贴:
铝片、铝箔、锌粒、还原铁粉、锌片、碘、活性炭 (颗粒状)、二氧化锰、三氧化二铁、氧化铜、二氧化硅、氯化钾、氯化钠、氯化钠、氯化钙(无水)、氯化铜 、氯化铵、溴化钠、碘化钾 碘化钠 、无水亚硫酸钠、硫酸钠(无水)、硫酸镁(结晶)、硫酸铝 、硫酸亚铁 、硫酸铜、硫酸铵、硫酸铝钾(明矾)、硫酸亚铁铵 、碳酸钾(无水)、碳酸钠(无水) 、碳酸氢钠、大理石、碳酸钙 、碳酸氢铵、碱式碳酸铜、硅酸钠(水玻璃 )、硫代硫酸钠(海波)、硫氰化铵、亚铁氰化钾、无水乙酸钠 、硬脂酸、变色硅胶、葡萄糖 、蔗糖、石蕊、酚酞、甲基橙、品红(碱性) 、二苯胺、pH广范围试纸 、蓝石蕊试纸、红石蕊试纸、淀粉碘化钾试纸、醋酸铅试纸、定性滤纸、二硫化碳、乙醛、丙酮、乙醚、苯、乙酸乙酯 、甲苯、无水乙醇、工业酒精、1,2--二氯乙烷 、红(赤)磷 、硫粉、镁条、铝粉、黄(白)磷 、碳化钙(电石) 、过氧化钠 、氯酸钾 、高锰酸钾 、硝酸铵 、硝酸钾 、重铬酸钾 、硝酸银 、四氯化碳 、硝酸 、硫酸 、过氧化氢 、溴 、三氯化铝 、盐酸 、磷酸、甲酸 88% 、冰乙酸 、乙酸 36% 、氢氧化钾、氢氧化钠、氨水、氧化钙(生石灰)、硫化钠、氢氧化钙(熟石灰)、碱石灰、苯酚 甲醛氯化钡 磷酸钠、石英砂、醋酸洋红