㈠ 控制微生物生长的几种方法;以高温为代表的物理方法杀死微生物
要控制微生物生长,就应根据他的鹅特性来选择对应的方法,例如它喜欢氧,就充氮;它厌氧就通风、供氧;它怕低温,就冷藏、冷冻;它怕射线,就用放射性元素产生的射线照射,如此等等。
㈡ 实验室常用哪些细胞破碎方法
一般用物理或者化学方法来使得细胞裂解
物理法:
(1)反复冻融:将细胞反复放置于-20℃冷冻以及25-30℃环境下,反复冷冻溶解10次-20次。适用于例如血细胞等大部分哺乳动物细胞。
(2)煮沸法:与冻融法相反,将细胞放置于100℃沸水煮沸5-10分钟,适用于大部分微生物细胞。
(3)超声法:将细胞放置于超声破碎仪中,以一定频率的超声破碎细胞,适用于绝大部分微生物细胞。
(4)渗透压法:将血细胞等细胞膜较为薄弱的细胞放置于纯水等低渗溶液,细胞吸收大量水分破解。
(5)液氮法:植物细胞一般采用液氮捻磨的方法破解细胞。
化学法:
(1)强酸、强碱溶液:一般应用0.5N NaOH溶液可以裂解绝大部分动物细胞和微生物细胞。
(2)生物酶:一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物细胞。
㈢ 我想知道细胞破碎的方法及各种方法的原理和优缺点
机械法:主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。
1. 组织捣碎机
将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等,转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。
2. 匀浆器
先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎。匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙保持在十分之几毫米距离。制作匀浆器的材料,除玻璃外,还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等。此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
存在的问题;较易造成堵塞的团状或丝状真菌,较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器,质地坚硬,易损伤匀浆阀,也不适合用该法处理。
3. 研钵
多用于细菌或其他坚硬植物材料,研磨时常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨剂,以提高研磨效果。
4. 细菌磨
是一种改良了的研磨器,比研钵具有更大的研磨面积,而且低部有出口。操作时先把细菌和研磨粉调成糊状,每次加入一小勺,研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。
物理法:主要通过各种物理因素使组织细胞破碎的方法。在生化制备中常用的方法有:
1. 反复冻溶法
原理:因突然冷冻,细胞内冰晶的形成及 胞内外溶剂浓度的突然改变而破坏细胞。
方法:将待破碎的细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
特点:此法适用于组织细胞,多用于动物性材料,对微生物细胞作用较差。
2. 急热骤冷法
将材料投入沸水中,维持85-90分钟,至水浴中急速冷却,此法可用于细菌及病毒材料。
3. 超声波处理
用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,频高于15~20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理:可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。
特点:操作简单,重复性较好,节省时间;多用于微生物和组织细胞的破碎。
存在问题:超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递,散热均有困难,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。空化作用是细胞破坏的直接原因,同时会产生活性氧,所以要加一些巯基保护剂。
化学及生物化学法:
1. 自溶法
在一定PH和适当的温度下,利用组织细胞内自身的酶系统将细胞破碎的方法。此过程需较长时间,常用少量防腐剂如甲苯、氯仿等防止细胞的污染。
