‘壹’ 生化需氧量的测定
容量法
方法提要
生化需氧量是指在有氧条件下，微生物分解水中有机有物的生物化学过程所需溶解氧的量。
取原水或经过稀释的水样，使其中含足够的溶解氧，将该样品同时分为两份。一份测定当日溶解氧的质量浓度，另一份放入20℃培养箱内培养5d后再测其溶解氧的质量浓度，两者之差即为5d生化需氧量(BOD5)。
仪器
恒温培养箱(20±1)℃。
细口玻璃瓶2000mL。
量筒1000mL。
玻璃搅拌棒玻璃棒底端套上一块比量筒口径略小于1mm厚的硬橡胶圆块，棒的长度以可伸至量筒底部为宜。
培养瓶250mL。
试剂
硫酸。
氯化钙溶液(27.5g/L)。
氯化铁溶液(0.25g/L)称取0.25gFeCl3·6H2O溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
硫酸镁溶液(22.5g/L)称取22.5gMgSO4·7H2O溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
磷酸盐缓冲溶液(pH7.2)称取8.5gKH2PO4、21.75g磷酸氢二钾和(K2HPO4)、33.4gNa2HPO4和1.7gNH4Cl，溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
稀释水在2000mL玻璃瓶内装入一定量的蒸馏水(含铜量小于0.01mg/L)，在20℃条件下用水泵或无油空气压缩机连续通入经活性炭过滤的空气8h，予以曝气，静置5～7d，使溶解氧稳定，其溶解氧质量浓度应为8～9mg/L。
临用时，每升稀释水中加入无机盐溶液(CaCl2、FeCl3·6H2O、MgSO4·7H2O和磷酸盐缓冲液)各1.0mL，混匀，稀释水的20℃5d生化需氧量应在0.2mg/L以下。
接种稀释水
接种液将生活污水在20℃条件下放置24～36h取上清液，备用。
接种稀释水于每升稀释水中加入接种液10～100mL。
葡萄糖-谷氨酸溶液称取于103℃烘烤1h的葡萄糖和谷氯酸各150mg于纯水中，稀释至1000mL，临用时配制。
氢氧化钠溶液c(NaOH)=1mol/L。
氟化钾溶液(40g/L)。
叠氮化钠溶液(2g/L)。
硫酸锰溶液(480g/L)称取480g硫酸锰(MnSO4·4H2O)或400gMnSO4·2H2O或380gMnCl2·2H2O溶于蒸馏水中，过滤后稀释至1000mL。
碱性碘化钾溶液称取500gNaOH溶于300～400mL蒸馏水中，称取150gKI(或NaI)溶于250mL蒸馏水中，将以上两液合并，加水至1000mL，静置，加0.05mol/LNa2S2O3标准溶液，用新煮沸放冷的蒸馏水准确稀释为0.02500mol/L。
淀粉溶液(5g/L)。
分析步骤
水样采集后应尽快分析，采样后2h以内开始分析则不需冷藏。如不能及时分析，采样后即保存在4℃或低于4℃的冷藏箱内，应在采样后6h内进行分析。
1)样品预处理。水样pH应为6.5～7.5，水受到废水污染时，可用0.5mol/LH2SO4或NaOH溶液予以调整。
含有少量余氯水样，放置1～2h后即可消失。余氯大于0.1mg/L，可加入Na2S2O3除去，其加入量可用碘量法测定。
受工业废水污染的水样，由于其中可能含有其他有害物质，如金属离子等，应根据具体情况予以处理。
当水样中含有0.1mg/L以上的亚硝酸盐时，可于每升稀释水中加入2mg亚甲蓝或3mL叠氮化钠溶液处理。
当水样中含有1mg/L以下的亚铁盐时，可于每升水中加入2mLKF溶液。
2)直接培养法。适用于较清洁的水样。用虹吸法吸出两份水样于溶解氧瓶中，一瓶立即测定溶解氧，另一瓶立即放入(20±1)℃恒温培养箱中，培养5d后取出，再测定溶解氧。两者之差即为水样的生化需氧量。
3)稀释培养法。确定水样稀释倍数:根据酸性KMnO4测得耗氧量(mg/L)，以1～3除之，其商即为水样的需稀释的倍数。
4)稀释方法。
A.连续稀释法，先从稀释倍数小的配起，继用第1个稀释倍数的剩余水，再注入适量稀释用水配制成第2个稀释倍数，以此类推。
B.稀释操作方法。
a.将水样小心混匀(注意勿产生气泡)，根据稀释培养法确定的稀释比例，取出所需体积的水样，沿筒壁移入量筒中，然后细心地用虹吸管将配好的稀释水或接种稀释水加至刻度，用特制的搅拌棒在水面以下缓缓上下搅动4～5次，立即将筒中稀释水样用虹吸法注入两个预先编号的培养瓶中，注入时使水沿瓶口缓缓流下，以防产生气泡。水样满后，塞紧瓶塞，并于瓶口凹处注满稀释水，此为第1个稀释度。
