⑴ 狂犬病的简史
原文地址：狂犬病疫苗发展史作者：路边有树人用狂犬病疫苗发展史
人用狂犬病疫苗的发展经历了从传统的神经组织疫苗到现行的以组织培养疫苗为主的过程，并且正在应用现代生物技术不断改进和发展。
* 早期使用的传统疫苗：
1882年，巴斯德在牛脑分离到一株狂犬病病毒，在兔脑内连续传90代。该病毒传至50代时，潜伏期由原来的15天缩短为固定的7天，而且毒力减弱，成为固定毒。1885年巴斯德尝试用固定毒感染兔，发病7天后取出脊髓，干燥后制成减毒活疫苗。该疫苗成功地治愈了一名9岁男孩。1908年，Fermi改进了巴斯德的方法，但残余毒力仍高达100MLD50。造成由固定毒引起的急性脑脊髓炎。1973年，WHO狂犬病专家委员会建议，不能将含有活毒的狂犬病疫苗用于人体，因此，狂犬病减毒活疫苗结束了历史使命。1911年，Semple在此基础上作了进一步改进，将脑组织灭活，制备了无毒性的Semple脑组织灭活疫苗。虽然与减活疫苗相比，安全性得到很大的改善，但使用Semple疫苗后，仍出现了严重的神经麻痹事故，其发生率在1/500～1/2000间。这种疫苗目前在发展中国家仍在广泛使用。我国自1949年起，一直使用由羊脑制备的Semple疫苗，直至1980年停止使用，由原代地鼠肾细胞疫苗取代。1955年，Fuenjalida和Palacios制备新生鼠脑（SMBV）疫苗。该疫苗在过去40多年里在南美洲广泛使用。但是神经并发症发生率仍然高达1/8000。总结神经组织疫苗主要存在着下列问题：免疫原性弱，含有神经麻痹因子，其中有的含有残余的活病毒。另外，山羊和绵羊用于疫苗生产可能会被潜伏病毒感染。因此，WHO专家委员会在第七次报告（1984年）中支持限制和放弃生产脑组织疫苗，并极力提倡使用灭活的细胞培养疫苗。* 禽胚疫苗：
为了降低神经麻痹事故的发生，1956年Peck研究制备鸭胚疫苗（DEV）。该疫苗在美国和其他国家用作狂犬病暴露后处理并广泛使用了27年，很少观察到严重的副作用，但中和性抗体水平不如脑组织疫苗。人二倍体细胞疫苗问世后，经比较显示安全性和免疫效果均优于DEV，1982年很多国家已经停止使用DEV疫苗。*细胞培养疫苗—WHO推荐使用的疫苗：
1. 人二倍体细胞疫苗（HDCV）：
1964年，美国Wistar将Semple疫苗生产用PM狂犬病毒株适应到WI-38人二倍体细胞株，后来法国Merieun研究所又适应到MRC-5细胞株生产疫苗。病毒经培养、澄清、加热和β-丙内酯灭活、冻干制备成疫苗。该疫苗于1974年首次获准生产，并于1978年开始商品化。由于HDCV所具有的高免疫原性和良好的耐受性，目前在美国、加拿大、大多数欧洲国家和几个亚洲国家使用。HDCV的缺点在于HDC不太容易培养，而且狂犬病毒在HDC上培养的病毒滴度相对较低，这使得疫苗的价格非常昂贵，这样就限制了该疫苗在发展中国家的使用。2. 原代细胞培养疫苗：
原代细胞培养疫苗具有的一个优点是不必冷冻保存细胞种。但每批疫苗须检查培养器官源的杂质（细菌、支原体、病毒），并且动物器官的可用量是限制工业化生产的因素。地鼠肾细胞疫苗（PHKCV）：1958年，Kissling提出并由Fenje进一步发展，将狂犬病毒固定毒适应到地鼠肾细胞（PHKC）上生产灭活疫苗，并获得成功。1968年该疫苗在加拿大批准用于人体加强和暴露前接种。该疫苗于1980年在我国获得国家卫生部批准的生产文号，取代Semple疫苗。狗肾细胞疫苗：1978年，Van Wezal等使用狂犬病毒PM株适应到狗肾细胞，并使用了微载体以使疫苗大规模生产。疫苗对暴露前后的人体接种实验在荷兰进行，获得的免疫反应和HKCV具可比性，并于1980年获准在荷兰生产。鸡胚细胞疫苗：Kando 1965年将Flary HEP株适应到鸡胚细胞，培养病毒经β-丙内酯灭活、浓缩、冻干（后采用区带离心纯化加以改进）制备成疫苗并在日本商品化生产。1983年Barth等从上述日本疫苗分化出一种用Flary LEP株适应到鸡胚细胞上的纯化鸡胚细胞疫苗（PCECV）。该疫苗目前由德国Chiro Behring GmbH公司生产。3. 传代细胞系疫苗：
生物科技的进步，如传代细胞在微载体上用发酵罐培养，使狂犬病疫苗工业化生产成为现实。1984年由法国Merieun研究所研制成功Vero细胞疫苗。制备过程中采用了微载体技术（细胞贴附在上悬浮培养）进行工业化大罐培养。80年代和最近的大量实验证实无论用作暴露前人体免疫或暴露后处理，Vero疫苗均获得很好的免疫效果。1984年11月，WHO和RF合作，采用微载体技术高密度灌流Vero细胞，工业化生产狂犬病疫苗，历时15年，取得成功。目前，Vero细胞疫苗已经在世界上许多国家取得了安全有效的使用经验。