2. 酶溶法
利用各种水解酶,如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来。有些细菌对溶菌酶不敏感,加入少量巯基试剂或8摩尔尿素处理后,使之转为对溶菌酶敏感而溶解。
特点:
a) 此法适用多种微生物;
b) 具有作用条件温和;
c) 内含物成分不易受到破坏;
d) 细胞壁损坏的程度可以控制。
存在的问题:易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶溶法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。有一定局限性,不适宜大量的蛋白质提取,给进一步纯化带来困难。
3. 化学渗透法
某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。
特点:多用于破碎细菌,且作用比较温和;提取核酸时,常用此法破碎细胞。
存在的问题:时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差:某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。
小结
无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
㈣ 有人说癌细胞怕热,是真的吗
首先癌细胞怕热,这句话是对的。癌细胞发源于正常的细胞,癌症的发生是由于在各种致癌因素的作用下发生了多基因突变,经过多步骤的发展,正常细胞演变为癌细胞。
癌细胞具有高速生长侵犯周围正常组织器官和发生远处转移的侵袭性能。由于癌细胞较正常的细胞增殖能力强,生长速度快,所以癌细胞对温度就特别敏感。
大量的研究已经证明癌细胞对热特别敏感,当温度达到45度以上时,癌细胞就不能存活,但是癌细胞在零下200多度也可以正常存活。
正是基于这样的特性,也有人开始尝试进行热疗杀癌的疗法。也有一些研究和经验表明进行热疗对皮肤癌、前列腺癌等癌症具有一定的治疗作用。
但是由于人体对体温有调节作用,当人体达到40度以上时,身体会通过体温调节功能,控制全身体温的上升。
另外,肿瘤往往是全身系统性的疾病,只升高局部的温度并不一定能杀灭全身扩散的肿瘤,因此热疗在肿瘤治疗中的地位也受到了广泛质疑。
目前进行热疗原理,抗癌的方法主要有射频消融,光动力治疗等手段,通过这些手段局部升高肿瘤的温度,达到杀死肿瘤的目的。
是的,癌细胞确实怕热,癌细胞是由正常细胞突变而来的,与正常细胞有非常多相似的特点。我们常人的体温是37摄氏度左右,也就是说不论是肿瘤细胞还是正常细胞,都是在这个温度下比较合适,因为人体内的各种代谢酶,最适合的温度都是37度。我们听说过这样的说法,高烧不退,把脑子给烧坏了,特别是小孩子,体温调节的机制不完全,高热的时候,可能导致抽搐。
所以,不论是正常细胞还是肿瘤细胞,都怕热!但是,肿瘤组织更怕热。
是这样的,尽管肿瘤组织的血运非常丰富,但是肿瘤的血管和正常组织的血管不一样,肿瘤的血管扭曲扩张,杂乱无章,血流阻力大,容易形成血栓。肿瘤血管神经感受器不健全,对温度不敏感。如果同时给肿瘤和正常组织加热,正常的组织可以通过血液流动,快速的将热量带走。而肿瘤组织血流不畅,散热要差一些。 利用这样的原理,可以通过加热,杀死癌细胞,而豁免正常的细胞。
肿瘤热疗
确实有这种治疗,我们经过反复的试验,证实,最适合的温度为42.5摄氏度。当肿瘤周边的组织加热在42.5 的时候,肿瘤内部可以达到48至53摄氏度,而周边的正常组织,一般不超过43 。通过高温可以直接杀死癌细胞,还可以通过热休克蛋白,诱导癌细胞凋亡。
癌细胞当然怕热,问题是热到多少度?不管是癌细胞,还是正常细胞,或者其他细胞,都可以说怕热,热到一定程度,金子都会融化,你说金子怕热吗?当然,这似乎有抬杠之嫌。其实我是因为知道问这个问题估计是:听说癌细胞怕热,所以想采取“热”的方法来治癌,比如,泡热水澡啦,用火烤啦,还有各种奇奇怪怪的所谓“热疗”。
癌细胞也不是“神”,当然怕热,当温度高到一定程度,当然会死,正常细胞也会死。所以,你千万不要想当然或听别人的,自创出一套所谓的“热疗”方法来治癌,那是乱来。
医学上也有“热疗”,比如热灌注化疗,深度热疗,作为一种局部治疗手段,辅助治疗肿瘤,这需要特别的操作,而用只是一种辅助治疗,很多情况下作用也并不大。
不要听说癌细胞怕热(废话,当然怕热,它也不是铜墙铁壁),弄出个用热水或火烧的方法来治癌,癌没治好,人没了。不要听说癌细胞怕饿(废话,没有营养供应,管它是癌细胞还是什么细胞,都得死),就让病人饿着,癌饿死了,病人也没了。
