⑴ mq60prob全自动化学发光怎么使用
1、打开仪器电源,等待仪器自检,按键F3STARTUP启动,查看库存INVENTORY。
2、样品预旁仔处理过程,将样品放入样品杯中。
3、样品测试程序按样品检测进行。
4、选择PRINT键,打印出结果。
5、待清洗完毕,返回主菜单,选型桐择F2SHUTDOWN关机,关闭仪器电源。运租汪
⑵ 如何做好ECL发光检测实验
Western blot显色的方法主要有以下几种:一、放射自显影,二、 底物化学发光ECL,三、底物荧光ECF,四、底物DAB呈色。现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色。大部分Western blot显色底物是化学发光底物,发表文章通常也是用底物化学发光ECL。
ECL法检测辣根过氧化物酶的原理是辣根过氧化物酶在H2O2存在下,氧化化学发光物质鲁米诺(lumino,氨基苯二酰一肼)并发光,在化学增强剂存在下光强度可以增大1000倍,通过将印记放在照相底片上感光就可以检测辣根过氧化物酶的存在。ECL法操作简便,应用现成的试剂盒,按照说明,将两种显色底物等体积混合后将其覆盖在膜表面使其均匀,用玻璃胶片把膜包起来,马上在暗室中将X光片覆盖在膜的上面,显影、定影(或用荧光检测仪检测)
ECL Western特异发光检测试剂盒用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。下面以engreen的超敏型ECL发光液Enlight-Plus为例,说一下检测 实验步骤 。
1. 常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。以下操作在室温进行。
注意:Enlight-Plus 推荐的抗体稀释度为:
储存液浓度为1mg/ml 的一抗推荐稀释度 储存液浓度为1mg/ml 的二抗推荐稀释度
1:1000-1:5000 或 0.2-1.0μg/ml1:2000-1:10,000 或10-50ug/ml
2.新鲜配制发光工作液。将BufferA 和Buffer B 按1:1 比率混合,制成发光工作液(每1cm2膜需要0.125ml 发光工作液)。转移到清洁的塑料小盒中。
3. 用镊子将漂洗过的膜取出,将膜的下缘与滤纸轻轻接触以除去膜上多余的洗液,但勿使膜完全干燥。将膜转移至有发光工作液的塑料小盒中,使其完全浸泡,轻轻摇晃,室温孵育几十秒到1 分钟。
4. 用镊子将膜夹起5-10 秒,并将膜的下缘与滤纸轻轻接触以除去膜上多余的发光液,迅速将膜完全包裹于洁净保鲜膜内,去除气泡和褶皱,蛋白面朝上固定于X 片暗盒内。
5. 在黑暗中一次重叠放入3 张X 光胶片,30 分钟或更长时间后全部取出显影。
6. 对同一张膜进行多次蛋白杂交:用PBST 或TBST 洗涤掉发光液(10min×3 次),然后从开始一抗杂交即可。
ECL的使用注意事项 :
1. 发光液不宜暴露于强光下时间过久,请避光保存,在暗室操作。
2. 为了得到最佳的曝光效果,优化一抗、二抗的稀释比例。
3. 请选择高质量保鲜膜。
4. 对于Enlight发光液,应避免使用NaN3 回收HRP 偶联的抗体,因为NaN3 能抑制HRP 的活性。
⑶ 化学发光试剂盒测定结果的验证方法有哪些
将印迹膜置于封闭液中,室温轻轻震荡20-60min,以封闭掉非特异性位点。
弃去封闭液,加入适量的一抗溶液,于摇床上轻轻震荡1h。(也可将印迹膜与一抗在2-8°C条件下孵育过枣橡配夜。)
将印迹膜于洗脱液中悬浮清洗5min以上如敏,并更换洗脱液4-6次。
4
将印迹膜与适量的HRP-结合物置于摇床上轻轻震荡,凳指室温孵育1h。
5
重复步骤3以去除未结合的HRP-结合物
6
将A液和B液以1:1混合即得到超敏ECL化学发光工作液,推荐使用量为0.1mL/cm2。
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将工作液与印迹膜于室温孵育5min。
8
将膜从工作液中取出,并用吸水纸吸去多余的液体,置于两层干净的保鲜膜之间,小心挤出印迹膜与保鲜膜之间的气泡。
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将印迹膜置于暗盒中,蛋白面朝上,于暗室中进行X-光胶片曝光。
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建议首次曝光时间为60s,进而通过调整曝光时间获得较好的实验结果。
⑷ ecl化学发光试剂盒是干吗用的
化学发光试剂盒是干吗用的
我只听说在研究分子表面蛋白质时会用到,最近还有一个华裔科学家因为发光蛋白得了诺贝尔奖的。
具梁基宏体的应锋模用有:
细胞检测中的应用
脂质过氧化物检测的应用(自由基、活性氧分析)
生物传感器的研究应用
分子生物学研究的橡册应用
卫生学检测中的应用
环境检测应用
药物筛选
医学应用
应用化学发光免疫分析法可用于对甲状腺素类、肿瘤标记物、生殖-孕激素类、血清抗原抗体类、心脏指示类等项目检测。
⑸ 安图生物lumo化学发光怎么使用
化学发光怎么使用
化学发光现象是一种常见的自然现象,电子发光法是认为的物理发光。
1、化学发法。利用化学发光测定化学发光反应反应物、催化剂、增敏剂、抑制剂,偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂的方法叫做化学发光法。化学发光是物质在化学反应过
程中,其物质分子吸收化学能产生光的辐射现象,如:REK-20N型化学发光定氮仪是兴化睿科采用化学发光检测原理,待测样品(或标样)被引入到高温裂解
炉后,在1050℃左右的高温下,样品被完全气化并发生氧化裂解,其中的氮化物定量地转化为一氧化氮(NO)。样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份。亚稳
态的一氧化氮在反应室内与来自臭氧发生器的O3气体发生反应,转化为激发态的NO2*。当激发态的NO2*跃迁到基态时发射出光子,光信号由光电倍增管按
特定波长检测接收。再经微电流放大器放大、计算机数据处理,即可转换为与光强度成正比的电信号。在一定的条件下,反应中的化学发光强度与一氧化氮的生成量
成正比,而一氧化氮的量又与样品中的总氮含量成正比,故可以通过测定化学发光的强度来测定样品中的总氮含量。
2、电子发光,主要技术特征是:将至少两只LED芯并联后形成一组发光电路,通过金属导线联接电源脚座;也可以将上述一组发光电路设置成为多组发光电路,通
过金属导线并联后接电源脚座。其有益效果是造型小巧美观,耗电量小,亮度高使用寿命长,大大降低了照明灯的制造和使用成本。现有应急灯如果以充电电池作为
电源,使用电子发光管则可延长照明时间5至10倍。