b.在上述分析步骤中，量筒内尚剩有水样，根据第2个稀释度需要用虹吸法向筒中注入稀释水或接种稀释水以下分析步骤重复上述操作，即为第2个稀释度，按同法可做第3个稀释度。
c.另取两个编号的溶解氧瓶，用虹吸法注入稀释水或接种稀释水，塞紧后用稀释水封口作为空白。
d.检查各瓶编号，从空白及每一个稀释水样瓶中各取1瓶放入(20±1)℃培养箱中培养5d，剩余各一瓶测定培养前溶解氧。
5)溶解氧固定。立即将分度吸管插入培养瓶液面以下，加1mLMnSO4溶液，再按同方法加入1mL碱性溶液。盖紧瓶塞(瓶内勿留气泡)，将水样颠倒混匀一次，静置数分钟，使沉淀重新下降至瓶中部。
6)释出碘。用分度吸管沿瓶口加入1mLH2SO4盖紧瓶塞，颠倒混匀，静置5min。
7)滴定。将上述溶液倒入250mL碘量瓶中，并用蒸馏水洗涤解氧瓶2～3次，用Na2S2O3标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1mL淀粉溶液，继续至蓝色刚好褪去为止，记录用量(V1)。
8)计算:
岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术
式中:ρ(O2)为水中溶解氧的质量浓度(以O2计)，mg/L;c为硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L;V1为硫代硫酸钠标准溶液用量，mL;8为1/2氧的摩尔质量的数值，单位用g/mL;V为水样体积，mL。
每天检查瓶口是否保持水封，经常添加封口水及控制培养箱温度;
培养5d后取出培养瓶，倒尽封口水，立即测定培养后的溶解氧，溶解氧测定方法同上。
9)标准溶液校核。将葡萄糖-谷氨酸标准溶液，以2%稀释比例，其BOD5结果应为(200±37)mg/L。如不在此范围内，说明实验有误，应找原因。
分析结果的计算
1)直接培养法。按下式计算5d生化需氧量(BOD5)的质量浓度:
岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术
2)稀释培养法。按下式计算5d生化需氧量(BOD5)的质量浓度:
岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术
式中:ρ(BOD5)为水样的5d生化需氧量的质量浓度，mg/L;ρ1为水样培养液在培养前的溶解氧的质量浓度，mg/L;ρ2为水样培养液在培养5d后的溶解氧的质量浓度，mg/L;ρ3为稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧的质量浓度，mg/L;ρ4为稀释水(或接种稀释水)在培养5d后溶解氧的质量浓度，mg/L;f1为稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占比例;f2为水样在稀释培养液中所占比例。f1、f2的计算为:
岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术
3)结果确定。测定2个或2个以上稀释度的溶解氧降低量应为40%～70%，即可取平均值计算。
水样稀释后溶解降低率:
岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术
式中:ρ5为水样稀释后溶解氧降低率，%;ρ1、ρ2同上。
‘贰’ 测工业污水的化学需氧量
你用的哪种方法！有水样的COD的估计值吗？一般100以上用Cr法，以下用Mn法，不致于测不出吧？
‘叁’ 求CM－02 COD快速测定仪 说明书
下面应该是你要的
http://www..com/s?ie=gb2312&bs=CM-02+COD%CA%B9%D3%C3&sr=&z=&cl=3&f=8&wd=CM-02+COD%D4%F5%C3%B4%CA%B9%D3%C3&ct=0
点第一个HTML查看，是你要的
‘肆’ 求CTL--12型化学需氧量检测仪的详细使用方法
仪器的使用
7.1 开机与时间设定
7.1.1连接电源线,检查各部无误后打开电源.