得了癌症,还是听从医生的安排,好好正规治疗,不要乱折腾。
癌细胞虽然看起来凶恶无比,会消耗营养并四处转移,但既然是细胞当然是怕热的。不同于一些特殊的细菌和真菌,可以单独在自然界生存,并具有耐寒耐热的特性。肿瘤细胞与正常细胞一样,是不耐热的。这是因为癌细胞只是变异的人体细胞,跟普通细胞在本质上是相同的,对热的耐受有一定的限度,而且癌症细胞比正常的人体细胞更为怕热。用42度以上的温度,就可以杀死癌细胞。因此临床上有肿瘤热疗这个治疗方法。
随着电磁波技术的发展,各种热疗机,比如微波热疗机、高能聚焦热疗机、射频热疗机、腹腔灌注热疗机、射频插植消融热疗机等等应用于临床。深部热疗适合于头颅之外的各部位的原发性和转移肿瘤的治疗,尤其是胸部、腹部及盆腔深部肿瘤治疗。但目前热疗只能作为肿瘤治疗辅助手段,一般与放疗化疗及免疫治疗联合,有协同增敏、提高疗效的作用。
肿瘤热疗的原理是利用物理方法将组织加热到能杀灭肿瘤细胞的温度(42.5 —43.5 ),持续40 60分钟,达到既破坏肿瘤细胞又不损伤正常组织(正常组织细胞的温度安全界限为45 1 )的一种方法。临床上使用较多的是区域热疗和局部热疗,比如腹腔热灌注化疗,肿瘤局部射频消融治疗等等。优点在于可以使肿瘤组织局部温度达到42.5 以上,能在相对较短的时间内杀灭癌细胞。其局限性在于,它们只是对局部起作用,都不属于全身性的治疗手段。
有人认为既然癌细胞不耐热,那是不是发烧可以杀死癌细胞呢?不可能,肿瘤细胞局部必须达到41-42摄氏度才可能出现凋亡或者坏死,而人体不可能发烧到这个温度,即便时间很短的高烧,都会削弱人体免疫系统,长期发烧会使机体各个器官会逐渐出现功能衰竭,到时候肿瘤细胞没死,人也消耗得差不多了。
癌细胞怕热不假,热疗绝对不是架在火炉上烧烤,也不是去汗蒸房高温加热。想通过发烧、火烤、艾灸、蒸桑拿等高温的方式杀死癌细胞是不可能实现的,不仅没有任何科学依据,而且对人体危害很大。
问题:有人说癌细胞怕热,是真的吗?多年前看过前苏联科学家关于用热疗治疗癌症的报道,据说有效。又据报道:人体体温低于35度是癌细胞裂变的最佳温度。根据以上两个报道,我们知道了癌细胞不喜欢高温,即高于正常体温的温度,温度高于正常体温,癌细胞正常分裂活动即会被抑制。温度低于正常体温,癌细胞即会开始裂变增值增长增重。所以,人体的正常体温是 健康 的最基本的保障。由此,我们是否可以设想,创造一种使人体局部发热的技术,促使癌细胞休眠,抑制进而被控制其活性,从而被杀灭。
首先不光是癌细胞怕热,我们人体所有的细胞都怕热,温度达到一定的高度时,细胞内部会发生变性、蛋白质凝固等等。
就目前在治疗肿瘤采取的冷治疗或者热治疗就是通过温度的变化这一原理达到治疗目的的,并且治疗效果非常明显。
根据测试提供的数据,人体温度超过39摄氏度时,肿瘤细胞繁殖速度开始减缓,超过41度时大部分肿瘤细胞会停滞生长。
通过人为因素,把肿瘤组织内部温度提升到摄氏60度时,细胞内部变性,蛋白质凝固,肿瘤细胞开始死亡。局部温度达到80度时,全部肿瘤细胞都可以被杀灭。
目前常用的局部加温的治疗方法有:射频消融,微波消融,这些都是把肿瘤细胞“热死”的治疗方法。再一个就是把肿瘤细胞“冻死”,目前国内外比较先进的是氩氦刀冷冻治疗系统,对于条件符合的实体肿瘤(包括:肝癌、肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、脾癌等等),有些可以达到临床治愈的效果。
在大家的印象里,可能癌细胞就像是打不死的“小强”,生命力非常顽强,比我们自身的正常细胞更顽强,很难被各种药物杀灭,对冷热的耐受性、受伤后自身修复的能力都远远强于我们的正常细胞。
其实,不是这样的。
人体的细胞经过千百年的进化,有着相对完美的适应能力,而癌细胞是正常细胞发生的某种病态突变,这种改变只是导致了细胞的异常增殖,实际上这种病态细胞对环境的适应能力、对冷热的耐受以及自身修复能力都要劣于正常细胞。
回到题目中。
有人说癌细胞怕热,是真的吗?的确,癌细胞对热的适应性,比正常的细胞要差,一般来讲,环境温度超过42 的时候,就达到了癌细胞的极限值,也就是说,达到这种温度时癌细胞就可以被杀死。所以,临床有腹腔热灌注化疗,也是基于这一原理。
但是,癌细胞是在人的身体里,和人体的组织器官是一个“整体”,很难被单独加热到这种温度。而如果人体的体温达到42 的时候,也就超过了人体内环境正常代谢的极限,用这种方法治疗癌症,最终只能是“玉石俱焚”。所以,临床上也很难用使人体体温升高的方法治疗癌症。
首先我可以很明确的告诉大家,这件事儿绝对是真的。
但是,可但是这个热问题千万不能随便的加热啊!