7. 1.2单片机对整机电子系统自检无误,显示“H”,
键盘输入使用者代号,（2位数字)
‘ENTER’,则打印如下:
CHENG DE HUATONG
CTL-12--------
仪器自动升温并显示实际温度；多功能窗显示时间。仪器正常开机。
约经30分钟加热部分即可稳定在控温状态。
7.1.3仪器正式使用前以及更换内部电池后请确认日期及时间。
在仪器加热过程中,您应作好如下准备工作:
“FUNC”,“0” (调正时间状态)
* 多功能窗显示4位数字,其中闪耀位为调整位
* 请置入正确时间,(24小时制,自低向高) 。
“ENTRE”
多功能窗显示4位数字，其中闪耀位为调整位
请置入正确日期。
“ENTRE”
显示1位数字,
0代表95年, 1代表96年，余此类推。
“ENTRE” 返回时间状态。
※正常时间显示状态为时间态,如您欲观察日期,请按“ENTER”,则显示月、日、同时浓度灯闪耀5秒钟后,自动返回时间态 。
7.1.4仪器消解装置自动升温约30分钟，即可稳定控制工作温度。<如果您在水样消解过后关闭加热系统,可以使用FUNC ‘ 9 ’功能.加热指示灯灭,表示停止加热>; 仪器备有断电直流保护功能,时钟无需经常调整,仪器显示在165℃±0.5℃范围时即可进行样品的加热消解。
7.2样品消解。
7.2.1试剂
7.2.1.1 ①浓硫酸(分析纯,比重1.84)。
7.2.1.2 ②邻苯二甲酸氢钾标液:准确称取经105℃—110℃烘干二小时的邻苯二甲酸氢钾(优级纯)0.5101g溶于水，置于500ml容量瓶中，以水定容至标线,摇匀备用，该标液的理论COD值为1200mg/l。
7.2.1.3 ③随机专用氧化剂。(直接使用)
7.2.1.4 ④随机催化使用剂。1号
自随机附带之专用催化剂中准确移取25ml于250ml容量瓶中，用浓硫酸定容至标线，摇匀备用。
7.2.1.5 ⑤掩蔽剂; 称取20.00g硫酸汞<分析纯>。加入约70ml纯水中, 再加入10ml浓硫酸<AR>.使其溶解.移入100ml容量瓶中,用纯水定容至标线.摇匀备用.
7.2.2标定标准曲线。
①取随机附件反应管6只作好标记，清洗干净，(首先用洗涤液清洗再用自来水冲净后，用稀硫酸浸泡5-12小时取出后用纯水清洗后烘干)。
分别加入标液7.2.1.2 ； 0， 0.1， 0.5， 1.0， 2.0， 3.0 ml。
其相应COD理论值为； 0， 40， 200， 400， 800，1200mg/L。
②用纯水将各反应管依次补足至3ml(反应管刻度使用前标定)。
③每支试管内加入掩蔽剂<7.2.1.5>1---3滴(每滴可掩蔽300mg/L左右. 如水样不含氯根也可不加)。
④每支试样反应管内加入专用氧化剂1.0ml。(7.2.1.3)
⑤垂直快速加入各反应管内催化剂使用液( 7.2.1.4 ) 5.0ml。如发现溶液上下液色不均，可盖塞摇匀，否则将引起加热过程飞溅。
⑥将反应管置入仪器加热炉前6只加热孔中，此时显示炉体温度会有所下降，为保证消解充分，请稍侯至温度由低至高回升到164.5以上时再按动消解键，消解指示灯亮。
⑦经10分钟恒温消解，仪器发出蜂鸣，指示水样已消解充分，请您将反应管依次自加热孔中取出，置于试管架上进行空气冷却1-2分钟后水冷至室温。
⑧每支反应管加入纯水3.0ml盖塞摇匀，操作完成后，冷至室温，准备进行光度测定。
7.2.3 标定高氯水样标准曲线:※
自然界的水样经常含有氯化物，在沿海以海水为冷却水的工业企业或某些化工企业，其水样中氯化物含量可达数千PPM或更高(标准海水约为19000mg/L氯离子)这类水样在强氧化剂作用下,Cl被氧化成氯气[kkkk1][kkkk2]而从管口排出，这种现象从加入试剂开始直至结束，始终存在。由于氯离子在测定时会干扰COD值，甚至无法测定，因此本仪器设计了密封式加热装量,使反应管内气压大约为2kg/cm 阻止氯气逸出,以达到测定COD值目的。
7.2.3.1 高氯试验用水: 称取氯化钠(分析纯)16.48g溶于水,定容为
1000ml, 此溶液Cl含量约为10000mg/L。
7.2.3.2 含高氯标准溶液: 称取邻苯二甲酸氢钾(经105-110℃烘干2小时)（优级纯）0.5101g，用上述高氯试验用水(7.2.3.1)定容为500ml,此溶液氯化物含量10000mg/L,COD理论值为1200mg/L。
7.2.3.3 氧化剂: 随机氧化剂,直接使用。
7.2.3.4 催化剂使用液2号:自随机催化剂中准确移取40ml于100ml容量瓶中,用浓硫酸(分析纯)定容至标线。
7.2.3.5 取专用密封玻璃反应管(平顶塞)6只,外观不得有缺陷,仔细作好标记号,按7.2.2.1方式冼净烘干。
7.2.3.6 每支管内准确移入(7.2.3.2)溶液分别为:
0 0.1 0.5 1.0 2.0 3.0ml。
7.2.3.7 依次用高氯试验用水(7.2.3.1)补足至3ml,则上述各管理论COD值为:
0 40 200 400 800 1200mg/l， 氯化物为10000mg/L。
7.2.3.8 每支管内分别移入催化剂使用液2号(7.2.3.4)5ml。
7.2.3.9 每支管内分别移入氧化剂1ml,加入氧化剂后,立即用玻璃塞盖紧, 并用聚四氟乙烯生料带缠绕3-5层。
(注意:应先加催化剂后加氧化剂,顺序与开管法相反)。
7.2.3.10 将反应管缓慢倒置1-2次,以使溶液均匀。
(注意:动作要缓慢,且应用食指压紧玻璃塞)。
7.2.3.11 将反应管依次插入金属套筒内,旋好上盖并插入仪器加热孔中。
7.2.3.12 等待仪器指示温度回升至165℃时,按消解键, 此时该键上方消
解指示灯亮,表示已进入计时消解状态。
7.2.3.13 当恒温自按消解键开始至10分钟后,仪器蜂鸣,提醒您样品消解完毕。
(如欲使样品消解更充分,可适当延长数分钟,再按消解键。
7.2.3.14 自仪器内取出金属套筒,放入水槽内冷却至室温。
7.2.3.15 旋下上盖,取出反应管,观察反应管液体，如为混浊且不易沉淀,则由于密封不严所致,应重测该浓度水样。
擦净外壁,打开生料带,取下玻璃塞,向每支反应管加入1+1硫酸4ml,稍候进行比色测定。
7.2.4实际水样的测定
7.2.4.1取均匀的待测水样3ml于反应管中 。
低氯离子水样(Cl<900mg/l)按7.2.2.3.—7.2.2.8。
高氯离子水样(Cl>900mg/l)按7.2.3.8.—7.2.3.15。
注1：此仪器的直接测定范围为20--1200mg/L
低于或高于此范围的水样直接测定则不能得到准确值。
注2：加入催化剂后,如发现水样变绿或兰说明该水样浓度已超过仪器检测限1200mg/L以上,应作适当稀释再行测定。
注3：在开管法中,如加入催化剂后混浊或消解后混浊,应作掩蔽处理,或采用密封式测定方法。
注4 ：配制催化剂使用液时, 应该确认您的硫酸质量!酸度不足会引起加热沸腾!