首先除了癌细胞呢,还怕热之外,我们正常的细胞,也是怕热的。但是相对比正常细胞,癌细胞会更怕热一点。所以,治疗癌症现在有一种相对成熟的 辅助治疗方式 ,那就是热疗。
经过大量的调查和测试。 42.5 度这个神奇的温度下,既能相对有效的破坏癌细胞,对正常细胞的损害又相对最低(人体正常细胞的适宜温度是37度左右,癌细胞也是如此)。所以医院里的热疗基本上都是42.5度。
从结果上来看热疗,确实能够辅助治疗癌症。但是热疗本身对癌症患者来说是存在一定的风险的,有些因素是我们不得不考虑的:
营养海贼团船长 肖云涛
国家二级公共营养师
营养学会会员
衡膳营养讲师、营养大使
擅长上班族营养、癌症营养
不光肿瘤细胞怕热,各种病毒细菌也怕热。如艾滋病病毒对热很敏感,60 1小时或80 30分钟,就不能检出感染性病毒。对艾滋病病毒灭活,100 20分钟消毒即可。乙肝病毒加热到100度,只要10分钟就可使其失去传染性。关键问题是人体也耐受不了那么高的温度啊。
㈤ 灭菌是指用物理或化学方法杀死物体上的所有微生物
灭菌是指用物理或化学方法杀死物体上的所有微生物及其孢子。
灭菌是指将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞(或孢子)杀灭或去除,从而达到无菌的过程。
微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件,也是食品工业和医药领域中必需的技术。
将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞(或孢子)杀灭或去除,从而达到无菌的过程。
㈥ 反物质可以杀死癌细胞吗
带有相反电荷的物质粒子和它的反物质伙伴常常是很容易区分的,但是中微子却有些特别。作为宇宙中大量存在的粒子之一,每秒钟有几十亿颗中微子以接近光速的速度经过每一寸人体。然而,由于这些几乎没有质量的神秘粒子既不带电荷、又不怎么与其他物质相互作用,因此监测到它们异常困难。20世纪30年代,意大利物理学家埃托雷·马约拉纳提出中微子可能是自己的反物质粒子。如果这个理论是正确的,那么科学家可能能够看到超级罕见的事件,也就是中微子双β衰变,它指的是放射性的原子核衰变,释放出两个电子和两个中微子,由于中微子可能是自己的反物质粒子,它们会相互碰撞并相互湮灭,科学家们将只会观察到电子。如果能够证实马约拉纳的预言,这对于解释对称性破缺是有帮助的。科学家们假设中微子原有轻、重两种。现今我们探测到中微子都是轻的那一种,而重的那一些在大爆炸之后很快就没有了。如果能够解释重的中微子消失的原因,那也许就能够解开物质存在之谜了。
㈦ 消毒,杀菌,哪个杀死细胞
消毒室消灭病毒和其他大分子致病原,不一定会杀死细胞。杀菌,则是杀死细菌会杀死细胞。
巴氏消毒法
消毒 是指杀死病原微生物,但不一定能杀死细菌芽孢的方法。常用化学的方法来达到消毒的作用。
灭菌 是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内)全部杀死的方法,通常用物理方法来达到灭菌的目的。
巴氏消毒法是法国人巴斯德(pastuer)于1865年发明,经后人改进,用于彻底杀灭啤酒、酒、牛奶、血清蛋白等液体中病原体的方法,也是现世界通用的一种牛奶消毒法。
㈧ 紫外线的杀菌是物理原理还是化学原理
紫外线杀菌是利用紫外线强的穿透力,使细胞内的蛋白质(主要的酶都受到破坏)变质从而杀死细菌。所以这是一种物化结合的方法,物理方法是手段,最终的效果是由于化学变化导致的。
㈨ 杀死微生物营养细胞而不杀死芽孢的方法成为什么