※※※※
在一般测量中,经常情况是水样中所含氯离子含量介于800……8000mg/L之间，此种情况利用普通开管测试方法或采用密封方法测定均不能得到准确的COD值。可用如下方法操作以得到满意的结果。
（a）在试管内加入水样3ml, 加入约10倍于水样中氯离子的固体硫酸汞（分析纯），通常为200mg左右。 再加入1～2滴硫酸，轻轻摇匀，使氯离子产生氯化汞可沉淀物。
（b）每只反应管内加入5ml催化剂使用液（7.2.1.4）,加入1ml氧化剂（7.2.1.3）,轻轻摇匀，加入顺序与普通开管方法相反。
（c）加入
7.3光度计的使用
CTL-12型仪器的光度计采用单色光,微处理电路,可以自动调零,调满标度,数字显示吸光度、浓度。使用中无须调整,即可进入测试状态。
7.3.1比色池的清洗：
7.3.1.1第一次使用应用稀硫酸浸泡24小时后用纯水反复冲洗三次以上。
7.3.1.2每次使用完毕应用（1＋1）稀硫酸浸泡,纯水清洗，玻塞单独放置。
7.3.1.3操作时应轻柔,以免硬性损坏。
7.3.2 吸光度(A)的测定(FUNE 1):
根据朗伯·比尔定律:
A=-LgT
操 作
多功能窗显示
作用与说明
FUNC 1
F A0
测定吸光度状态
加入空白水样
稍后准备调零
ENTER
n1
调零结束 提示加入1#水样
放空并且清洗后
加入1#水样 稍后ENTER
0.＃＃＃
显示吸光度
ENTER
n2 自动打印
打印出吸光度和序号
继续测定则重复上述操作
结束测定按‘ . ’
打印日期
结束
7.3.3 最小二乘法标定曲线 ：“FUNC”“2"
水体中的化学需氧量同消解后的吸光度存在一定直线关系
其表达式为：Y = B * X + a
该直线被称作标准曲线，（工作曲线或校准曲线），通常利用最小二乘法的原则建立，所谓最小二乘法就是要求一系列浓度的估计值与实际值的绝对误差的平方和达到最小。即选择适当的b和a值，使
n
∑（YI(b(Xi(a)＝最小值
i=1
确定曲线中的b和a值,及r值均由本仪器内部自动完成,其中b＝斜率,a＝截距,r＝相关系数,b取值在1～9999之间,a取值－999～999之间,r 取值0～1之间。在标定结束后由打印机自动打印出图形及数值 。最后 存储在仪器中，以备今后使用。
例:标定标准曲线
序号
操 作
多功能窗显示
作 用 与 说 明
1
FUNC 2
F A0
进入标定曲线状态
2
加入空白水样稍待
使液体稳定
3
ENTER
n1
调零结束 提示加入1#水样
4
放空、清洗、加待测水样
※
5
ENTER
0.＃＃＃
显示吸光度值
6
稳定后 ENTER
C
提示输入水样浓度值
7
数字键入该样浓度值40
4 0
1#水样理论值
8
ENTER
n2
提示加入2#水样
9
放空、清洗、加2#水样
※1
10
ENTER
0.＃＃＃
显示2#水样吸光度值
11
稳定后 ENTER
C
提示输入2#水样浓度指
12
数字键入浓度值（80）
8 0
2#水样理论值
13
重复8，9，10，11，
测定其余水样
14
显示c时按‘ . ’
b
测定结束自动计算显示斜率符
15
ENTER
＃＃＃.＃
曲线斜率b值
16
ENTER
A
显示曲线截距符
17
ENTER
# # #. #
曲线截距a值
17
ENTER
r
显示相关系数符
18
ENTER
0。＃＃＃
相关系数r值
19
ENTER
（打印） P
自动打印，存储代码（1－9）
20
数字键入1－9 ※2
存储曲线，以备测浓度
※1；为尽量减少水样在测定时的相互影响，请在每个水样前用稀硫酸、纯水、待测水样依次清洗之。
※2；如数字键入0则可直接进行浓度测量。
测量结束按‘，’后重新显示P时再存储。
7.3.4外部输入曲线“FUNC 3”：
您的化验分析记录中如果已保留了一条或多条工作曲线，也可以在CTL-12仪器 中使用这些曲线测定COD或其它项目，使用F3功能键使分析工作更加方便。
例：已有某条曲线方程为y＝ 0.005 + 0.038X
其中：y为吸光度，X为浓度，该相关系数r＝0.999
欲将此方程输入到本仪器内存中，方法如下：
①.首先作简单数学变换，使吸光度为浓度的一次函数。
则 X＝26.3y－0.013
其中：斜率b=26.3，截距 a= -0.013，X为浓度，y为吸光度。
操 作
多功能窗显示
作用与说明
1
FUNC 3
F b
输入斜率提示
2
数字键入 26，3
26,,3
输入
3
ENTER
a
输入截距提示
4
依次键入－0，013
－0,013
输入
5
ENTER
r
输入相关系数提示
6
依次键入0.999
0.999
输入
7
重复按ENTER
b,26.3 a,-0.013, r,0.999
显示输入结果
8
ENTER
打印曲线， 显示P
打印，存储代码1－9
9
数字键入1－9
P(1－9)
10
ENTER
显示返回时间状态
存储结束
7.3.5利用内存曲线测实际水样:
在准备使用此功能测试实际水样之前,仪器内部应至少备有一条 采用如上F2或F3方式输入并存贮的曲线方能实现。
操作
多功能窗显示
操作说明
1
FUNC 4
F P
测浓度.键入欲使用存储代码
2
数字键
打印内存曲线，显示A0
提示加入空白样 ※
3
加入空白水样.稍候
待溶液稳定
4
ENTER
n1
提示加入1#水样
5
放空.清洗.加1#样
6
ENTER
0.＃＃＃
测吸光度
7
ENTER（稍停）
0.＃＃＃
稳定后，停止测量
8
ENTER
＃＃＃.＃ （打印）
显示浓度 打印浓度
9
重复5－8步骤
继续完成其余水样的测量
10
（ 。）
返回时间状态
结束
自动打印结束 END
7.3.6 打印内存全部曲线 F 5
您如想了解内存曲线的斜率、截距、操作员、曲线标定日期，可使用此功能。
操作：
‘FUNC’‘5’
自动打印内存全部曲线。
7.3.7清除内存某一条曲线FNUC 6
仪器工作一段时间后，您可能会认为某条曲线已不适用，如欲删除某条曲线，可采用如下两种方式。
a.使用F2或F3功能重新标定或输入一条曲线。存入欲取消曲线索引号内,则该空间的原曲线已被新曲线代替。或者如下操作；
b.删除；
序号
操 作
多 功 能 窗 显 示
操 作 说 明
1
‘FUNC’‘6’
F P
删除命令
2
键入数字1－9
P＃
输入欲删除曲线之索引号
3
ENTER
U＃
请确认曲线索引号是否正确
4
‘＋/－’ ※
返回时间显示
曲线已删除
※；如改变其他键则取消操作。
7.3.8 功能扩展;
1，同计算机的连接。 （略）
2，连接外部分光光度计。 （略）
注意事项:
1.空白实验必须与水样使用同一批号氧化剂和催化剂。
2.反应管用10％硫酸洗涤。不得用重铬酸钾洗液及其它合成洗涤剂洗刷，以免铬化合物腐蚀或洗涤剂粘附在客管壁内影响测定结果。
3.操作时应十分小心,试剂为强酸,切勿直接触防止意外烧伤,操作时,严防试剂溅出,造成对仪器及操作者的伤害。
4.冷却时仔细操作,防止冷却水进入反应管或沾污管口管塞,影响测定结果。