消毒 是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法.通常用化学的方法来达到消毒的作用.用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂.灭菌 是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内)全部杀死的方法,通常用物理方法来达到灭菌的目的.防腐 是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法.用于防腐的化学药物叫做防腐剂.无菌 不含活菌的意思,是灭菌的结果.防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作. 利用物理、化学等方法杀死病原微生物以防止传染病传播的措施.常用的消毒法有物理的加热消毒法和化学的药剂消毒法.加热能使病原微生物细胞中的蛋白质凝固并使酶失活,因而能杀死微生物.煮沸是最常用的加热消毒法,一般不产芽孢的微生物经5分钟煮沸就可被杀死.用于消毒的化学药剂称消毒剂.常用的消毒剂种类很多,有75%酒精、碘酒、红溴汞(红药水)、龙胆紫(紫药水)、氯等.大多数消毒剂能使蛋白质凝固,碘酒中的碘能与蛋白质中的氨基酸结合,红溴汞中的汞能与蛋白质中的巯基结合,氯在与水作用时放出具有很强氧化能力的新生氧,使蛋白质氧化变性.消毒剂一般只对细菌的营养体有效,而对芽孢很少有杀死作用. 消毒在日常生活中应用于传染病的预防,如对饮水、食品、餐具等通过煮沸进行消毒.牛奶、饮料等食品可放在62~63℃下处理30分钟进行消毒.这样既可将结核分枝杆菌、伤寒沙门氏菌等病原微生物杀死,又不影响牛奶、饮料等的风味.英国医生李斯特于1865年首先使用石炭酸对医生的双手、手术器械、包扎绷带、手术部位等进行消毒,其后外科手术的死亡率很快从45~80%下降为15%.这充分显示了消毒在临床应用上的重要作用和意义. 消毒和灭菌区别灭菌是指将传播媒介上所有微生物全部清除或杀灭,特别是抵抗力最强的细菌芽孢. 消毒是指将传播媒介上病原微生物清除或杀灭,使其达到无公害的要求,并非杀死所有的微生物,包括芽孢.
㈩ 紫外线的杀菌是物理原理还是化学原理
紫外线的杀菌是物理原理和化学原理结合的作用。紫外线利用紫外线强的穿透力,使细胞内的蛋白质变质从而杀死细菌。所以这是一种物化结合的方法,物理方法是手段,最终的效果是由于化学变化导致的。
紫外线照射人体时,能促进人体合成维生素D,以防止患佝偻病,经常让小孩晒晒太阳就是这个道理。紫外线还具有杀菌作用,医院里的病房就利用紫外线消毒。但过强的紫外线会伤害人体,应注意防护。
(10)什么物理方法杀死细胞扩展阅读:
紫外线的涉及领域
1、化学领域
涂料固化,颜料固化,光刻。仪器分析:矿石,药物,食品分析。
2、工业领域
由于大功率超高功率低气压 UV 放电管开发的进展,以及随着微电子等产品的超微细化,在微电子、超精密器件等产品的制造过程中,由高频短波紫外线及其产生的臭氧对其产品的表面进行超精密清洗或改善其表面的接着性、附着性的干式光表面处理技术的实用化进展得很快。
3、生物领域
促进植物生长,诱杀蚊虫。细菌中的脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)和核蛋白的吸收紫外线的最强峰在 257nm~254nm。细菌吸收紫外线后,引起 DNA 链断裂,造成核酸和蛋白的交联破裂,杀灭核酸的生物活性,致细菌死亡。快速便利,因无物理接触无二次污染。